细菌生物化学试验
（一）碳水化合物的代谢试验
1.糖（醇、苷）类发酵试验
是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科的细菌的鉴定尤为重要。
致病菌一般不分解乳糖，非致病菌多数分解乳糖。
2.氧化-发酵试验（O/F试验）
主要用于肠杆菌科细菌（发酵型）与非发酵菌（氧化型）的鉴别。
两支培养基均无变化为产碱型；两支培养基均产酸为发酵型；若仅不加石蜡的培养基产酸为氧化型。
3.β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）
本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。
迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。
4.七叶苷水解试验
主要用于D群链球菌（试验阳性）与其他链球菌的鉴别，也可用于革兰阴性菌及厌氧菌的鉴别。
5.甲基红试验
主要用于鉴别大肠埃希菌（试验阳性）与产气肠杆菌。此外沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性。
试剂呈现红色为阳性，黄色为阴性。
6.V-P试验
出现红色为阳性，无红色出现为阴性。
V-P试验阳性的细菌，甲基红试验通常为阴性。
（二）蛋白质和氨基酸的代谢试验
1.明胶液化试验
培养基呈液化状态为阳性。
沙雷菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、阴沟杆菌等可液化明胶。
2.吲哚（靛基质）试验
主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。
测定靛基质用的蛋白胨含有大量的色氨酸。
两者液面接触处出现红色为阳性，无色为阴性。
3.硫化氢（H2S）试验
主要用于肠杆菌科中属及种的鉴别。沙门菌属、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属细菌绝大多数H2S阳性。
培养基变黑为阳性，不变为阴性。
4.尿素分解试验
培养基呈碱性，使酚红指示剂变红为阳性，不变为阴性。
主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。
奇异变形杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。
5.苯丙氨酸脱氨酶试验
出现绿色为阳性。
主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。
6.氨基酸脱羧酶试验
对照管应呈黄色，测定管呈紫色（指示剂为溴甲酚紫）为阳性，呈黄色为阴性。
（三）碳源和氮源利用试验
1.枸橼酸盐利用试验（CIT试验）
培养基中的溴麝香草酚兰指示剂由淡绿色变为深蓝色为阳性，培养基不变色为阴性。
主要用于肠杆菌科中菌属间的鉴定，在肠杆菌科中埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性；沙门菌属、克雷伯菌属通常为阳性。
（四）各种酶类试验
1.氧化酶（OX）试验
氧化酶是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。
细菌在与试剂接触10秒内呈深蓝色为阳性。
主要用于肠杆菌科细菌（OX阴性）与假单胞菌（OX阳性）的鉴别。
2.过氧化氢酶试验（触酶试验）
有大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴性。
此实验常用于革兰阳性球菌的初步分群。葡萄球菌H2O2试验为阳性，链球菌属H2O2为阴性。
3.硝酸盐还原试验（NIT）
加入试剂出现红色为阳性。
肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌可产生氮气。
4.酯酶试验
主要用于厌氧菌的鉴别。
5.DNA酶试验
菌落周围出现透明环为阳性，无透明环为阴性。
在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶，在肠杆菌科中沙雷菌和变形杆菌可产生此酶。
6.凝固酶试验
玻片法以血浆中有明显的颗粒出现为阳性。
凝固酶阴性葡萄球菌既为上呼吸道正常菌群，也可以引起上呼吸道感染。
血浆凝固酶试验可作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。
6.CAMP试验
两划线交界处出现箭头样的溶血区为阳性。
只有B群链球菌CAMP试验阳性。
7.胆汁溶菌试验
主要用于肺炎链球菌（胆汁溶菌试验阳性）与甲型链球菌（胆汁溶菌试验阴性）的鉴别。
（五）抑菌试验
1.杆菌肽试验
用于A群链球菌（杆菌肽试验阳性）与非A群链球菌的鉴别。
2.奥普托欣（Optochin）试验
抑菌环直径>14mm为敏感，若抑菌环直径≤14mm，应对此菌株再做胆汁溶菌试验，以证实是否为肺炎链球菌。
此试验主要用于肺炎链球菌（试验阳性）与其他链球菌的鉴别。
杆菌肽试验：A群链球菌（+）
CAMP试验：B群链球菌（+）
七叶苷水解试验：D群链球菌（+）
DNA酶试验：金黄色葡萄球菌（+）、沙雷菌（+）、变形杆菌（+）
胆汁溶菌试验：肺炎链球菌（+）、甲型链球菌（-）
奥普托欣实验：肺炎链球菌（+）
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