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蛋白质提纯研究进展.doc

蛋白质提纯研究进展

拜金女与王子的故事
2017-12-03 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《蛋白质提纯研究进展doc》,可适用于综合领域

蛋白质提纯研究进展天津化工第#卷第"期I(#("LDMD>ADNOKEFGB##年)月JK(##蛋白质提纯研究进展许亚平林俊岳(井冈山学院化学系江西吉安!"!##$)摘要:本文综述了蛋白质的提取方法、纯化技术及影响蛋白质分离和提取的因素。为开展蛋白质的制备及应用提供了一定的依据。关键词:蛋白质提取纯化中图分类号:$()!文献标识码:*文章编号:##,)(##)#"###$#"蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等方缓冲液常采用#(##(#磷酸盐和碳酸盐等渗盐面知识但基本原理不外乎两方面。一是得用混合溶液。李凤英等<=用盐溶法提取葡萄籽的蛋白质。物中几个组分分配率的差别把它们分配到可用机有机溶剂提取法!"#械方法分离的两个或几个物相中如盐析有机溶一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧剂提取层析和结晶等二是将混合物置于单一物链较多的蛋白质和酶不溶于水、稀盐溶液、稀酸或相中通过物理力场的作用使各组分分配于同区域碱中可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂它们具有一定的亲水性和较强的亲脂性是理想的提脂蛋白而达到分离目的如电泳超速离心超滤等。的提取液。冷乙醇分离法提取免疫球蛋白最早是由蛋白质(包括酶)的提取!>于$"$年提出的用于制备丙种球蛋白。目前国际上常用的冷乙醇法有两种一种是美国等大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁主要使用的>AB法另一种是西欧等国主醇等有机溶剂中因此可采用不同溶剂提取分离要使用CDEFAG和DFE>法。冷乙醇分离法是和纯化蛋白质及酶。H规程和中国生物制品规程推荐用的方法不水溶液提取法仅分离物质多可同时分离多种血浆成分分辨率!"!高提纯效果好而且有抑菌、清除和灭活病毒的作稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、用但是要需要在低温下操作。丁醇提取法对提取溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂通常用量一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越一是是原材料体积的倍提取时需要均匀的搅拌因为丁醇亲脂性强特别是溶解磷脂的能力强二以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成份性是丁醇兼具亲水性在溶解度范围内不会引起酶质而定。一方面多数蛋白质的溶解度随着温度的升高而增大因此温度高利于溶解缩短提取时及温度选择范的变性失活。另外丁醇提取法的围宽。间。但另一方面温度升高会使蛋白质变性失活因此基于这一点考虑提取蛋白质和酶时一般采用低酶法!"$由于米糠中的蛋白质与纤维素、糖类、植酸盐温(以下)操作。另外蛋白质酶是具有等电点等其他成分键合牢固使得米糠蛋白较其他植物蛋的两性电解质提取液的值应选择在偏离等电白的提取困难。米糠蛋白的传统提取方法是采用强点两侧的范围内。一般来说碱性蛋白质用偏酸碱溶液提取但提取效果较差。而且在强碱作用下性的提取液提取而酸性蛋白质用偏碱性的提取蛋白质中的赖氨酸与丙氨酸或胱氨酸会发生缩合液。再则稀浓度可促进蛋白质的溶解称为盐溶作反应生成有毒物质(对肾脏有害)丧失食用价值。用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合有保护蛋白质不易变性的优点因此在提取液中加入少量等中性盐一般以#(:浓度为宜。收稿日期:##$天津化工)"))年>月李喜红等!"#用酶法从脱脂米糠中提取蛋白质。反胶团相转移法是)年代兴起的一种新型分如果戊聚糖复合酶与碱性蛋白配合使用脱脂米糠离技术它利用表面活性剂分子在有机溶剂中自发形成的反向胶团(反胶团)在一定条件下将水溶性中的蛋白质的提取率可达到$(。添加不同的糖蛋白质分子增溶进反胶团的极性核(水池)中再创酶或蛋白酶均能有效地提高脱脂米糠中蛋白质的提取率其中糖酶中以戊聚糖复合酶的效果最好造条件将蛋白质抽提至另一水相实现蛋白质的相蛋白酶中以碱性蛋白酶的效果最为突出。戊聚糖复转移达到分离和提纯蛋白质的目的。反胶团中的合酶提取脱脂米糠蛋白质的优化条件是:加酶量蛋白质分子受到周围水分子和表面活性剂极性头的保护仍保持一定的活性甚至表现出超活性。比)$(*值,温度)提取时间,碱性蛋如程世贤等!#就运用反胶团提取大豆中的蛋白质和白酶的适宜作用条件是:加酶量)(*值)温豆油。度提取时间"。郭荣荣等!,#碱法与酶法与酶法提取大米蛋白工艺及功能特性比较研究得出结蛋白质的纯化论是碱法提取的大米蛋白持水性、吸油性和起泡性优于酶法提取的大米蛋白而酶法提取的大米蛋白蛋白质的一个主要特点是分子大而且不同种的溶解性、乳化稳定性和泡沫稳定性优于碱法提取的类的蛋白质分子大小也不相等。由此可以用凝胶过大米蛋白。两种方法提取得到的产品乳化能力相当。滤法、超滤法、盐析法、离心法及透析法等将蛋白质酸碱度法与其它小分子物质分离也可将大小不同的蛋白质!"#王桃云等!#就是运用这种方法配合使用加热法!>#就是根据蛋白质的这种特性对分离。如顾有方等血液中免疫球蛋白进行提取的。提取葎草叶蛋白取葎草鲜叶晾干混匀取烘干称重测定干物质重。鲜叶打浆后在适量浸提剂中根据蛋白质溶解度不同的分离方法"!浸泡然后用四层滤布压汁得滤液用双缩脲法测蛋白质的溶解度受溶液的*、离子强度、溶剂的电解质性质及温度等多种因素的影响。在同一特定其吸光度以比较不同的打浆时间、浸提剂*定条件下不同的蛋白质有不同的溶解度达到分值、料液比以及浸提时间对提取效果的影响。压汁离的目的。分以下三种方法:蛋白质的盐析等电点后的滤液再经低速离心分离())))沉淀法低温有机溶剂沉淀法。得到去除杂质的汁液使其在恒温水浴锅内快速加热到规定温度恒温得絮凝物过滤得叶蛋白沉淀中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响一般在低盐浓度下随着盐浓度升高蛋白质的溶解度增物烘干得叶蛋白浓缩成品上清液用*的加此称盐溶当盐浓度继续升高时蛋白质的溶解和*的:<调汁液*值得叶蛋白沉淀度不同程度下降并先后析出这种现象称盐析将物烘干得叶蛋白浓缩成品。根据它们的沉淀率比大量盐加到蛋白质溶液中高浓度的盐离子(如硫较得到最佳絮凝温度和汁液*值。最后将得到的诸多最佳条件组合作为葎草叶蛋白提取工艺流程。酸铵的<和:)有很强的水化力可夺取蛋白质采用酸碱度法及加热法提取葎草叶蛋白的较分子的水化层使之“失水”于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电优工艺以及工艺参数是:常温、料液比=、打浆时斥力最小因而溶解度也最小各种蛋白质的等电间,、浸提时间,、浸提剂选用中性水溶液、点有差别可利用调节溶液的*达到某一蛋白质絮凝温度>)时沉淀分离得到叶绿体叶蛋白调的等电点使之沉淀但此法很少单独使用可与盐*值为)时分离出细胞质叶蛋白*值为"时析法结合用。用与水可混溶的有机溶剂甲醇乙醇分离出细胞质叶蛋白"前者为深绿色粉末后两者或丙酮可使多数蛋白质溶解度降低并析出此法分为土黄色和灰白色粉末葎草叶蛋白产品在条辨力比盐析高但蛋白质较易变性应在低温下进件下干燥。在以上条件下叶蛋白的得率为"(。!#行。胡卫新等!#在室温下采用盐析和等电点沉淀工陈申如等用酸法提取了鲢鱼鱼肉蛋白质提取的艺分离除去提取液中的大豆蛋白质。蛋白质无腥味色泽洁白蛋白质产率高可达$)(左右。根据蛋白质带电性质进行分离"反胶团相转移法!"$蛋白质在不同*环境中带电性质和电荷数量许亚平等:蛋白质提纯研究进展第卷第期不同可分为电泳法离子交换层析法。度将需要蛋白质从细胞的全部其他成分特别是不想要的杂蛋白中分离出来同时仍保留有这种多肽各种蛋白质在同一!"条件下因分子量和电的生物学活性和化学完整性(。荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳这是利用一种两性电希望今后科学工作者们能够找出更多更好的方法来提纯蛋白质使得对蛋白质的研究有更深更解质作为载体电泳时两性电解质形成一个由正极进一步的研究。为人类对生命的探索奠定好基础到负极逐渐增加的!"梯度当带一定电荷的蛋白解决人类生命的重大问题。质在其中泳动时到达各自等电点的!"位置就停参考文献:止此法可用于分析和制备各种蛋白质。离子交换,,李凤英崔蕊静李春华葡萄籽蛋白质的提取工艺研剂有阳离子交换剂(如:羧甲基纤维素#$纤维究(中国油脂():素)和阴离子交换剂(二乙氨基乙基纤维素当被分,,李喜红代红丽魏安池酶法从脱脂米糠中提取蛋白离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时带有与离质(粮油加工与食品机械:子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂,,郭荣荣潘思轶王可兴碱法与酶法提取大米蛋白工上随后用改变!"或离子强度办法将吸附的蛋白艺及功能特性比较研究(食品科学():质洗脱下来。翁瑜等(的双向凝胶电泳比较三种常:用蛋白质提取方法可以看出双向凝胶电泳的效果,,王桃云马红昌刘江颖葎草叶蛋白提取工艺的优化更好。(苏州科技学院学报(自然科学版)():根据配体特异性的分离方法亲和色谱法!"#,,陈申如张其标倪辉酸法提取鲢鱼鱼肉蛋白质技术亲和层析法是分离蛋白质的一种极为有效的的研究(海洋水产研究():方法它经常只需经过一步处理即可使某种待提纯,,程世贤龚福忠黄小凤罗良荣反胶团提取大豆中的的蛋白质从很复杂的蛋白质混合物中分离出来而蛋白质和豆油(食品科学():且纯度很高。这种方法是根据某些蛋白质与另一种,,顾有方刘艳慧陈会良刘德义免疫球蛋白分离提取称为配体()*,)的分子能特异而非共价地结合。方法及其应用的研究进展(畜牧兽医科技信息其基本原理:蛋白质在组织或细胞中是以复杂的混:合物形式存在每种类型的细胞都含有上千种不同,:,胡卫新王晓磊张洁大豆异黄酮提取条件和大豆蛋的蛋白质因此蛋白质的分离提纯和鉴定是生物白质分离工艺研究(大豆科学():化学中的重要的一部分至今还没有单独或一套现,,翁瑜曾群力姜槐许正平双向凝胶电泳比较三种常用蛋白质提取方法(中国生物化学与分子生物学报成的方法能把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白():质中提取出来因此往往采取几种方法联合使用。,,仝向荣王德斌马绍宾棒纹牛蛭体内抗凝血蛋白的仝向荣等(通过离子交换、凝胶过滤、亲和层析及反提取(昆明师范高等专科学校学报():向高效液相色谱操作提取了棒纹牛蛭体内抗凝血蛋白。,,王洪新胡昌云茶叶蛋白质提取及初步纯化研究(食品工业科技():展望#,,李殿宝从葵花脱脂粕中提取分离蛋白质工艺的研究蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂的混(辽宁师专学报()::合物形式存在每种类型的细胞都含有成千种不同,,<=)>$=A*BC,DE,AF,*G*H*ACIFCJ!E,AKEKA,IK,A*CKI*LKJICMEKKBGKF(NO<)KAAKIFP的蛋白质。蛋白质的分离和提纯工作是一项艰巨而P繁重的任务到目前为止还没有一个单独的或一Q:套现成的方法能把任何一种蛋白质从复杂的混合物,,#"=RST<A,H*E*AUCJ"*ID*P,GICMH*F!KB*J*B中提取出来但对任何一种蛋白质都有可能选择一VG*H*ACI(H*CE#GKMPPWXQ::套适当的分离提纯程序来获取高纯度的制品(。,,O=<=RYZ=E=ZPO=<YZ=VVPKA,EZ,FBDE,E,AKEKA蛋白质提纯的总目标是设法增加制品纯度或比活,E,FM,"CMKCFA,F*FKDE,ACIFJICMOECCFDB^*性对纯化的要求是以合理的效率、速度、收率和纯=*M,EF(O*CBGKM*FAIUPPWXQ天津化工第C卷第J期Y,CJD)$„$A),#$(*C年=月,C二氧化碳催化转化新进展刘蒽莉(西北化工研究院陕西西安=>)摘要:本文介绍了近年来由ABC制取甲醇、二甲醚、合成气、胺类等化学品的研究新进展。并对ABC研究发展方向进行初步探讨。关键词:二氧化碳催化合成应用中图分类号:DE>C=>FC文献标识码:G文章编号:>HI>C=(C)JI>CIJ目前全世界产生的二氧化碳超过CJK>H除催化剂合成甲醇的活性。U**等SCT用钯作助剂制备铜锌催化剂钯和铜协同作用大大提高了甲醇产>LK>H被植物吸收外MK>H排放到大气中如何有效地利用二氧化碳已成为广大科技工作者的量。丛昱等SOT用共蒸馏法制备的超细AIV$BIV*BC奋斗目标。人们利用ABC主要有(>)ABC与NC反应催化剂和工业甲醇催化剂AIV$BIG,CBO作对比实。超细AIV$BIV*BC催化剂在RWOPR)DW生成高附加值的化学品CABC与ANJ反应生成合验NCB反应生成烃、醇类燃料。前两LJHXQYWHI>Y(NC)ZY(ABC)WO条件下成气等OABC与种已工业化后一种技术上已取得突破性进展。甲醇的最大收率达到=OJ:(:)高于工业甲醇催化剂AIV$BIG,CBO。姜忠义等SJT采用Q:)公司提供二氧化碳催化加氢!的原料:甲酸氢酶(UN)、甲醛脱氢酶(UGN)、乙GN)和点子供体烟酰胺腺嘌呤二核苷醇脱氢酶(ABC在催化剂作用下与NC反应可生成甲醇、二甲醚、低碳烯烃、低碳醇等小分子物质。催化剂、反酸(GN)制备酶催化剂催化ABC和NC反应。在应温度、压力、空速、原料气配比等参数都会影响产条件DWCMHXRWOOXR)NW=H甲醇的收率达物种类、收率。到MCJ^。李桂英等SLT研究U助剂对ABG,CBO甲醇合成甲醇!"!催化剂的影响时发现U助剂能改变ABG,CBO催A的分布、分散度和价态增加铜物种的含化剂中ABC加氢合成甲醇催化剂是在AB加氢制甲醇量提高催化剂的低温活性。催化剂的基础上研发的。目前选用的催化剂主要有合成二甲醚!"#铜基催化剂和贵金属催化剂PCA、Q$A,J等类型催二甲醚是一种绿色环保的气雾剂、致冷剂、重化剂也有人研究。S>T理认为铜基催化剂表面的活性物种数目比决定着收稿日期:CICIH!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!"#"$$()$*"#,,"*$**:*"!!"#$"()*,"($(,$()""$(,($"<#$=#$()*,()$$$(*$*)*)$)*((()$()*(((()$$,$)*(*)$)$)$*)$*$(*$*#):(,($*)*)$)$),)$*$>"(#=*$<(,)$<*)$()()R*)深入研究了铜基催化剂的催化原

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