1．目的
规范粪便标本涂片
标准
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操作规程。
2．适用范围
粪便标本。
3．检验步骤
3.1 革兰染色：取新鲜送检粪便的水样、脓血或黏液样部分涂片，经自然干燥或烘片机烘干，进行革兰染色。
3.2 悬滴法或压滴法检查：取患者粪便，用无菌生理盐水制成悬液标本或压滴标本，直接用高倍镜检查细菌、真菌或寄生虫的形态或运动状况。
3.3 粪便球杆菌比例：取水样便或粘液便直接滴在洁净载玻片一端，以30°~40°角匀速推片，厚薄适宜，自然干燥后在酒精灯火焰上通过3次固定，进行革兰染色。
3.4 镜检与结果报告
3.4.1 霍乱弧菌悬滴法检查：悬滴标本或压滴标本用高倍镜观察细菌，镜下呈穿梭状或鱼群状极活泼地运动，报告为“找到穿梭状或鱼群状活泼菌，疑似霍乱弧菌”。
3.4.2 霍乱弧菌涂片检查：油镜可见较小呈直杆状、弧状、香蕉状或逗点状呈鱼群状排列的阴性杆菌，报告为“找到革兰阴性弧形杆菌，疑似霍乱弧菌”。
3.4.3 球菌与杆菌的比例：涂片革兰染色后，在油镜下观察100个菌分别计算球菌与杆菌数量以求得其比例，报告“球菌/杆菌=X：X”。
3.5 真菌涂片检查：参见《真菌涂片标准操作规程》、《墨汁染色标准操作规程》。
3.6 抗酸染色：参见《抗酸染色标准操作规程》。
3.7 质控：每张涂片均做革兰阳性和阴性菌对照。
4．注意事项
4.1 涂片不要太厚，以免影响染色效果。
4.2 正常人粪便球杆菌比例范围一般约为1：10，不同年龄其比例不一样。长期使用广谱抗生素、免疫抑制剂及慢性消耗性疾病患者可发生肠道菌群失调，引起革兰阴性杆菌数量严重减少甚至消失，而葡萄球菌或真菌等明显增多，粪便中球菌/杆菌比值变大。
4.3 直接涂片镜检可见较小的直杆状、弧状、香蕉状或逗点状呈鱼群状排列的阴性杆菌，报告为“找到革兰阴性弧形杆菌，疑似霍乱弧菌”，并立即报告临床及医院行政管理部门，做好详细记录。
参考文献
[1] 中国合格评定国家认可委员会．CNAS-GL42医学实验室质量和能力认可
准则
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在临床微生物学检验领域的应用
说明
关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书
．2014.
[2] 周庭银编著．临床微生物学诊断与图解，第3版，上海：上海科学技术出版社,2012
[3] Versalovic J, Carroll KC, Funke G, et al. Manual of Clinical Microbiology. 10th ed. Washington: ASM Press, 2011.
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生效日期
姓 名：XX
编写日期:2011-05
姓 名：XXX
复审日期：2011-06
姓 名：XXX
批准日期：2011-06
2011-07
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