抗核小体抗体的临床意义

抗核小体抗体的临床意义 中华风湿病学杂志2003年8月第7卷第8期ChinJRheumatol,August2003,VoI7,一 No.8 抗核小体抗体的临床意义 唐福林 核小体(nucleosome)是染色质的基本结构.染 色质原纤维就像一条串珠,由紧密排列的核小体组 成?.核小体的核心是由8个带正电荷的组蛋白 (histone)分子(H2A,H2B,H3和H4各2个分子)组 成,呈扁圆形,它的直径约10m.DNA缠绕其上 约1.75圈,长约140bp,带负电荷.这种八聚体的 复合物中,H3,H4位于中心,而H2A,H2B位于两侧, 此结构对源性核酸酶有抵抗,使之不被内源性核 酸酶裂解.组蛋白富含碱性的精氨酸与赖氨酸,故 能与酸性的DNA紧密结合.两个核小体之间由50 , 60bp的DNA链与H1相连. 在生物活体中,核小体的唯一来源是凋亡细胞. 凋亡细胞核DNA在内源性核酸内切酶的作用下以 独特的裂解方式,使核小体的连接区被切开成180 200bp或其倍数的寡核苷酸片段_2J. 1978年Hannested等【3』首先描述了抗核小体抗 体.2000年Amoura等l4』对596例患者用酶联免疫 吸附法(ELISA)进行了抗核小体抗体的检测及分 型,其中120例系统性红斑狼疮(SLE),37例系统性 硬化症(Ssc),20例混合性结缔组织病(MCTD)以 及319例其他13种结缔组织病(干燥综合征,类风 湿关节炎,原发性抗磷脂综合征,韦格纳肉芽肿病, 巨细胞动脉炎,大动脉炎,白塞病和结节病等)和 100例丙型病毒性肝炎患者,结果发现抗核小体抗 体的IgG型仅见于3种结缔组织病,即SLE (71.7%),SSc(45.9%),MCTD(45.0%);并发现抗 核小体抗体IgG3亚类与SLE病情活动相关,并且 是狼疮肾炎的标记性抗体. Bruns等l5以鸡红细胞提取核小体为抗原,以 ELISA检测136例SLE患者,309例对照组患者 (MCTD,Lyme病,SSc,类风湿关节炎,干燥综合征, 未分化结缔组织病,溃疡性结肠炎,乙型病毒性肝 炎,爱滋病),发现抗核小体抗体对SLE的诊断敏感 作者单位:100730中国医学科学院中国协和医科大学北京协 和医院风湿免疫科 ? 457? ? 专论? 性和特异性分别为56%和97%.抗核小体抗体用 于SLE的诊断可信性为90%.而对同样人群同样方 法抗-dsDNA的可信性为69%.抗核小体抗体-9SLE 患者的疾病活动性,肾炎和精神神经密切相关. 2003年Benucci等_6J将48例SLE患者分成抗 核小体抗体阳性组(18例)和阴性组(30例)进行有 关临床,实验资料和活动指数的评分比较,发现抗核 小体阳性组中,其欧洲狼疮委员会活动指数评估指 数(ECLAM)明显高于阴性组.且抗核小体抗体阳 性组中补体C3,C4和血红蛋白明显低于阴性组. 尤其明显的是抗核小体阳性患者尿沉渣异常明显高 于阴性组.但无论抗核小体抗体阳性还是阴性,两 组在ANA,抗dsDNA,抗磷脂抗体,狼疮抗凝物差 异均无显着性. 最近Cairns等[7l对95例轻中度SLE,48例类 风湿关节炎,28例纤维肌痛综合征和95名正常健 康人进行了抗核小体抗体测定,发现抗核小体抗体 阳性率在SLE和类风湿关节炎分别为64%和4%, 而纤维肌痛患者和正常健康人均未测出抗核小体抗 体.虽然少数类风湿关节炎患者有抗核小体抗体阳 性,但其滴度很低,与SLE患者的高滴度阳性相比 则差异非常显着.他们还发现,抗核小体抗体对 SLE的诊断敏感性(64.2%)高于抗dsDNA抗体 (51.6%).但两者对SLE的诊断特异性相ff,分别 为98.8%和98.2%.抗核小体抗体与抗dsDNA抗 体可不同时出现,43%的SLE患者2种抗体同时存 在;21%的SLE患者抗核小体抗体阳性,而抗 dsDNA抗体阴性;8%的SLE患者抗dsDNA抗体阳 性,而抗核小体抗体阴性.因此表明:抗核小体抗体 同样有利于SLE的诊断,尤其在抗dsDNA阴性的 患者,检测抗核小体抗体更显重要. 核小体无种族,种属的特异性,因此核小体可从 鼠肝细胞核或小鼠骨髓瘤细胞或鸡红细胞,小牛胸 腺,海胆精液等中提取.核小体抗体的检测方法主 要为ELISA,此方法要求纯抗原,否则易出现假阳 性或假阴性,且每次检测均应设有阳性及阴性标准 ? 458?中华风湿病学杂志2003年8月第7卷第8期ChinJRheumatol,August2003,vol7,No.8 品作对照. 越来越多的临床验证证实核小体是SLE的自 身免疫原,是多种抗核抗体出现的根源.抗核小体 抗体主要临床意义在于它出现于SLE早期,而且与 疾病活动性呈正相关.在SLE患者中,抗dsDNA 抗体和抗组蛋白抗体的活性只是抗核小体抗体活性 的25%,30%;另一方面大约有1/3有高滴度抗核 小体抗体的SLE患者,测不出抗dsDNA抗体和抗 组蛋白抗体或测出的滴度很低.因此,抗核小体抗 体可作为SLE病情活动的新的抗体【5.抗核小 体抗体所识别的表位是(H2A—H2B)一DNA复合物. 其导致狼疮肾炎的可能途径之一是:DNA航DNA 抗体和饿核小体航核小体抗体在肾小球基底膜形 成循环免疫复合物.目前认为后者更为重要【10];核 小体通过其组蛋白的阳离子部分与肾小球基底膜带 阴离子的?型胶原及硫酸乙酰肝素葡糖胺聚糖结 合.这种抗原种植是导致肾炎的又一途径【11j. 以核小体多肽特异性抗原治疗鼠狼疮模型的研 究中发现,核小体多肽特异性抗原可以抑制Fh细 胞和B细胞的激活,从而为研究SLE的发病机制和 治疗SLE带来了新的曙光l12J. 目前,国内已有少数医院开展了抗核小体抗体 的检测,本期已有抗核小体抗体测定在系统性红斑 狼疮诊断中的意义(474页)和抗核小体抗体对系统 性红斑狼疮的诊断价值(500页)两篇报道.但需强 调指出的是:抗核小体抗体的检测对SLE的诊断有 重要意义,不同的核小体来源,不同的检测人群和疾 病活动度,以及检测试剂,方法等均会带来结果差 异.该抗体与抗Sin抗体不同,并非是SLE的标记 抗体.虽然已发现抗核小体抗体对诊断SLE的敏 感性和特异性比抗dsDNA抗体高,但仍有不完全一 致的结果.我国的情况如何还应进行大样本,多中 心检测从而得到更合理,更准确的结论.SLE的诊 断不能仅凭某一种抗体的阳性与否加以肯定或否 定.在建立该抗体检测前首先明确其确切的临床意 义,以免增加患者的经济负担.其次,必须严把质控 关,避免假阳性或假阴性结果.如同其他自身抗体 的检测一样,医师在诊治工作中必须密切结合病人 的临床资料,正确看待检测结果,切勿以实验室检查 代替一切. 参考文献 1LugherK.MaderAW.RichmondRKCristalstructureofthenu— cleosomecoreparticleat2.8Aresolution.Nature,1997,389:251— 261. 2FloraPK,GregoryCD.Recognitionofapoptoticcellsbyspecific monoclonalantibody.EurJlrrmaunol,1994,24:2625—2632. 3HmmestadK,StollarBD.Certainrheumatoidfactorreactwithnu— cleosomes.Nature.1978.275:671—673. 4AmouraZ,KoutouzovS,(:habreH,eta1.Presenceofantinuc[eo— someantibodiesinarestricted.’setofconnectivetissuediseases. ArthritisRheum.2000,43:7694. 5BrunsA,BlaxsS,HausdorfG,eta1.NucleosomesaremajorTandB cellautoantigensinsystemiclupuserythernatosus.Arthritis Rheum,2000,43:2307—2315. 6BenucciM.GobbiFL.Ro~soAD,etalDiseaseactivityandantinu— cleosomeantitx.,diesirasystemiclupuserythematosusScandJ Rheum,2003,32:42—45. 7ChairesAP,McMillanSA,CrockardAD.etalAntinucleosomean— tibodiesinthediagnosisofsystemiclupuserythernatosus.Ann RheumDis,2003,62:272—273. 8ChabreH,AmouraZ.PitteJC.eta1.Presenceofnucleosome-re— strictedantibodiesinpatientswithsystemiclupuserythenmtosus. ArthritisRheum,1995,38:1485—1491. 9BurlinganleRW,BoeyML,StarkebaumGR,eta1.Thecentralrole ofchromatininautoimnluileresponsetohistonesandDNAinsys— temiclupuserythematosus_JClinlnvesrt.1994,94:184—192. 10LefkowithFB,GikesonGS.Nephritognicautoantiboidesinlupus ArthritisRheum,1996,39:894—903. 11BerdenJH,LichtR,vanBmggenMC.eta1.Roleofnucleosome~sfor inductionandglomerularbindingofautoantibodiesinlupusnephri— tisCurrOpinNephrolHypertens,1999,8:299—306. 12KaliyperumalA,MichaelsMA,DattaSK.Antigen—specifictherapy ofmurinelupusnephritisusingnucleosomalpeptide:tolerance spreadingimpairspathogenicfunctionofautoimmuneTandBcells JImmunol,1999,162:5775—5783. (收稿日期:2003—06—11) (本文编辑:董海原) ? 消息? “全国风湿病学年会暨新进展学习班”学术研讨会推迟通知 原定于2003年9月16日至9月19日在I~tJII省成都市举办的”全国风湿病学年会暨新进 展学习班”学术研讨会因故延迟 到2003年11月5日至11月9日举行(5日报道,9日撤离). 中华医学会学术会务部