红细胞渗透脆性试验
[实验目的]： 学习测定红细胞渗透脆性的方法
[实验原理]： 将红细胞放置于等渗溶液中，红细胞的形态不发生改变。放置于高渗和低渗盐溶液中红细胞的形态均出现改变，置于高渗液中，红细胞出现皱缩；置于低渗液中则发生膨胀，最后破裂，细胞内容物溢入血浆或溶液，这种现象称为溶血。
将血液滴入不同浓度的低渗盐溶液中，可以检查红细胞对低渗溶液的抵抗力。开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力（约0.40%~0.45%NaCl溶液），而完全溶血则为该血液红细胞的最大抵抗力（约0.30%~-0.45%NaCl溶液）。对低渗盐溶液的抵抗力小
表
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示红细胞的脆性大，反之表示脆性小，最大抵抗力到最小抵抗力的范围，称脆性范围。
[实验对象] 家兔
[实验器材] 试管架、5 ml试管十支、2 ml吸管两支、注射器、1%NaCl溶液、蒸馏水、枸椽酸钠。
[实验步骤]
（一）低渗盐溶液的配制
取试管十支，洗净烤干，用玻璃铅笔编号，排在试管架上，参照下表向各试管中加入1%NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，每管溶液均2 ml。
试管号
试管
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1%NaCl（ml）
1.40
1.30
1.20
1.10
1.00
0.90
0.80
0.70
0.60
0.50
蒸馏水（ml）
0.60
0.70
0.80
0.90
1.00
1.10
1.20
1.30
1.40
1.50
NaCl浓度（%）
0.70
0.65
0.60
0.55
0.50
0.45
0.40
0.35
0.30
0.25
（二）枸椽酸钠血的制备
家兔颈部解剖，剥离颈总动脉，插管，将血放入烧杯内，烧杯内事先加入3.8%枸椽酸钠溶液，血与枸椽酸钠溶液的比例为9:1，轻摇烧杯使之混匀。
[观察项目]
用注射器向每个试管内加入兔血一滴，用拇指堵住试管口，将试管颠倒2~3次（不要用力振荡以免溶血），在室温下静置1小时，然后观察各试管的透明度以判断是否溶血。
1、试管内下层为混浊红色，上层为无色或淡黄色液体，说明红细胞尚未破坏。
2、试管内下层为混浊红色，上层为透明淡红色，则表明红细胞部分溶解，才出现溶血的低渗盐溶液的浓度，为红细胞的最小抵力（最大脆性）。
3、试管内溶液呈现透明红色，说明红细胞全部溶解，称为完全溶血，首先引起红细胞全部溶解的低渗盐溶液浓度，即红细胞的最大抵抗力（最小脆性）。
通过试验，记录红细胞的脆性范围。
[思考题]
? 1. 为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值？
? 2. 红细胞渗透脆性实验的临床意义。
? 3. 输液时为何要输等渗溶液？
结果
分析
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： 将红细胞悬浮于低渗盐溶液中，水将在渗透压的作用下渗入细胞，于是红细胞发生膨胀，由正常的双凹圆碟形变成球形，并开始破裂而发生溶血。红细胞在低渗盐溶液中发生膨胀破裂的现象称红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定的抵抗力，这种抵抗力的大小可作为衡量红细胞渗透脆性的指标。同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂，正常人刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为0.46%~0.42%NaCl溶液；而较幼稚的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂，正常人出现完全溶血的NaCl溶液浓度为0..34%~0.32% NaCl溶液。
红细胞膜对水分子可自由通透，水分子依渗透压梯度进入红细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，红细胞在蒸馏水中立即发生溶血。
红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。
NaCl分子和红细胞内的物质都不易透过红细胞膜，故红细胞在等渗的0.85%的NaCl溶液中不会发生溶血，因此，0.85%的NaCl溶液既是等渗溶液又是等张溶液。
1. 红细胞在小于或等于0.46%浓度的低渗盐溶液中会发生溶血。
2. 正常人红细胞渗透脆性最高值为0.46%～0.42% 的NaCl溶液，最低值为0.34%～0.32% 的NaCl溶液。
3. 红细胞在等渗盐溶液中为双凹圆碟形，在低渗盐溶液中为球形。
4. 红细胞在等渗的尿素溶液或蒸馏水中会立即发生溶血。
【实验报告要点】
一、 为什么同一个体的红细胞渗透脆性有最大值和最小值？
同一个体的红细胞对低渗盐溶液的抵抗力并不相同。生理情况下，衰老的红细胞可变形性减小，变成球形，因而对低渗盐溶液抵抗力低，会先发生破裂；而较幼稚的红细胞的抵抗力高，较后发生破裂。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，刚开始出现溶血的NaCl溶液浓度为该血液中红细胞的最大渗透脆性，出现完全溶血的溶液浓度，为该血液中红细胞的最小渗透脆性。
二、 红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会发生什么现象？为何出现这种现象？
红细胞在等渗的1.9%尿素溶液中会立即溶血。因红细胞膜对尿素分子可自由通透，尿素分子依浓度梯度进入红细胞，而红细胞内的物质不能自由通过红细胞膜，导致红细胞内渗透压增高，水进入细胞，红细胞膨胀破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液虽是等渗溶液，但不是等张溶液。
【参考内容】
一、红细胞渗透脆性实验的临床意义
【临床意义】
红细胞在低渗盐水中，水分透过细胞膜可使红细胞逐渐胀大而破坏。本试验是测定红细胞对各种浓度的低渗溶液的抵抗力。红细胞对低渗溶液抵抗力与其厚度有关，厚度越大，膜面积与体积比值越小，则渗透脆性越大。
1.红细胞脆性增加 遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。
2.红细胞脆性减低 见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等。
浙公网安备 33021202002483