溴麝香草酚蓝比色法测定叶下珠生物碱的含量
溴麝香草酚蓝比色法测定叶下珠生物碱的含量
作者:
邓光辉 胡炜 刘榕城 张桂华 农林【摘要】 目的测定叶下珠中总生物碱的含量。方法以溴麝香草酚蓝为显色剂于415 nm波长处测定吸光度。结果苦参碱在0.004,0.02 mg,ml范围内线性关系良好(r=0.997 54);其与溴麝香草酚蓝所形成的离子对产物在6 h内稳定;平均加样回收率为98.65,(RSD=
1.98,)。结论该方法简单、快速、准确，可用于生药及产品的生物碱质量控制。
【关键词】 溴麝香草酚蓝 比色法 叶下珠 生物碱 叶下珠(别名珍珠草)为大戟科叶下珠属中的一种草本植物，具有清肝明目、解毒消肿的功效，常用于治疗腹泻下痢、尿路感染、小儿疳积、肝炎、肾炎等疾病，其化学成分主要有生物碱和黄酮两大类。
生物碱是存在于生物体内的含氮有机化合物，大多数存在于植物中，目前已分离到三千余种，其中近百种具有很强的生理活性,1,。现代药理研究表明，生物碱具有抗肿瘤、抗炎、抗心律失常等方面的作用,2,3, ,其在医药和农药方面的应用已引起人们的广泛关注。
对天然生物碱的生物活性、提取、精制、鉴定方法等方面的研究多见报道,4,。目前总生物碱的含量测定有重量法、酸碱滴定法、分光光度法。考虑到生物碱的结构，本文采用酸性染料比色法，以苦参碱为对照品，对不同产地来源的叶下珠中的总生物碱进行了含量测定，建立了叶下珠中总生物碱含量的测定方法。
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材料
关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料
与仪器 JP600型变辐杆式超声波萃取器(武汉嘉鹏电子有限公司);916型紫外-可见分光光度计(澳大利亚GBC公司)，
分析
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天平(上海第三分析仪器厂)，酸度计，苦参碱 (中国药品生物制品检定所)，溴麝香草酚蓝和其余试剂均为分析纯。
叶下珠，购自广西、云南、广东。
2 方法 2.1 储备溶液的配置精确称取苦参碱
标准
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品10 mg，用95,乙醇溶解后定容于50 ml的容量瓶，摇匀，备用。
2.2 对照品溶液的配置移取“2.1”项下储备溶液5.00 ml于50 ml容量瓶，定容，摇匀，备用。
2.3 样品溶液的制备取叶下珠粉碎成粗粉，精确称取5 g，加入0.5%的乙酸溶液200 ml，浸泡24 h，超声波提取30 min过滤，往滤液中加入氢氧化钠溶液至中性，过滤。沉淀用95,乙醇溶解后定容于50 ml容量瓶中，备用。
3 结果 3.1 条件的优选 3.
1.1 最大吸收波长的确定移取对照品溶液2.00 ml，置于125 ml的分液漏斗中，加入pH=7.5的磷酸盐缓冲液5.00 ml，加入0.025%的溴麝香草酚蓝
1.00 ml，加入氯仿10.00 ml，振摇1 min，静置30 min，分取氯仿层于具塞锥形瓶中，用无水氯化钙干燥5 min，以5.00 ml蒸馏水加pH=7.5的磷酸盐缓冲，加0.025%的麝香草酚蓝，加氯仿的萃取溶液作为参比，在360,550 nm波长范围内进行扫描，结果显示溶液在415 nm波长处有最大吸收。
3.
1.2 pH值的确定移取对照品溶液2.00 ml，按照“3.
1.1”项下方法分别加入pH为6.0，6.5，7.0，7.5，8.0的磷酸盐缓冲液，结果显示:
当加入的磷酸氢二钠与磷酸二氢钾的浓度分别为0.008 mol/L和0.030 mol/L(pH=7.5)时，溶液的吸光度最大，所以实验选择pH为7.5的磷酸盐缓冲溶液。 3.
1.3 溴麝香草酚蓝用量的确定移取对照品溶液5.00 ml，按照“3.
1.1”项下方法分别加入0.025%的麝香草酚蓝
1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml，结果显示，当加入的麝香草酚蓝体积为4.00 ml时，溶液吸光度最大，所以实验选择溴麝香草酚蓝的用量为4. 00 ml。
浙公网安备 33021202002483