斐林试剂和双缩脲试剂
新版高中《生物》教材中有“生物组织中可溶性还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定”实
验。可溶性还原糖用斐林试剂鉴定,蛋白质用双缩脲试剂鉴定。斐林试剂与双缩脲试剂都
是由甲液(NaOH)和乙液(CuSO)组成,但参加鉴定反应时,却是以不同的反应物出4
现。不明白它们参与的反应,很容易把两者混淆,甚至误认为就是同一种试剂。
斐林试剂是指新制的,,CuOH悬浊溶液。还原性糖与新制的在加热煮沸条件,,CuOH22下,能生成砖红色的沉淀。实验过程中,必须先把甲液(NaOH)和乙液()CuSOCuO42
等量混合,让其反应生成,,CuOH后,才能加入到含还原性糖组织液中。如果先后或者分2
别把NaOH和CuSO溶液加入到含还原性糖组织液中,组织液中的有机酸会与NaOH迅4
速反应,使反应物中没有,,,,CuOHCuOH或不足,从而使还原性糖与氢氧化铜的反应22
不能进行或现象不明显,影响了还原性糖的鉴定。
2,双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与反应,生成Cu红紫色的络合物。所有的蛋白质均有此显色反应。双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽
键的化合物发生红紫色显色反应的试剂。它是NaOH和CuSO两种溶液。在实验过程4
中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH溶液,混合均匀后,再滴几滴CuSO溶4
液(量较少)。即先后加入NaOH和CuSOCuSO溶液。如果在NaOH中滴几滴溶液混442,合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有”,显色反应就不会发生。 Cu
资料来源 《生物学教学》2003.3
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