间接凝集抑制试验(妊娠试验)
【目的】
通过妊娠试验的基本操作过程,了解间接凝集抑制试验的原理、方法及应用。 【原理】
将待检抗原(或抗体)与已知可溶性的抗体(或抗原)先行混合,作用一定时间后,再与已知可溶性抗体
(或抗原)对应的抗原(或抗体)致敏的乳胶颗粒作用,如待测样品中含有相应抗原(或抗体),便可与
加入的抗体(或抗原)结合。当再加入抗原(或抗体)致敏颗粒后,则无相应的抗体(或抗原)与胶乳颗
粒
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
面的抗原(或抗体)结合,因而不出现凝集现象,此为胶乳凝集抑制试验。因此不发生凝集者表明待
测样品中含有相应抗原(或抗体),为阳性;发生凝集者
说明
关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书
样品中无相应抗原(或抗体),为阴性。 孕妇尿液中含有绒毛膜促性腺激素(HCG),正常人尿中无。当向孕妇尿中加入一定量HCG抗体时,由于发生抗原抗体反应,抗体被消耗。此时,再往尿中加入胶乳抗原(吸附有HCG的聚苯乙烯胶乳颗粒),因已无抗体,故不能发生凝集——即凝集被抑制,为凝集抑制试验阳性;反之,被检尿中无HCG(非妊娠尿),加入HCG抗体后未被结合和消耗,胶乳抗原加入后,抗原与抗体发生反应,出现肉眼可见的均匀细小颗粒
——即凝集末被抑制,为凝集抑制试验阴性,亦即妊娠试验阴性。
【材料】
1. 聚苯乙烯胶乳抗原(吸附有HCG)、兔抗人HCG免疫血清(含抗HCG抗体)、生理盐水。 2. 孕妇尿液、正常人尿液、待检尿液。
3. 带漆圈的黑色玻璃板、毛细滴管、牙签、特种铅笔。
【方法】
1. 取画有2.5~3 cm大小漆圈的黑色玻璃板,用特种铅笔做好标记,圈1作为试验,圈2作为阳性对照,圈3作为阴性对照。
2. 用3支洁净的毛细滴管分别加待检尿液、孕妇尿液、正常人尿(或生理盐水)各一滴于圈1、圈2和圈3内,然后于上述三圈内各滴加免疫血清一滴,分别用牙签(或火柴棒)混匀。在桌面上连续缓缓摇动1~2 min。
3. 于上述三圈内各加胶乳抗原一滴,混匀,再连续摇动2~5 min,观察结果(表6-1)。
表7-1 胶乳妊娠试验
圈号 1 2 3
第1步 待检尿液 孕妇尿液 正常人尿(或NS)
第2步 HCG免疫血清 HCG免疫血清 HCG免疫血清
第3步 胶乳抗原 胶乳抗原 胶乳抗原
现象 凝集 不凝集 不凝集 凝集 结果判定 - + + - 结果意义 非妊娠尿 妊娠尿 阳性对照 阴性对照 【结果观察】
阴性对照圈内应出现明显的均匀一致的细小凝集颗粒。阳性对照圈内仍为均匀乳胶状无凝集颗粒。 如试验圈内出观明显的均匀一致的凝集颗粒为阴性反应,说明待检尿液中没有HCG,即为非妊娠尿;如不出现凝集则为阳性,说明待检尿为妊娠尿,即尿液中含有HCG。
【注意事项】
1.所用的免疫血清必须在有效期内使用,用前应充分摇匀。
2.吸取不同样品的毛细滴管和搅拌不同样品牙签不能混用。
3.加样不宜过多,带漆圈的黑色玻璃板应平置,防止三圈内反应液溢流相混。