实验八:类胡萝卜素的提取

实验八:类胡萝卜素的提取实验八:类胡萝卜素的提取 1．初步了解天然化合物的提取方法。 2．掌握薄层色谱（TLC）的原理、用途及使用方法。利用类胡萝卜素在乙醇及石油醚中的溶解性，使番茄红素的红色素和β－胡萝卜素的黄色素得以富集。实验室常用的薄层色谱，其原理是利用混和物中各组分在不相混溶的两相即流动相（展开剂）和固定相（吸附剂）中吸附和解吸的能力的不同，也可以说在两相中的分配不同，当混合物随流动相（展开剂）流过固定相（吸附剂）时，发生了反复多次的吸附和解吸的过程，从而使混合物分离成两种或多种单一的纯组分。：番茄酱、乙...

实验八:类胡萝卜素的提取 1．初步了解天然化合物的提取方法。 2．掌握薄层色谱（TLC）的原理、用途及使用方法。利用类胡萝卜素在乙醇及石油醚中的溶解性，使番茄红素的红色素和β－胡萝卜素的黄色素得以富集。实验室常用的薄层色谱，其原理是利用混和物中各组分在不相混溶的两相即流动相（展开剂）和固定相（吸附剂）中吸附和解吸的能力的不同，也可以说在两相中的分配不同，当混合物随流动相（展开剂）流过固定相（吸附剂）时，发生了反复多次的吸附和解吸的过程，从而使混合物分离成两种或多种单一的纯组分。：番茄酱、乙醇、石油醚、丙酮、饱和食盐水、无水硫酸钠、硅胶、CMC溶液圆底烧瓶、球形冷凝管、分液漏斗、锥形瓶、毛细管等在50 ml(或100 ml)圆底烧瓶中称取4 g克番茄酱（一勺子）,加入10 ml95%的乙醇,水浴加热回流3～5min。冷却后过滤（普通过滤），将滤纸和滤渣转移到烧瓶，再加10 ml的石油醚（60～90）饱和食盐水摇匀，分出有机层，加无水硫酸镁干燥。加热回流3min，过滤，合并两次的滤液，加5ml （1）制板将5g硅胶G（GF254）在搅拌下慢慢加入12ml0.5% 的羧甲基纤维素钠水溶液中，调成糊状，然后将其倒在洁净的玻璃片上，用手轻轻振动，使涂层均匀平整，晾干。标准：无纹路，无团粒，无可看到玻璃的薄的涂料点。（2）活化薄层板经自然晾干后，再放入烘箱活化，进一步除去水分。（3）点样用铅笔（最好用2B铅笔）在层析板上距末端1cm处轻轻画一横线，然后用毛细管吸取样液在横线上轻轻点样。若颜色浅，可重复点样，需前次样点挥发干后进行。样点直径不应超过2mm，否则易拖尾影响测定。样点间距在1～1.5cm为宜, 太近易重叠。（4）展开缸内壁贴一片环绕周长的滤纸，倒入展开剂，液面高度约 5mm。滤纸下面浸入展开剂中，以使层析缸被展开剂饱和。待样点干燥后，将层析板点样一段放入层析缸中，样点不得浸泡在展开剂中，盖好瓶盖。待展开剂上升至前沿约1cm处取出，迅速在展开剂最前沿处画一横线。晾干，量出展开剂和样点移动的距离。（5）计算比移值Rf 。 Rf =样点移动的距离/展开剂移动的距离对于一种化合物，当展开条件相同时Rf值是一个常数。Rf可用作定性分析的依据。１.展开剂的正确选择。２.画点样起点线时应尽量避免划破硅胶，且起点线离边缘的高度要大于展开瓶中的展开剂高度，以避免样点浸入展开剂。 3.开始展开后，则不能再移动展开瓶。 4.一根毛细管不能点多个样品。 5.从展开瓶中拿出的薄层板应迅速划好终点线，否则展开剂挥发不利于计算比移值。

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