O抗原的提取O抗原的提取1沙门氏菌脂多糖的提取（热酚水法）热酚水法提取脂多糖所需的试剂（1）45%酚水溶液：加55mL去离子水于45mL融化的苯酚溶液中，混匀后室温保存备用。（2）95%酚水溶液：加5mL去离子水于95mL融化的苯酚溶液中，混匀后室温保存备用。主要仪器恒温水浴锅微量高速台式离心机台式恒温振荡器LPS粗品的制备1菌体破碎细菌收集物加蒸馏水进行悬浮细菌悬浮液放入水浴锅中70℃水浴3min菌悬液于碎冰中浴3min，反复冻融4次LPS制备（热酚水法）菌液加45％酚水作用5min,再加等量95％酚水，68℃水...
O抗原的提取1沙门氏菌脂多糖的提取（热酚水法）热酚水法提取脂多糖所需的试剂（1）45%酚水溶液：加55mL去离子水于45mL融化的苯酚溶液中，混匀后室温保存备用。（2）95%酚水溶液：加5mL去离子水于95mL融化的苯酚溶液中，混匀后室温保存备用。主要仪器恒温水浴锅微量高速台式离心机台式恒温振荡器LPS粗品的制备1菌体破碎细菌收集物加蒸馏水进行悬浮细菌悬浮液放入水浴锅中70℃水浴3min菌悬液于碎冰中浴3min，反复冻融4次LPS制备（热酚水法）菌液加45％酚水作用5min,再加等量95％酚水，68℃水浴20～30min冷却到10℃左右，5000r/min离心45min吸取上层水相，重复提取2次所得溶液装入透析袋，透析48h,蒸馏水静置透析2d加入聚乙二醇浓缩LPS溶液为原来体积的1/4，即得粗品LPSLPS的纯化粗品LPS中加入DNaseI和RNaseA，37℃下酶解4h100℃水浴加热10min冷却至室温后离心(1500r/min，30min)取上清，加2倍体积的丙酮，过夜沉淀200r/min，2min，弃上清，即可获得纯化LPS。阪崎肠杆菌中LPS的提取实验仪器：QL-901漩涡混合器SIGMA4K15离心机10μL野生菌株接于20mLSOB培养基中，37℃过夜培养转接到20mL摇瓶中，用于LPS的提取5000rpm，4℃，10分钟，离心收集菌体，。重悬菌体于Tris中，4℃，离心10min.去上清，重悬于TrispH8.1溶液，置于冰上，加入20μL溶菌酶30min-70℃冰箱，30分钟浴化,加入EDTA，震荡混匀，转移溶液至预冷离心管中冰上，超声破碎细胞，4℃，6000rpm，15min，转移上清，16000rpm，60min，去上清，室温干燥
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