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凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量doc.doc

凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量doc

这片天灰的像在哭
2017-11-13 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量docdoc》,可适用于综合领域

凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量doc实验八凯氏定氮法测定黄豆的粗蛋白含量一、实验原理利用硫酸及催化剂与食品试样一同加热消化使蛋白质分解其中C、H形成CO、HO逸出而氮以氨的形式与硫酸作用形成硫酸铵留在酸液中。然后将消化液碱化蒸馏使氨游离用水蒸气蒸出被硼酸吸收。用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵从消耗的盐酸标准液计算出总氮量再折算为粗蛋白含量。NHCHCOOHHSO,NHSOCOSOHONHSONaOH,NHNaSOHONHHBO,NHBOHONHBOHClHO,NHClHBO二、仪器与试剂、mL凯氏烧瓶微量凯氏定氮装置、试剂硫酸铜硫酸钾硫酸硼酸溶液NaOH溶液molLHCl标准溶液混合指示剂:甲基红乙醇溶液与甲基蓝乙醇溶液,临用时按:的比例混合或甲基红乙醇溶液与溴甲酚绿乙醇溶液,临用时按:的比例混合。三、实验操作方法()样品消化:准确称取粉碎均匀的黄豆粉g左右小心移入干燥的凯氏烧瓶中(勿粘附在瓶壁上)加入gCuSO、gKSO及mL浓硫酸于瓶口倒插入一口径适宜的干燥管用胶管与水力真空管相连接利用水力抽出消化过程所产生的烟气。先以小火缓慢加热待内容物完全炭化泡沫消失后再加大火力消化至溶液透明呈蓝绿色。取下抽气管继续加热h,冷却至室温。取mL蒸馏水徐徐加入烧瓶中待样品冷至室温移入mL的容量瓶中用蒸馏水冲洗烧瓶数次并入容量瓶旋转混匀放冷再用蒸馏水定容备用。同时做一空白消化。()蒸馏与吸收:按蒸馏装置图安装好装置将所有的夹子打开。取下样品加入口的磨口塞从样品加入口加入mL的蒸馏水再插回塞好。并给冷凝管接通冷凝水。往蒸汽发生瓶加入蒸馏水至其体积的三分之二处加入几粒沸石和滴甲基橙再加入mL浓硫酸然后置于电炉上加热使水沸腾。产生蒸汽后夹上夹子让蒸汽经导管进入反应管外套待废液排放口排出蒸汽后夹上夹子使蒸汽进入反应管蒸馏洗涤分钟。打开夹子同时夹上夹子待反应管内的水全部排出到外套后打开夹子排出废水。马上从进样口加入蒸馏水约mL立即再夹上夹子待水排出反复操作次洗涤完毕。将全部夹子打开吸取mL样液(或空白液)从样品加入口加入到反应管内插上磨口塞。量取mL硼酸置于mL锥形瓶内然后将此吸收液置于冷凝管下端冷凝管下端应插入到液面以下。再从样品加入口加入约mLNaOH溶液使反应管内的样液有黑色沉淀生成或变成深蓝色用少量水洗涤加入口插好磨口塞并用少量水封口。夹上夹子让蒸汽经导管进入反应管外套待废液排放口排出蒸汽后夹上夹子使蒸汽进入反应管蒸馏开始待吸收液变蓝后计时蒸馏分钟,将冷凝管下端提离吸收液面再蒸馏分钟用萘氏试剂检查无氨后停止承接蒸馏液。打开夹子同时夹上夹子待反应管内的样品废液全部排出到外套后打开夹子排出废液。马上从进样口加入蒸馏水约mL立即再夹上夹子待水排出反复操作洗涤次再作样品平行测定。测定完毕打开全部夹子停止加热待冷却后拆除装置并洗涤干净。()滴定:用molLHCl滴定吸收液至变为红色为终点记下消耗的HCl体积。四、实验计算:CV,V蛋白质,Fm,式中:CHCl标准溶液的浓度molLV滴定样品吸收液消耗的HCl标准溶液的体积mLV滴定样品空白液消耗的HCl标准溶液的体积mLm黄豆粉的质量g

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