山茶油对非甾体抗炎药经皮渗透的促进作用

山茶油对非甾体抗炎药经皮渗透的促进作用 山茶油对非甾体抗炎药经皮渗透的促进作 用 第23卷第10期 2006年10月 沈阳药科大学 JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity V0】.23No.1O Oct.2006P.621 文章编号:1006—2858(2006)10-0621-04 山茶油对非甾体抗炎药经皮渗透的促进作用 王爱萍,袁丹,孙考祥,潘英妮,关俊畅. (1.烟台大学药学院,山东烟台264005;2.沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016; 3.日本北海道药科大学,北海道小樽047-0264) 摘要:目的考察山茶油对5种非甾体抗炎药体外经皮渗透的促进作用及其与药物油水分配系数 的关系.方法采用两室扩散池装置,以离体大鼠腹部皮肤为渗透屏障,用预处理皮肤法考察山茶 油的促渗透作用;用HPLC法测定非甾体抗炎药不同时间在接受池药物浓度,计算累积渗透量及 其他渗透动力学参数;用摇瓶法测定药物正辛醇一介质分配系数以拟合其与山茶油促渗活性关系. 结果山茶油可有效促进非甾体抗炎药的经皮渗透率(除双氯芬酸钠外),尤其对氟比洛芬,促渗效 果最明显(P<0.01),其增渗倍数达到3.51;山茶油的促渗活性与非甾体抗炎药的正辛醇一介质分 配系数呈类似抛物线关系.结论山茶油作为一种低毒,无刺激性的渗透促进剂.能够有效提高药 物的经皮渗透效果,具有良好的开发应用前景. 关键词:山茶油;非甾体抗炎药;渗透促进剂;分配系数 中图分类号:R94文献标识码:A 经皮给药以其独特的魅力越来越为人们所接 受,已成为医药领域重要的研究和开发内容.然 而药物透皮吸收率低是这种给药方法的主要缺 点.为改善药物穿透角质层的能力,使用促渗剂 是一个理想的方法.从中药宝库中寻找效果好, 不良反应小的渗透促进剂正日益引起人们的重 视,显示出广阔的发展前景uJ.山茶油,为红山 '茶(CamelliajaponicaL.)种子去除种皮后所得 的脂肪油,其成分与人体皮肤成分极其类似,对皮 肤无刺激性,所含的主要成分脂肪酸和萜类如油 酸等对药物经皮吸收有促进作用[2-5].山茶油 可促进特效药物的吸收,在药剂方面作为软膏基 质,也被用做注射溶剂.非甾体抗炎药(non— steroidalanti—inflammatorydrugs,NSAIDs)是一类 对炎症反应具有抑制作用的非甾体类药物,但大 多数非甾体抗炎药口服易引起胃痛,恶心,腹泻等 不良反应,严重者可导致胃溃疡,并损伤泌尿系统 和血液系统J.如能以低剂量经皮吸收剂型给 药能达到良好的治疗效果.然而,由于皮肤的屏 障作用,非甾体抗炎药的低透过率往往难以满足 治疗需要.因此,寻找合适的促渗剂是解决问题 的关键之一.影响药物经皮吸收的因素有很多, 药物的物理化学特性,尤其是油一水分配系数,是 影响药物经皮吸收的主要因素[?引.本研究中采 用两室扩散池装置,考察了山茶油对5种非甾体 抗炎药透过离体大鼠腹部皮肤的促渗透作用,并 进一步讨论了山茶油的促渗作用与药物油一水分 配系数的关系. 1仪器与材料 HPLC系统包括LC-9A泵,SPD-IOA紫外检 测器,7125进样器,C—R6A积分仪(日本岛津公 司),LichoCartR18HPLC柱(4.6rnn'l×250mm, 5m,美国Merck公司),KM一15000微离心机 (日本Kubota公司),Thrive动物剃毛刀及剃须刀 (日本三洋公司),UA一10G数字恒温水浴(日本东 京理化株式会社),MC303电磁搅拌器(日本 ScinicsCo.,Ltd),两室扩散池(自制). 山茶油(日本Tsubaki公司),氟比洛芬(美国 Sigma公司),双氯酚酸钠,异布洛芬,安替比林及水 杨酸(日本和光纯药株式会社),乙腈(色谱纯,日本 关东化学工业株式会社),其他试剂(分析纯,市售). 大鼠皮肤样品取自于雄性Wistar大鼠腹部 皮肤(9周龄,200,300g,日本三协株式会社). 2方法与结果 2.1色谱条件选择 双氯酚酸钠流动相:乙腈一体积分数为 收稿日期:2005—11-02 作者简介:王爱萍(1978一),女(汉族),山东胶南人,硕士研究生,主要从事经皮给药 新剂型研究.Te1.0535—6706030— 8017,E—mailwangaipingwap(~yahoo.corn.cn. 622沈阳药科大学第23卷 0.1%的磷酸水溶液(体积比为50:50), 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 波长 245nrn,内标为对异丙醇安息香酸酯. 异布洛芬流动相与内标同双氯酚酸钠,检 测波长262nm. 氟比洛芬流动相与内标同双氯酚酸钠,检 测波长275nm. 安替比林流动相:乙腈一体积分数为0.1% 的磷酸水溶液(体积比为30:70),检测波长 245nm,内标为安息香酸乙酯. 水杨酸流动相同安替比林,检测波长 285nrn,无内标. 其他色谱条件相同,流速:1mL?minI1;进样 体积:20L;柱温:45?.该色谱条件下,各样品 峰处均无鼠皮溶出物的干扰(图谱略). 2.2 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线绘制 分别精密称取各药物适量,用磷酸盐缓冲液 (rn3s)配制成药物质量浓度为1g?LI1的贮备液,稀 释成系列质量浓度,加入内标(或无内标)后,进样, 按"2.1"条色谱条件测定,以药物质量浓度为横坐 标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线.结果表明,各药 物在相应的质量浓度内线性关系良好.回归方程分 别为氟比洛芬A=0.6472p+1×10I4(0.1, 10nag?L,,r=0.9999),双氯酚酸钠A=0.5688 JD+3.3×10一(1--25nag?I一,r=0.9999),异布洛 芬A=8.4×10一P+2.1×10—(1,50mg?L一, r=0.9999),安替比林A=0.3254P+2.94× 10(0.2,10mg?L,,r=0.9998),水杨酸 A:9.637~103p+665. 2(1--20nag?L,,r:1). 2.3非甾体抗炎药的正辛醇一PBS分配系数测定 药物的正辛醇一PBS分配系数是指药物在正 辛醇相和PBS相中分配达到平衡后的浓度之比. 本实验中采用摇瓶法测定了试验所用5种非甾体 抗炎药的油一PBS分配系数[,结果见表1.从 表1中可以看出,该实验所用非甾体抗炎药为一 系列从水溶性到脂溶性不等的5种药物,其 lgKo—PBS从一1.44到1.98,覆盖了较广的范围. Table1MrandigKo一隅ofdrugsusedinexperiment 2.4数据处理及统计分析 经HPLC法测得样品的药物质量浓度,按下 式计算药物的累积渗透量Q: H一1 Q=(』D×Vo+?』D×V)/A. 其中是第个取样点的药物质量浓度, Vo为接受液总体积,JD为第i个取样点的药物质 量浓度,V为每次取样体积,A为有效扩散面积, 为0.95crn.药物的稳态渗透速率J(Pg?CITII2? s-1)及渗透系数K.(an?sI1)Yr别按下式计算:J= 1/3600×(dQ/dt),K=J/po,其中P0为给药池 的初始质量浓度.用增渗倍数(enhancementratio, R)来衡量渗透促进剂对药物经皮渗透促进作用 的大小:R=J/Jo.式中,J为用渗透促进剂预 处理后药物的稳态渗透速率,J.为皮肤未用任何 渗透促进剂处理时药物的稳态渗透速率. 数据的统计处理采用Dunnett和Tukey- Kramer法进行组间检验,以P<0.05为显着差 异水平,P<0.01为非常显着差异水平. 2.5体外经皮渗透试验 体外经皮渗透试验采用了两室扩散池系统. Wistar大鼠麻醉后用动物剃毛刀和剃须刀小心剔 除腹部皮肤毛发,取山茶油30L,均匀涂于该皮 肤表面预处理1min后,用滤纸轻轻将山茶油揩 净,对照组则不需任何处理.然后将该块皮肤剪 下,小心剥离皮下脂肪组织后,以角质层侧对向给 药池固定于两室扩散池上,给药池为含药物质量 浓度1g?L-1的PBS3mL,接受液为PBS3mL, 有效扩散面积是0.95cm2.试验的整个过程维 持37?的经皮渗透条件,电磁搅拌器持续搅拌以 维持动态环境.试验中分别在1,2,4,6,8,24h 从接受液中取样400L,每次取样后均及时补加 相同体积的新鲜PBS溶液.样品离心后,取上清 液进样,HPLC法测定药物质量浓度.测定了 5种非甾体抗炎药经离体大鼠腹部皮肤的透过 性,并采用预处理皮肤法考察了山茶油对其促渗 透作用.对照组及山茶油预处理后实验组的双氯 酚酸钠,异布洛芬,氟比洛芬,安替比林及水杨酸 不同时间累积渗透量曲线见图1.可以看出,离 体大鼠腹部皮肤经山茶油预处理后,非甾体抗炎 药的经皮透过性除双氯芬酸钠外均有不同程度增 加,尤其对氟比洛芬的促渗作用最强,P<0.01. 实验结果表明,山茶油为一种有效的渗透促进剂, 促渗效果良好. 第10期王爱萍等:山茶油对非甾体抗炎药经皮渗透的促进作用623 窨 ? b0 吕 ? b0 吕 ? bb A--Didofenacsodium;B--Ibuprofen;C--Flurbiprofen;D— Anfipyrine;E--Salicylicacid;O--Control;O--Camelliaoil; Eachvaluerepresentsz?5(=3—10);a?P<0.01,b— P<0.05.VS.control Fig.1Effectsofcamelliaoilonpermeationofdrugs throughexcisedratskin 图2为正辛醇介质分配系数(1gK0一PBS)一渗 透系数(K.)曲线,曲线总趋势与文献报道药物经 皮渗透系数与油一水分配系数成抛物线关系相一 致J.然而,水溶性相对较强的药物水杨酸,呈 现了较高的皮肤透过率,其原因可能是水杨酸可 增强某些药物的皮肤透过率[to】,即水杨酸既可作 为渗透药物,又可作为促渗剂.山茶油预处理皮 肤实验组的曲线趋势同对照组.在此基础上,考 察并分析了促渗剂的促渗作用与药物正辛醇一介 质分配系数的关系.图3为增渗倍数(R)与 lgKo—P璐的关系曲线.可见,山茶油的促渗作用 与分配系数亦呈抛物线系数关系,即对正辛醇一介 质分配系数适中的氟比洛芬促渗作用最强,其R. 值为3.51,而对脂溶性更强或水溶性更强的药 物,其促渗作用随之降低.结果表明,山茶油的促 渗活性对药物有选择性,即只有正辛醇一介质分配 系数适宜的药物,才可使其发挥最好的促渗效果. 吕 O--Control;O--Camelliaoil;Eachvaluerepresents;?5 (7l:3—1O) Fig?2RelationshipbetweentheKpandIgKo一啉ofdrugs Fig.3RelationshipbetweenReofcamelliaoilOndrugs andIgKo一啉ofdrugs 3讨论 a.实验采用了山茶油预处理皮肤法来评价 其促渗透活性,表明山茶油是通过直接影响皮肤 沈阳药科大学第23卷 结构,降低皮肤的屏障作用而显示其促渗透活性 的.同时,该法也避免了因渗透促进剂加入介质 中而影响药物的热力学活性[11]. b.据文献报道,药物经皮渗透行为与药物 油一水分配系数有关.本实验结果表明,促渗剂的 促渗透作用与药物油一水分配系数相关,也就是 说,促渗剂的促渗作用对药物有选择性.因此.对 于不同的药物应根据药物的不同性质选择适宜的 渗透促进剂以达到最佳促渗效果.然而,由于本 试验中所用药物数量较少,为进一步探讨山茶油 促渗作用与药物油一水分配系数规律性及其与药 物分子质量及熔点的关系,需增加药物的种类进 一 步研究,从而拟合其关系. c.山茶油成分与人体皮肤成分极其类似,相 容性好,无刺激性和过敏性,具有良好的开发应用 前景. 参考文献: 许德河,王玮.中药透皮促进剂的研究进展[J]. 中国药业,2005,14(1):78—79. 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Effectsofcamelliaoilonpermeationofnon—? steroidalanti—?inflammatorydrugs WANGAi—ping,YUANDan2, SUNKao—xiang,PANYing—ni2,ToshinobuSEKI (1.SchoolofPharmacy,YantaiUniversity,Yantai264005,China;2.SchoolofTraditionalChi— neseMateriaMedica,ShenyangPharmceuticalUniversity,Shenyang110016,China;3.Hokkaido CollegeofPharmacy,Otaru047—0264,Japan) Abstract:0bjectiveToexaminetheenhancingeffectofcamelliaoilontheskinpermeationofnon-steroidal anti— inflammatorydrugs.MethodsThepercutaneouspenetrationexperimentwasperformedona2一chamber diffusioncellinvitrowiththeapplicationofcamelliaoiltotheskinasapenetrationenhancer.Theratab— domenskinwasusedasbarrier.ThesamplesfromthereceptorsolutionwereassayedbyHPLC.Theparti— tioncoefficientsofdrugsbetweenn— octanolandvehicleweremeasuredtogettherelationshipbetweenthe enhancingeffectofcamelliaoilandpartitioncoefficients.ResultsCamelliaoilcouldeffectivelyenhancethe permeationofdrugsthroughtheexcitedratskinespeciallyforflurbiprofen(P<0.01)withtheRevalue 3.51.Therelationshipbetweentheenhancingeffectsandthepartitioncoefficientsofdrugsbetweenn—oc- tanolandvehiclewerelikeparaboliccurve.ConclusionsCamelliaoilmaybedevelopedasaneffectivepene— trationenhancerwithlowtoxinandwithoutirritationwhichisworthyofexploitation. Keywords:camelliaoil;non-steroidalanti— inflammatorydrugs;penetrationenhancer;partitioncoefficients