脑缺血模型评估

脑缺血模型分为全脑缺血和局灶性缺血模型两种。全脑缺血对于慢性脑缺血及一些特殊领域研究具有较高的价值,但因其对全身影响较大,梗死不稳定等缺点,并且,临床上的脑缺血患者通常为局灶性缺血,因此临床应用价值相对较低,目前应用相对较少。局灶性缺血与全脑缺血相比,可形成特定部位的脑梗死并进行再灌注,对全身影响较少,与人发病情况更相似,目前应用更为广泛。 全脑缺血模型 1 两血管阻断法:Ekloef 等(Ginsberget al.,1989)首先提出这种模型, 即关闭大鼠双侧颈总动脉(CCA), 同时降低血压。制造低血压有两种方法: 通过尾动脉放血降低血压, 使用降压药三甲噻方或酚妥拉明把血压降到50 mmHg (7.5 mmHg =1kPa)。其优点是操作简单方便;缺点是存在侧支循环, 缺血不完全, 血压的轻微波动会影响实验结果,低血压会严重干扰其他器官和组织的供血(李月玲et al.,1989)。该模型还不能再清醒动物进行, 无法进行神经行为的观察。可用来进行脑缺血后脑血流、神经递质的变化以及低温神经保护等,适合慢性期研究(张拥波et al.,2007)。在该法基础上改进可制作血管性痴呆模型,如高脂饲养加两血管阻断法(Tayebatis et al.,2004),两血管阻断加尾端放血降压法,两血管阻断加硝普钠降压法(Willams et al.,2007)。 2 三血管阻断法:最初由Kameyama 等(Kameyama et al.,1985)建立,方法为电凝切断基底动脉,并通过阻断与开放双侧颈总动脉,实现全脑-缺血再灌流。该法稳定性好,可通过阻断CCA 的时间长短来控制缺血程度,再灌注血流恢复迅速,模型成功率高,适合用于急性全脑缺血性损伤的研究。其缺点是手术难度稍大,且对周围组织牵拉严重,操作不当易造成动物死亡。被认为是迄今为止最理想的全脑缺血-再灌注动物模型。Yanamoto 等(Yanamoto et al.,2003)采用改良的三支动脉阻断法制作正常血压大鼠大脑皮层脑梗死模型,通过比较术后动物的生理参数,梗死灶体积等指标确定缺血性中风程度。 3 四血管阻断法:通过阻断双侧CCA 和双侧椎动脉实现 全脑缺血,最早在1979 年由Pulsinelli 等(Pulsinelli et al.,1979)建立。首先分离双侧CCA,放入套扣并外置备用,电凝或结扎双侧椎动脉,可根据实验需要经外置套扣阻断双侧CCA,并于一定时间后开放而实现再灌注。优点为可在清醒或麻醉状态下完成,制作过程与血管性痴呆的发病机理接近,缺血后生理指标稳 定,病理改变较为充分,检验缺血是否成功的指标明确,海马、丘脑、尾状核、皮层记忆区受损严重,无明显的肢体运动障碍。术后20 周实验大鼠的脑血流量趋于稳定,但海马区达不到正常的脑供血量,形成慢性大脑供血不足,而脑干灌注良好,能维持生命中枢的基本功能,适合亚急性的研究。缺点为手术复杂,操作难度大,成功率低,椎动脉和脊管前动脉间存在交通支,个体差异较大。四血管断法是目前国际公认的脑血管病研究造模方法,也可用于神经保护药的研究。局灶性脑缺血模型 1 开颅闭塞法 2 线栓法:目前国内外广泛应用的一种方法是血管内线栓闭塞法( 线栓法) 大脑中动脉阻塞(MCAO) 模型。其原理是: 栓线通过颈内动脉送入到大脑前动脉和大脑中动脉连接处,使大脑中动脉血供区域缺血,在缺血一段时间后可以取出,形成再灌注即短暂性缺血模型( transientMCAO,tMCAO) ,也可以不取出而产生永久性缺血模型( Permanent MCAO,pMCAO ) 。由于该方法不需要开颅,创伤小,手术时间短,术后动物存活期较长,缺血部位恒定,且可以准确控制缺血及再灌注时间,所以目前线栓法MCAO 模型,广泛应用于实验研究(杨彦玲et al.,2007)。 3 栓塞法 4 光化学 刘其耀: 通过夹闭双侧颈总动脉(CcA)合并低血压以减少脑血流量,造成急性脑缺血,模拟了临床上休克、心功能不全、脑血管严重狭窄或阻塞合并血液低灌流引起的脑循环障碍,造成不同程度的脑组织缺血损伤。因而,对于探讨人类缺血性脑损伤的发病规律,评价抗脑缺血药物的疗效等有价值。(刘红梅et al.,1999) 结论: 在大鼠中的双侧颈总动脉夹闭(2-VO)被证明可以诱导脑缺血造成的认知功能的进行性和长期持续性障碍(Tian et al.,2014),在药物对大鼠缺血性脑损伤神经保护作用的研究、行为学测试中也有使用(黄嘉驹et al.,2015)。查阅的一些SCI文献中,目前国外现在采用最多的脑缺血模型是线栓法(MCAO) 模型。李 政奇等对2-VO模型进行评估,术后24 h,2VO 模型组死亡率为0;大鼠脑组织 切片病理形态学改变: TUNEL 染色结果显示,坏死细胞率、细胞凋亡百分率、免 疫组化炎症因子NF-κ B 阳性细胞数目均较低(李政奇et al.,2015)。 因此,在神经保护作用和海马LTP的研究中可用该模型,但若想在炎症等方 面做一些工作,该模型双侧颈总动脉夹闭(2-VO)并不理想。 参考文献 Ginsberg MD,Bust OR. Rodent models of cerebral ischemia [J].Stroke,1989,29 (12):627-642. Hemispheri c ischemia in the rat three vessel occlusion model [J].Stroke,1985, 16(3):489-493. 黄嘉驹,严莉,欧阳昌汉. 京尼平苷酸对大鼠缺血性脑损伤神经保护作用[J]. 湖北科技学院学报(医学版),2017,(02):93-96+103+88. 李政奇,范晨雨,侯弘毅,王征,黄桑田,高远,乔海灵. 大鼠双侧颈总动脉阻断法致全脑缺血模型的改良研究[J]. 中国临床药理学杂志,2015,(01):70-72. 刘红梅,高天明,佟振清. 急性脑缺血动物模型实验研究进展[J]. 第一军医大学学报,1999,(04):368-370. 李月玲,杨玉梅. 实验性脑缺血模型的建立及影响因[J]. 包头医学院学报,2009,25(3): 81-84. Pulsinelli WA,Brieley JB. A new model of Bilateral hemispheric ischemiain the unanesthetized rat[J]. Stroke,1979,10 (3):267-272. Tayebatis K,Tullio MA,Amenta F,et al. Effect of treatment with the cholinesterase inhibit - orriv astigmine on vesicular acetylcholine transporter and choline acetylt ransferase in rat brain[J]. Clin Exp Hypertens,2004,26(4):3632-3735. TIAN X S,UO X J,UAN Z,t al. Long-term vision andnon-vision dominant behavioral deficits in the 2-VO ratsare accompanied by time and regional glial activation inthe white matter[J]. PLo S One,014,( 6) : e101120 Willams A. A new model of bilateral hemispheric ischemia in the unanesthetized rat [J]. Stroke,2007,10(3):267-272. Kameyama M,Suzuki J,Shirane R,et al. A new model of bilateral 杨彦玲,陈雅慧. 大鼠大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血模型的研究现状 [J]. 临床神经电生理学杂志,2007 ;16(6):374-376. Yanamoto H,Nagata I,Niitsu Y,et al. Evaluation of MCAO stroke models in normotensive rats:standardized neocortical infarction by the 3VO technique[J]. Exp Neurol, 2003,182(2):261-274. 张拥波,秦新月. 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 化脑缺血动物模型[J]. 中风与神经疾病杂志,2007,24(1):117-119.