葡萄内生菌中油脂降解菌的筛选与鉴定
课题组人员:
课题组指导老师:
课题组组长:
组员名单:
一、研究方向:
随着人民生活水平的提高及餐饮业废水的增多,排放到水体中的油脂废水也日益增多,其成分复杂,有机物含量高。这些有机物如不经处理而排放到江河湖海后,飘浮于水体
表
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面,影响水体的富氧及其自然净化过程, 危害水体生态系统, 严重污染周围环境。目前～对以上油脂处理的方法生物学处理法实惠而且更有利于生态。采用能够降解油脂的微生物～可以利用油脂作为碳源和能源～使之成为甘油和和脂肪酸最终使油脂降解为水和二氧化碳。因此微生物法是极具应用前景的油脂废水的处理方法。
本组将以“从已有的葡萄内生菌中筛选出一株对油脂有较高降解率的微生物～并对其进行鉴定”为主要研究方向。
二、实验假设与理论依据:
1.实验假设:
在葡萄内生菌中提出油脂降解菌～利用废弃的油脂作为碳源和能源～
使之成为甘油和脂肪酸最终使油脂降解为水和二氧化碳。
2.理论依据:
石河子地区植物众多～尤其是在葡萄产业很丰富。在废弃的葡萄中
提检出油脂降解菌可以进一步发展经济和减少浪费。葡萄内生菌种类繁
多～根据不同的微生物的形态结构～及生长繁殖方式不同。可以观察并找
到其中的可降解油脂菌。
三、实验目标 :
1.科研目标:我国对于油脂降解菌方面的研究和应用尚处于初步探索阶段～
而日本、欧美一些发达国家已将油脂降解菌应用到生物垃圾降
解、含油废水的处理、洗涤用酶和生物柴油的生产等多项领域。
因此,筛选出油脂降解菌, 无论是对环境治理, 还是对酶法生
产生物柴油、降解食品中油脂, 都有着重要的意义。
2.育人目标:增强本组成员在学习中的积极性～在实验中总结经验并且激
发对本学科的认识和爱好。
3.工作目标:发现可降解菌株在葡萄内生菌中～加以利用可造福社会
四、实验对象、方法及手段:
1.实验对象:葡萄内生菌
2.实验方法:酿酒葡萄梅洛特的葡萄皮、葡萄穗轴及梗中分离出几株葡萄
内生菌～经过培养后～将菌株放入事先准备好的油脂中～经过
一段时间观察降解程度从而确定菌株的降解能力。
3.检测手段:观察降解油脂的程度
五、实验内容:
1.葡萄内生菌中油脂降解菌的初筛,
2.油脂降解菌的复筛,
3.菌株遗传稳定性研究:
4.菌株的鉴定。
六、实验过程,实验步骤,:
1.准备阶段,起止时间,
人员分配、收集相关材料、葡萄内生菌的培养、实验器材的汇总
2.实施阶段,起止时间,
?葡萄内生菌中油脂降解菌的筛选
初筛方法:
初筛培养基灭菌后倒入平板～固化后～每皿加4 滴灭菌橄榄油～用玻
璃刮子涂抹均匀～挑接斜面新鲜培养物少许～在平板上涂成圆点～
28-30摄氏度培养3-4天～选取在平板上生长的菌株～接种斜面保藏。
复筛方法:
挑取一环新鲜斜面种子～接入上述发酵培养基中～30度,150r/min的
条件下培养～不同时间取样～测废水中的油含量。 油脂含量的测定:
采用紫外分光光度计法。
?葡萄内生菌中油脂降解菌的鉴定
主要根据形态学特征, 并结合一些生理特性区分。
形态特征:
固体培养时, 菌落较大、粘稠、边缘整齐、圆形、中间隆起、乳
白色、湿润光滑、质地均匀、易挑取; 液体培养时, 有致密沉淀,
无环、岛及醭膜。显微镜下, 细胞圆形、卵圆形。繁殖方式是出
芽生殖, 美蓝染色时可区分死活细胞, 做载片培养时,显微镜下
能看到卵圆形细胞发芽后分支构成假菌丝。
生理生化特征:
碳源同化、硝酸盐同化、产类淀粉化合物、尿素分解、明胶液化、
无维生素生长、糖发酵实验结果。
3.总结阶段
2013.3-2013.7油脂降解菌的初筛、复筛,
2013.8-2013.9油脂降解菌的遗传稳定性研究,
2013.10-2013.12菌株的鉴定,
2013.12- 2014.1 整理资料～结题。
总结步奏:
?收集实验数据,将筛选、 鉴定菌株特征编辑表格,绘制菌株降解
油曲线.
?将最终所得实验数据,图表,曲线等进行总结.制作ppt等答辩材
料。
?编辑论文。
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