【doc】胎儿（36—40周）纹状体和下丘脑NPY免疫反应神经元的分布

【doc】胎儿（36—40周）纹状体和下丘脑NPY免疫反应神经元的分布 胎儿(36—40周)纹状体和下丘脑NPY免 疫反应神经元的分布 71o[.i(}, 神经竖型堂盘查1塑堡箩!鲞苤塑 .87留>), 201 胎儿(36—40周)纹状体和下丘脑NPY免疫反应神经元的分布 叁高振晋;z2tg|' (白求恩医科大学解剖学教研室,长春13002I) 关蕾骨骆几NPY免疫纲胞化学彳 一i/. 杠文用兜受细胞化学ABC法研究胎儿(3,一0周)致状体舶丘捕NP,.免疫反应神经元 屿分?.d:胎兑的纹状体生现尾状枝和壳含有许多NFY免疫反应神经元的胞体和纤维.这两个 医域一些血管壁内也台有NPY免疫反应神经元的胞体和纤维. .倍儿I-王卣的漏斗梭帮上棱台密集的NPY竟疫神磐元胞1术,在室旁缓偶尔Ij三可见到少数 凫疰神经元匏体. 本文首次报道了尾状枉阳壳的血管壁内及规k坊台有NFY免受厦应神经元胞雉. II1982年Tatemoto"从猪碴分离出神经肽Y(NeuropeptidetyrosineNPY)之后通 过l放射免疫匀析的研究 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 了NPY免疫反应神经元广泛地分布于哺乳动物的中枢神经系 统.免疫纸胞化学研究.发现NPY免疫反应神经元的胞体聚蔡于大脑皮质.尾壳核,下 丘脑的弓状梧,海马,前嗅球,隔核,伏隔攘,杏仁复合体及中脑水管周围荻质.终纹床 核,下丘脑的室周和室旁区也发现了密集的NPY免疫反应纤维.电镜研究在轴突 和终末观 察列了免疫反应阳性的致密囊泡Pe!litier.和Adrlan'应用免疫细胞化学方法证明了人下丘 脑漏斗核也含NPY免疫反应神经元但NPY免疫反应神经元在胎儿脑的分布和形态尚未 见有详细报道.本实验在光镜下观察了36,40周胎儿续状体和下丘脑NPY免疫反应神经元 的分布和形态. 材宰i}与方法 36,40历胎儿尸体6具(男4,女2).死后4—6小时经左心室灌流固定先以生理盐水 冲洗.继而注入冷的含4%多聚甲醛o.05%戊二醛,0.2%苦味酸的0.IM碑酸缓冲液 (pH7.4)2500m1.放入4?冰箱过夜,次日取脑,切成1cm厚的冠状脑片后瞄定l0—30 天,再切取纹状体及下丘脑,梯度酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,冠状连续切片,片厚 7m然后根据Hsu等人的免疫细胞亿学卵白素一生物索一过氧化物酶复台体(Avin— Biotin—peroxidaseComplex,ABC)法显示NPY神经元,择作程序如下: (1)切片经脱艏后浸入梯度酒精:(2)切片经PBS洗涤5分钟;(3)10%甲醇古 0.5HOz30分钟;(4)切片经含0.2Tritonx,l00的PBS洗涤20分钟;(5) l正常羊血清rVectastai11,ABCkit)0.1Tritonx,l00的PBS预孵育30分钟,以 后每步骤完成后均用PBS洗涤切片2—3遍,30分钟;(6)抗NPY血清(加拿大Lava 大学中心医院内分泌研究宴NRC组提供的N.4603抗NPY血清)用含0.1TritonX— l00的Trs—Hci缓冲液稀释稀释度为l:i000,4?冰箱湿盒内孵育48—72小时,前后 各有l小时置于室温下;(7)生物索结台的羊抗兔IgG抗体(44/A+l0mlPBSABCkit) 孵育90分钟,室温;(8)卵白寨一生物索过氧化物酶复台体(88I卵自紊,88#1生材素一 Z0Z 过氧化物酶复台体'-i0mlPBS,ABCkit)孵育j小时,室温;(9)DAB/H:0=溶液f 2.5mgDAB0.03mlHO/:0mlTris,Hcl缓冲液pH7.6)孵育s一7分钟.室温下干 燥脱水,透明,部分切片用0.005锇酸浸染40分钟以加强DAB反应衔. .6具胎儿尸体的神经系统投有发现畸型及病理改变 对照实验:(1)置换实验:用正常兔血清代替兔抗NPY血请孵育切片(2)吸附实 验lml稀释的兔抗NPY血清(1:1000)加入l00gNPY混匀,在4?条件下孵育48小 时,用3000转/分的高速离心机离心20分钟,取上请液孵育切片其步骤与正常实验相同. 结果 在光镜下观察NPY免疫反应神经元胞体分布于新纹状体下丘脑的漏斗核及视上核的 背外侧都个别切片的视上榜腹内侧部亦见到免疫反应神经元的胞体(图1) 图1纹托忙和下丘脑NPY免疫反应神经元分布 示意图 cD,尾就梭PuT,壳,GPe,苍白球外 侧部IGPi,苍白球内侧部,AC,前连合, FX,穹窿,LH,外侧下丘脑,MH,内侧 丘酗,SO,规上棱,OT,视柬lI,谓 斗桉. 新纹状体(neostriatum)尾状核和壳含大量NPY免疫反应神经元的胞体.依据这些 细胞的形态分为两种主要类型:第一种为球形或多极,中等大小,直径约l8—20,胞体 深染,'核区大部分被匣应顾粒复盖,胞体伸出数个长的突起(图2,3),有的可见串珠状轴 突由胞件的一端发出,这类细胞约占新纹状体内NPY免疫反应阳性细胞的9s第二种类 型细胞较大?约25一柏,um,多为三角形或梭形(凰2.8)新纹状体所含NPY免疫反 应 神经元不聚集成群,散在地分布于新纹状体内新纹状体也含有NPY免疫反应纤维,稀疏 分布,多数纤维粗大井带有圆而大的膨体(图4)新纹状体内一些血管壁显示出NPY免疫 反应纤维或胞体一纤维走行方向及胞体长轴沿血管横断面呈弧形配布(图5,6.7),胞体 为梭形,体积较血管肇以外的免疫反应神经元的胞体小苍白球内没有发现免疫反碰结构. 下丘脑细胞质着色较浓的NPY免疫厦应神经元胞体密集于下丘脑的内侧基底部,相 当于漏斗核(图l,9).从视变叉的后部至乳头体前均含免疫反虚神经元胞体.与新纹状体的 NPY免疫反应神经元胞体此较,明显的差别是细胞质少,核大,圃而明亮,胞体仅带有1个 短柏突起.突起星罐体形井深染,'胞体阈形,大小均匀,形番相似,直径约j8-22坤(罔 ? 9).室旁核也含少量NPY免疫反应胞体(图8),多为椭圆形.稀疏的免疫反应纤维分布 于全下丘脑与成年大白鼠比较,胎儿的下丘脑纤维稀少且粗,膨体大(圈l1).室)苟层免 疫反应纤维大部分沿室管膜垂直分布,密集成丛(圈12.】3),有些纤维伸入室瞥膜上皮细 胞之间直达第三脑室游离面(图儿.14),视上核的背外侧部含密集成群的NPY免疫反应 神经元胞体,胞体的太小,形态与漏斗核的NPY免疫反应神经元胞体相似,胞体带有短而 粗的突起,核圃而大.胞质少f图l0).视上核的腹内侧偶见1—3个NPY免疫反应神经 元胞体 讨论 纹状体:E研究发现胎儿的新纹状体内散在着大量的NPY免疫反应{4:经元,尾状核 比壳的数多,而苍白球内没有发现N'PY免疫反应结构.这与Smith用免疫细胞化学方法 (Squireii~oI1key)纹状体的研究结果相似.但Dawbarll.用放射免疫分析方}在鼠.强 在 死后成人脑的研究结果与我们用免疫细胞化学方法研究胎儿脑有明显的不同他们认为成人 脑苍白球佻【:含NPY免疫反应神经元与尾状核相同.而在胎儿标本上苍白球完全没有显 示出NPY免疫反应结构=这不的结果是否由于所使用的方法不所致或胎儿和成人之间 存在着差别尚需进一步探讨.DiFiglia在猴的新纹状体发现中等大小的神经元不投射捌新 纹状体以外的结构,认为捏新纹状体的固有结构.我们在胎儿新纹状体所见免疫反应种经元 的形态与其相似.本研究首执在新纹状体的一些血管壁中显示出NPY免疫反应神经元胞体 和纤维.为NPY具甍使血管收缩戢生理现象提供了形态学依据. 下丘脑下丘脑是台NPY免疫反应神经元胞体和纤维的脑组织之一.下丘脑漏斗核 宙大量密集?NPY免疫厦应神经元,与早期在哺乳动物及灵长类下丘脑弓状核免疫反应研 究结果一致.但核大细胞质少,可能与胎儿发育有差.奉实验是第一次报道在视上核和 室旁核出现NPY免疫反应神经元胞体,室旁核NPY免疫反应神经元很少.据文献 报道视 上核和室旁核还含有厩叶加压素和催产素神经元因此,对研究NPY,后叶加压素和倦产素 共存提示了探讨的课 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 . 下丘脑NP免疫反应神经纤维稀少且粗大,可能是}自胎儿与成年人不同生理状态出现 的差别.室管膜上皮下NPY免疫反应神经纤维与室管膜细胞之阉的关系及其伸入第三脑室 形态特征与其它肽类神经元纤维相似.根据早期报道.,NPY的释放也可能通过两条去 路:(1)NPY一室管膜的伸张细胞一垂体静脉一垂体,调节垂体功能;(2)NPY一第三脑 室一交流于中枢神经舀部之间. 本文插图由时力同志缍缸,特此致谢. (1988年11月收藕) 本文图2一l4见版图3d页 参考文献 1.朱臣赓箨l神经解音孕1?85,1985 2.朱长赢等解16:137,1985 3.戴挂林等一种经解剥学杂奄3?86,1987 4.Adria:lTEetal;Nature306I584,1983' 5.DaWharnDetallB1sinRes296?168,1 2U4 8.D=e'Qu.id~EandEm$onPCINeuroscience18,545,1986 DiFigliuMetul{BrainRe*114i245,,1976 8.HsuSMe'tal:AmJClinPatk0175l734,I981 9.PelletierGeta1.CellTissueRes238i208,1984 10.SmithSetal:JCompNeurol236{71,1985 11.TatemotoKetaltNature296l659,lg82 THEDlSTRIBUTl0NOFNPYI啊啊UN0RE^CTlVENEURONSINTHE STRIATUMANDTHEHYP0TH^L^MUS0FHUMANFETUS SorgYulfang,EaiGuiiin,GaoZhenping (DepartmentofAnatomy,NormanBethuneUniversity ' ofMedicalSciences,Changchun) Keywordsfetus,neuropeptideY,immunocytochemistry,striatum,hypotha~mas ThedistributionofneuroplF.tideT(NPY)immunoreactiveneuronsinthestrlntum 40weeksoffetallife)'r8sstudiedby andthehypothalamusofhumanfetus(36— meansOfAvidinBioti~一peroxidasecomplex(ABC)technique. Inthestriatum.1ltlmeFousNPYimmunoi'eactiveEeEronalcellbodiesandfibers wereseenintheeaudateIIUCleusar.dthepu~tamen.个heNPYimmunoreactireneurons werealsofbundinthevascularwallofthesetwo~teas. Inthehypothalamus,theimmu~oreactireneufonalcellbodieswerefoRnddensely intheinfundibularnucleu$andtheSupraopticnucleuswhileoccasionallyin拙0paCa— ventIieularnuclett$. Toourknowledge.thisisthefirstreportabouttheNPVimmunoreactirenenro— halcellbodiesfoundinthevascularwallofthecaudatehueleus,theptrtamen,and inthesupraopticnucleus. 版图说明 图2.3示新纹扶毕内NPY免疫反应神经元×200 图4示新纹状体内NPY兜壹反应纤维×200 图5示新纹状体血管壁内NPY免盘反应纤维Ve血管腔×290' 图6,7示新纹状体血管壁内NPY免爱反应神经元的晦体Ve血管腔×200 图8示室旁核NPY免疫反应神经元的胞休V?第三脑室.? 图9示旃斗杉NPY免缝反应神经元r漏斗桎I×50框图为十所示细胞放犬' 图l0示祝上核背外删部NPY兔崔反应神经元SO?视上榜×50框图为+所示细胞 放大 图II.室旁核,室局屡及室管膜内NPY竟疫反应神经元的纤维Pa室旁榜'P.室周层 JE{ 室管膜}V{第三莉宦×100 圈l2,13示室管漠下NPY免疫反应纤维的走行方向P室周雇,E?室管膜IV{第三脑室 ×100' 囤1d示NPY免疫反应纤维延伸至第三赫窄P室周层'E.室管腆JV?'第三辟枣w10~