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医学检验本科班分子生物学检验技术试卷.doc

医学检验本科班分子生物学检验技术试卷

可爱龟头赛跑
2017-10-18 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《医学检验本科班分子生物学检验技术试卷doc》,可适用于综合领域

医学检验本科班分子生物学检验技术试卷医学检验本班《分子生物学检验技术》试卷一选择题(在备选答案中选择一个最佳答案,每题分,共分):在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是()A中和核酸的负离子,使其易于沉淀B调节PH值C保持核算的完整性D提高核酸的浓度E无特定目的在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为,则A所占摩尔比为()ABCDE无法计算下列那项不是扩增反应所必需的()A引物和模板BdNTPCMgDDNaseE缓冲液下列那项是分子生物学技术形成的理论基础()A基因结构与功能的关系B基因结构变异与疾病的关系C病原微生物的基因结构特征D基因的表达调控与疾病的关系E以上皆是分子生物学检验技术主要包括那些技术()A核酸分子杂交技术BDNA测序技术CPCR技术DDNA重组技术E以上全是下列哪项检测需应用分子生物学检验技术()A肝功能检测B乙肝两对半检测C乙肝病毒DNA(HBVDNA)检测D肿瘤细胞培养E病原微生物培养在核酸的分离纯化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取()A尽量简化分离步骤,缩短提取时间B适当延长提取时间C在摄氏度条件下进行D加入Mg,Ca等二价金属离子E以上全是有一核酸样品,测得AA=,请问该样品属于哪类核酸样品()ADNABRNAC是DNA,但有蛋白质污染D是RNA,但有蛋白质污染EDNA和RNA在RNA提取和纯化过程中,为避免Rnase污染而导致RNA的降解,应采取()A在洁净的实验室里操作B带手套和口罩C所用器材高压消毒或DEPC处理D冰浴下操作E以上皆是随机引物标记法全程标记DNA时,需选用下列哪种酶()ADNA多聚酶I的Kelnow片段BTaqDNA聚合酶C限制性内切酶DDNA连接酶末端转移酶E二判断题:(你认为下列叙述正确的请在题后括号内打,错误的打×每题分,共分)双脱氧核酸链终止法是最常用的DNA测序技术()TapDNA聚合酶的作用是催化DNA合成但由于缺乏’’外切酶活性无校正功能所以在复制合成新链过程中可能会发生碱基错配导致PCR产物的错误()采用加热煮沸法可使RNase完全失活()三:填空题(每空格分,共分):在选择核酸的分离纯化方法应遵循的总原则是:一是保证核酸(一级结构的完整性)二是尽可能(排除其他分子的污染保证核酸样品的纯度)。在PCR反应中Mg是个至关重要的因素浓度(过低)会降低酶的活性浓度(过高)又会导致非特异性扩增。用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是(本底低)因而最容易检测杂交信号缺点是(脆性大)易破裂且队,,,,bp的核酸结合力低。(整个核酸杂交反应主要由(预杂交)、(杂交)和(洗脱)三个步骤组成。转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸其与滤膜的结合是松散的需做进一步的固定常用的固定方法是(烘烤)、(紫外线固定)和(碱固定)。三名词解释:(每题分,共分):融点曲线分析技术:是根据野生型序列和突变序列因不同Tm而产生不同的融点曲线而设计的。探针:指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用并可以被检测的分子。Tm值:DNA熔解温度指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。转染:将外源DNA直接导入真核生物细胞的过程称为转染。转化:将重组的DNA分子导入细菌使其在细菌体内扩增及表达的过程称为转化。四问答题:(每题分共分)简述限制性内切酶的定义、命名原则和分类。答:定义:限制性内切酶是能识别和水解双链DNA分子内特异序列的核酸水解酶类。命名:通常由个斜体字母表示第个大写字母为来源微生物的属名第个字母第、第个小写子母取微生物种名的头两个字母。分类:根据酶分子组成及裂解方式的不同将限制性内切酶分类类和类限制性内切酶在同一酶分子中兼有修饰(甲基化)作用和依赖于ATP的限制水解活性类限制性内切酶能识别并水解特异性的核苷酸序列是DNA重组技术中最重要的工具。PCR引物的设计应遵循哪些原则。答:用于PCR反应的引物需要两条分别设在被扩增目的的片段的两端并分别与模版正负链序列互补。引物的长度一般以个核苷酸为宜引物过长容易产生寡核苷酸的链内互补形成发夹状结构影响引物和模板之间的互补。两条引物之间尤其在’端的序列不能有互补以免形成引物二聚体。引物的碱基组成应平衡避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积。PCR扩增中的退火温度是根据引物的Tm值而决定的两条引物的Tm值不能差太大。根据需要可在合成引物时于其’端加修饰成分。试述实时荧光PCR水解探针法的实验原理,答:原理:PCR反应体系中除有两条引物外还需要一条荧光素标记的探针。探针的’端和’端分别标记荧光报告基团R和荧光淬灭基团Q当探针完整时R基团与Q基团分别位于探针的两端Q基团抑制R基团使其不能发射荧光。PCR过程中TaqDNA聚合酶沿着模板移动各成新链当移动到模板互补的探针处时TaqDNA聚合酶同时还发挥其’’外切核酸酶活性将探针的脱氧核苷三磷酸逐个水解R基团与Q基团随子分离。此时R基团不再受Q基团的抑制而发射荧光仪器的检测系统便可测得荧光信号。

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