液相芯片技术原理及应用简介

液相芯片技术原理及应用简介 ? 2196? 的投影作标记,常规消毒铺巾,选择穿刺进针点.在超声引 导下,0.5%利多卡因注射到病灶底部及穿刺通道.Hook wire针尖到达病灶,拔除外套针并将带倒钩引导针留在病灶 内,以定位针为引导,完整切除包括倒钩及病变在内之小叶, 将病变组织完整切除,送病理检查. 2结果 20例经定位切检术的临床不可扪及肿块中,病理证实乳 腺增生症14例,乳腺纤维腺瘤3例,乳头状瘤2例,导管癌 伴早期浸润1例. 3讨论 随着乳腺普查工作的广泛开展及影像诊断技术不断更 新,临床中NPBL越来越多被发现.一项有关超声下NPBL 的切检结果显示恶性病变占28%…,可见NPBL应引起临床 工作者的足够重视.高分辨率超声不仅可以发现表现为实 质性占位病变的乳腺病变,甚至可以发现乳腺内的钙化. 可见超声在乳腺疾病诊断中的地位越来越重要. 虽然并不是所有NPBL都需要行切检切除,但绝大部分 仍应行切检以明确诊断.手术切检仍是目前常规采用的乳 腺病灶确诊手段.对NPBL切检时定位较为困难,为保证病 灶确被切除,常需切除较多正常乳腺组织,甚至要行正常组 织区段切除.穿刺细胞学检查虽方便,创伤小,但取材量小, 无法显示组织结构.粗针穿刺可获得组织病理,石蜡阳性结 果可代替冷冻切片,但因局部不能反映全貌,有时尚难将不 典型增生,原位癌和浸润癌完全区分,而超声下Hookwire引 导切除切检可达到满意效果J. 手术切口的选择在不影响美容效果的同时,穿刺针道尽 量短,以减少组织损伤.对于未生育和哺乳的患者,避免经 过乳晕区,减少乳管损伤,以免影响哺乳. 本方法需高频超声的密切配合.术前需超声定位,选取 穿刺点时需超声提供给术者肿物至体表的距离.术中超声 囹新技术介绍囹 液相芯片技术原理及应用简介 MODERN0NCOL0GY.Dec.20o8.V0I.16.N0.12 探头不移除,实现实时监控,确认穿刺针到达病灶组织,同时 起到配合术者压迫固定病灶作用,减少病灶移位,提高取材 的准确性.整个操作过程在超声成像下完成,同时行术中病 理检查,确定肿瘤性质及肿瘤与正常组织界限,保证肿块的 完整切除. 常规手术容易造成乳腺肿块破坏,如果肿块恶性,可导 致肿瘤细胞播散.本组一例为导管癌伴早期浸润行乳腺癌 改良根治术,术中将穿刺针道一并切除.术后病理检查针道 未见癌细胞. 本研究工作开展的病例有限,我们体会:在以后工作中 要加强与辅助科室医生之间的沟通.掌握恶性病变超声特 点尤为重要,尤其对边界不清,凸凹不平,无包膜,边界呈锯 齿状或蟹足状,肿瘤内血流信号增:多,并有新生血管及动静 脉瘘形成的特点高度重视.虽然声波的衰减及钙化点的出 现具有很高的特异性,也要认识到超声对于乳腺中较小的 钙化病灶发现率较低,仍需要与钼靶影像检查结合,有助于 提高定位切检阳性率,提高乳腺癌的诊治水平.乳腺外科医 生应该认真对待NPBL,它是我们诊断早期乳腺癌的关键. 超声导丝定位切检是一种简单有效的方法,使得NPBL及时 得到诊治. 【参考文献】 [1]ChiouSY,ChouYH,ChiouHJ,eta1.Sonographicfeaturesof nonpalpablebreastcancer:Astudybasedonuhrasound—guided wire—localizedsurgicalbiopsies[J].UltrasoundMedBiol,2006, 32(9):1299—1306. 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[3]KaufmanCS,JacobsonL,BachmanB,eta1.Intraoperativeultra- soundfacilitatessurgeryforearlybreastcancer[J].AnnSurgOn— col,2002,9(10):988—933.(编校:谭云) 姚丽,张伟,王妹妹,巩丽,朱少君 【关键词】液相芯片;Luminex 【中图分类号】R730.4【文献标识码】A【文章编号】1672—4992一 (2008)12—2196,03 液相芯片技术,又称悬浮阵列,流式荧光技术,它有机地 整和了编码微球,激光技术,应用流体学,高速数字信号处理 和计算机运算等多种技术,具有高水平的检测特异性和灵敏 【收稿日期】2008—02—26 【作者单位】第四军医大学唐都医院病理科,陕西西安710038 【作者简介】姚丽(1981一),女,黑龙江通河人,医师,主要从事病 理诊断工作. 【通讯作者】张伟(1966一),男,甘肃甘谷人,副教授,硕士导师,长 期从事病理诊断和分了病理学研究. 度.基于美国Luminex公司研制的多功能流式点阵仪(I minexIO0TM)该技术可广泛应用于免疫 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 ,核酸研究,酶学 分析,受体和配体识别分析等研究. 1液相芯片技术原理 聚苯乙烯微球(Microspheres)直径为5.6lxm,内部含有 红色和橙色两种荧光染料,根据两种染料比例的不同可以将 微球分成100种,每一种拥有一个编号.每种微球因为内部 荧光比例的不同,具有特定的光谱特征,可被激光特异的识 别….分析过程中,不同编号的微球包被不同的探针分子, 现代肿瘤医学2008年12月第16卷第l2期 检测样品中的目的分子,目的分子再与带有荧光的 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 分子 结合(图1).检测时,同流式细胞仪相似,Luninexl00检测 系统将反应微球单个排列送人检测通道,每一个微球单独检 测.该仪器同时发射红色和绿色两种激光,同时检测微球上 的红色分类荧光和报告分子上绿色荧光强度,红色激光用于 鉴别微球,即可知探针种类,绿色激光用于分析报告分子,并 将结果通过光电倍增体系转换成数值输出,系统对微球得到 的信号值进行统计,确定检测物的种类和数量.由于每种微 球具有特定的荧光光谱,可被特异的识别出来,所以可以将 不同编码的微球标记不同的探针分子,混合在一个反应体系 中.检测一个样本,最大限度可以同时使用100种微球标记 100种探针分子,检测一个样本中100种目的分子. 聚苯乙烯微球根据表面带有的分子残基的不同,可以结 合不同的探针分子,如带有羧基的微球可同蛋白或核酸结 合,带有Ni—NTA的微球可同带有组氨酸标签的蛋白结合. 可以根据需要选择. 2液相芯片技术的应用 2.1液相芯片技术在蛋白检测中的应用 表面带有羧基的聚苯乙烯微球(如MultiAnalyte微球和 SeroMap微球),在EDC和NHS的活化后可以同蛋白分子的 氨基形成共价键,由此可以包被蛋白探针,检测样本中的目 的分子.如血清中细胞因子的检验,就是采用夹心法,先 将细胞因子的单抗包被在聚苯乙烯微球上,然后同血清或细 胞培养液孵育,再用生物素标记的抗细胞因子的单抗检测, 最后用链亲合素标记的藻红蛋白作为报告分子,通过测量荧 光的强度分析样本中细胞因子的分泌情况和数量_3J. Waterboer等在微球上包被共价连接的酪蛋白一谷胱甘肽 (Caisein—glutathine),利用谷胱甘肽同谷胱甘肽转移酶(glu. tathioneS—transferase,GST)之间的反应,通过与表达菌 裂解液孵育,微球结合提纯GST融合表达的HPV蛋白,可检 测血清中HPV抗体,了解HPV的感染情况.除此之外液 相芯片还应用于细菌毒素抗体,病毒颗粒抗体及自身 抗原”等血清学检验中. 微球探针分子 ?》 图1液相芯片技术原理示意图 2.2液相芯片技术在核酸检测中的应用 带有羧基的微球在MES和EDC的活化后可同核酸探针 相连接,或者使用带有anti—tag标签的微球,将带有tag的核 酸探针与之结合,样本同微球所携带的探针杂交,洗脱未结 合的DNA,链亲和素标记的藻红蛋白作为报告荧光.Schmitt 使用该技术应用于HPV的基因分型,使用生物素标记的通 用引物,以诊刮细胞DNA为模版,通过PCR反应形成生物素 ? 2197? 标记的PCR样本,与22种高危HPV探针变性杂交以确 定感染HPV的基因分型.除此之外,液相芯片技术还应用 于单核苷酸多态性的分析?,组织相容性抗原分型n引,水岸 污染中指示菌的监测及病原菌检测”等多方面研究. 3液相芯片技术的优缺点及展望 液相芯片技术最大优点在于高通量,检测96孔样本只 需35—6o分钟,对单一样本同时可进行多达100种的不同 分析.针对单一分析,可以一次监测100个数据,满足统计 学要求.对于ELISA而言,酶标板的一个孔只能包被一种抗 原,而液相芯片技术中每种微球有不同的荧光染色,可以被 激光特异的识别出来,所以可以将包被不同探针分子的微球 混和在一个滤膜板孔中同时进行各种蛋白和核酸的分析. 实验 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 ,在蛋白分析方面,液相芯片技术与ELISA相比较, 具有同样的特异性与灵敏性?.在核酸分析方面,液相芯 片技术与序列测定各有特点,比逆线印迹(reverseline blot,RLB)具有更高的敏感性?.但液相芯片技术有一个比 较大的缺点,就是在蛋白分析过程中,由于部分血清中含有 嗜异性抗体.加],可与微球或捕获抗体直接连接,从而形成非 特异性的背景值.但这种非特异影响可以通过设定内对照 和使用阻断液来消除瞳. 液相芯片技术整合了多种技术,具有较高的特异性与灵 敏性,适用于已有的检测 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ,节约人力,物力,时间,试剂及样 本,特别适用于流行病学调查,临床诊断及蛋白组学的研究. 【参考文献】 [1]OliverKG,JRKettman,PdFulton.Multiplexedanalysisofhuman cytokinesbyuseoftheHowMemxsystem[J].ClinChem,1998, 44(9):2057—2060. 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