小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫和体液免疫的研...小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫和体液免疫的研...
小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫和体液免疫的研究
预防兽医:车茜 指导老师:程安春教授
将本研究小组构建的小鹅瘟病毒VP3基因疫苗以三个剂量(1 µg、3 µg和6 µg)基因枪轰击、三个剂量(50 µg、100 µg和200 µg)肌肉注射分别免疫28日龄雏鹅，，同时设肌肉注射小鹅瘟弱毒疫苗、空载体pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照。在免疫后的3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、49 d、63 d、77 d、105 ...
小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫和体液免疫的研...
小鹅瘟病毒VP3基因疫苗诱导雏鹅细胞免疫和体液免疫的研究
预防兽医:车茜 指导老师:程安春教授
将本研究小组构建的小鹅瘟病毒VP3基因疫苗以三个剂量(1 µg、3 µg和6 µg)基因枪轰击、三个剂量(50 µg、100 µg和200 µg)肌肉注射分别免疫28日龄雏鹅，，同时设肌肉注射小鹅瘟弱毒疫苗、空载体pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照。在免疫后的3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、49 d、63 d、77 d、105 d采抗凝血和凝血各份，133 d、161 d、189 d、217 d采凝血一份。采用淋巴细胞增殖试验(MTT法)、流式细胞术(FACS)及间接ELISA分别对鹅的细胞免疫和体液免疫进行检测。结果如下:
1.免疫鹅外周血T淋巴细胞的转化功能: T淋巴细胞OD值从免疫后第3天起，逐渐轻微下降，14d最低，然后逐渐上升，第35天时达到最大值。肌肉注射21-63d极显著(P<0.01)、基因枪轰击14-63d极显著(P<0.01)、弱毒疫苗免疫14-63d显著(P<0.05)、空白质粒免疫后21-49d显著(P<0.05)高于生理盐水对照组;肌肉注射21-49d、基因枪轰击21-49d显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于弱毒疫苗对照组;肌肉注射21-63d、基因枪轰击21-63d极显著(P<0.01)高于空白质粒对照组;肌肉注射200μg显著或极显著高于50μg和100μg组;弱毒疫苗免疫后21-63d显著(P<0.05)高于空白质粒对照组;基因枪轰击1μg、3μg和6μg三个剂量组之间差异不显著。表现出基因枪轰击和肌肉注射pcDNA-GPV-VP3均能诱导雏鹅产生良好的细胞免疫应答，其中基因枪轰击的免疫效率是肌肉注射的50,200倍。
2(雏鹅血清中特异性GPV血清抗体IgG动态变化: ELISA抗体滴度(以OD值示)，肌肉注射和基因枪轰击从第14天开始高于空白质粒和PBS对照组，21d达到最大值，然后逐渐下降。肌肉注射、基因枪轰击、弱毒疫苗免疫21-217d显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于生理盐水和空白质粒对照鹅;基因枪轰击6μg极显著(P<0.01)高于肌肉注射组各剂量;肌肉注射50μg、100μg和200μg三个剂量组之间差异显著， 200μg免疫效果显著(P<0.05)高于其他两个剂量组;基因枪轰击3μg和6μg各剂量组之间差异不显著， 3μg和6μg 与1μg之间差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。基因枪轰击6 µg组在3-217d极显著(P < 0.01)或显著(P < 0.05)高于弱毒疫苗组，其它各组均在不同时间段显著(P < 0.01)或显著(P < 0.05)高于弱毒疫苗组。不同剂量pcDNA-GPV-VP3基因疫苗免疫雏鹅后均诱导雏鹅产生GPV特异性IgG，大剂量基因疫苗免疫雏鹅的体液免疫应答高于中、小剂量。表明pcDNA-GPV-VP3免疫鹅能够诱导其机体产生良好的体液免疫应答，并表现一定的剂量依赖性。基因枪法较肌肉注射更能诱导体液免疫应答的产生。
关键词:细胞免疫，体液免疫，基因枪轰击，肌肉注射，小鹅瘟病毒VP3基因疫苗
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