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合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究

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合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究 合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究 摘要:采用水蒸气蒸馏法提取合欢(albizzia jul ibrissin durazz.)花挥发油,并用气相色谱-质谱(gc-ms)法进行分析,利用滤纸片法进行抑菌试验。结果表明,合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,包括二十一烷(2 4.762%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.11 8%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用,其作用随浓度升高而增强。 关键词:...

合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究
合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究 摘要:采用水蒸气蒸馏法提取合欢(albizzia jul ibrissin durazz.)花挥发油,并用气相色谱-质谱(gc-ms)法进行分析,利用滤纸片法进行抑菌试验。结果 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,包括二十一烷(2 4.762%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.11 8%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用,其作用随浓度升高而增强。 关键词:合欢(albizzia julibrissin du razz.);挥发油;气相色谱-质谱联用;提取液;抑菌作用analysis of chemical component s in volatile oil and the antiba cterial activity of extracts f rom flower of albizzia julibri ssin wang yi-zhuo,luo hui,zhao shi-xian (marine college,shangdong uni versity at weihai,weihai26420 9,shangdong,china) abstract:the volatile oil from flower of albizzia julibrissin durazz. was extracted by steam distillation and analyzed by g as chromatography-mass spectr ometry.the antibacterial acti vity of extract was determined by the filter paper method.the results showed that16compoun ds were identified,including h eneicosane(24.762%),2-pentade canone,6,10,14-trimethyl(22.9 68%),octacosane(16.118%),tet racosane(8.438%)and hexadeca noic acid,methyl ester(6.689%); and the extracts showed inhibi tion against vibrio anguillaru m,v. harveyi,v. splendidus,v. g allicus and bacillus megateriu m.the inhibitory effects were strengthened with the increasi ng concentration of extract. key words:albizzia julibrissi n durazz.;volatile oil;gc-ms;e xtracting solution;antibacter ial activity 合欢花为豆科合欢属植物合欢(albizzia julibr issin durazz.)的干燥花序,是一种较为常见的中药,具有宁神作用,主要用于治疗心神不安、忧郁失眠[1]、郁结胸闷、活血消肿。药理研究 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 ,合欢花水提液具有明显的镇静、催眠[2]和抗抑郁[3]作用。本试验通过gc-ms法分析了水蒸气蒸馏法获得的合欢花挥发油挥发成分,并采用滤纸片法分析了提取液的体外抑菌效果,以期为合欢花在化工、食品添加剂以及抗菌药物等方面的开发应用提供参考。 1材料与 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 1.1主要试剂与材料 合欢花,产自江苏某地,鲜样自然阴干后,粉碎待用;牛肉膏蛋白胨培养基(牛肉膏3g,蛋白胨10g,氯化钠5g,琼脂1 8g,水1000ml,ph7.0~7.2),2216e 培养基(蛋白胨5g,酵母膏1g,硫酸亚铁0.01g,琼脂18g,陈海水1000ml,ph7.6~7.8);9 5%(体积分数,下同)分析纯乙醇。 1.2仪器 安捷伦7890-5975气相色谱-质谱联用仪(美国安捷伦科技公司);挥发油提取器;旋转蒸发仪;恒温培养箱等。 1.3菌种 巨大芽孢杆菌(bacillus megaterium)、鳗弧菌(vibrio anguillarum)、哈维氏弧菌(v. h arveyi)、灿烂弧菌(v. splendidus)、高卢弧菌(v. gallicus),由山东大学威海分校海洋学院微生物实验室提供。 1.4方法 1.4.1挥发油的提取[4,5]称取合欢花100.0g 于挥发油提取器中,加入900ml水,50℃下回流5h,所得挥发油于低温下保存,待测。 1.4.2气相色谱条件色谱柱为hp-5ms5%phe nyl methyl siloxane(30m×0.25m m×0.25μm)弹性石英毛细管柱,升温程序为:初温8 0℃,保持1min,以20℃/min升至180℃,保持5min,再以5℃/min升至260℃,保持5min,进样口温度为250℃,载气为氦气,柱前压为72kpa,进样量为1μl,流速为1.2ml/min。 1.4.3质谱条件离子源为ei源,离子源温度为230℃, 电子能量70ev,接口温度270℃,溶剂延迟时间5mi n,扫描质量范围为60~550amu。 1.4.4提取液的制备称取20g合欢花,置于圆底烧瓶中,加入200ml95%乙醇,50℃回流3h,过滤,收集滤液;滤渣加入150ml95%乙醇同条件提取2h,过滤,合并提取液,减压蒸发,获得提取液[6]。 1.4.5抑菌试验活化菌种后,用灭菌棉棒蘸取少量菌落在固体培养基上密集划线。用打孔器将滤纸打成直径为5mm的滤纸片,湿热灭菌后备用。然后用体积分数为95%的乙醇将合欢花提取液原液配成系列浓度,用镊子夹取滤纸片放入溶液中,浸泡2h 后置于固体培养基上。每个培养皿中等距离摆放3个滤纸片,每个供试菌种作3组平行,用95%乙醇作空白对照,放入培养箱中。巨大芽孢杆菌于37℃下倒置培养24h,鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌和高卢弧菌于28℃下倒置培养24h,测量抑菌圈直径,取平均值。 2结果与分析 2.1挥发油成分 对合欢花挥发油进行gc-ms分析,其总离子流见图1,共检测出18个峰,所得质谱经nist标准谱库数据系统分析处理,确定16种组分,按照面积归一法确定各组分的相对百分含量,结果见表1。 2.2抑菌试验 抑菌试验结果如图2所示,由图可知,合欢花乙醇提取液对5种供试菌均有抑制作用,且随着提取液浓度增加抑菌圈直径增大。当提取液浓度小于0.1mg/ml时,对灿烂弧菌和高卢弧菌的抑制作用较巨大芽孢杆菌、鳗弧菌和哈维氏弧菌明显;当提取液浓度大于0.10 mg/ml时,对鳗弧菌和哈维氏弧菌的作用有所提高;当提取液浓度大于0.25mg/ml时,对几种供试菌的抑制作用均明显增强。合欢花乙醇提取液对5种菌的抑制作用有所不同,对4种海洋弧菌的抑制作用明显强于巨大芽孢杆菌。 3讨论 从合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,其中含量较高的是二十一烷(24.726%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.1 18%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。在这16种组分中,2,6-二叔丁基对甲苯酚具有抗氧化性,可作为食品中的抗氧化剂[7],邻苯二甲酸二异丁酯是常用增塑剂[8],2,2′-亚甲基-双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)简称2246,是合成橡胶和石油产品中的常见抗氧添加剂[9,1 0]。 抑菌试验选取的菌株包括鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧 菌和巨大芽孢杆菌,既有革兰氏阴性菌又有革兰氏阳性菌,因此通过抑菌试验,可较为全面地评价合欢花提取物的抑菌作用。此外,鳗弧菌、哈维氏弧菌和灿烂弧菌是3种常见的海洋致病菌。鳗弧菌是一种对鱼类危害较大的病原菌,其流行范围广,在水产养殖中引起的危害也最大[11]。哈维氏弧菌和灿烂弧菌会导致鱼、虾、贝、刺参等染病,给水产养殖业造成损失[12-14]。长期以来,国内外均以化学农药或者兽药作为渔药药源,而多数药物不仅难以降解,还会在水产动物体内富集,因此对生态环境具有较大的负面影响。中草药的天然成分副作用小,且多数有较好的杀菌效果,可以作为新鱼药的药源进行开发。本结果表明,合欢花提取液对常见海洋致病菌均有较好的抑菌作用,将为合理开发和利用合欢花资源提供了科学依据和参考。 参考文献: [1]吕金顺,左国防,王缠定.合欢属植物的化学成分及药用价值研究[j].天水师范学院学报,2003,23(5):2 3-25. [2]单国存,石磊虹.合欢花与南蛇藤果实水煎剂镇静、催眠作用的比较[j].中药材,1989,12(5):36-37. [3]李作平,赵丁,任雷鸣,等.合欢花抗抑郁作用的药理实验研究初探[j].河北医科大学学报,2003,24(4): 214-216. [4]项昭保,陈海生,夏晨燕,等.木姜子挥发油的化学成分及抑菌活性研究[j].中成药,2008,30(10):15 14-1516. [5]徐琅,贾元超,龚祝南.一年蓬挥发油的气相色谱-质谱分析及体外抑菌活性研究[j].时珍国医国药,2009,2 0(5):1171-1172. [6]古丽扎尔·阿布都克依木,萨代提古丽·马合木提,拉孜古丽·买买提,等.红果龙葵茎和叶的抑菌作用研究[j].生物技术通讯,2010,21(4):555-557 [7]袁履冰,周宁章.叔丁酚类的性质、用途及合成[j].辽宁化工,1994,(6):8-14. [8]袁海婷.邻苯二甲酸二异丁酯及马来酸二异丁酯合成的研究[j].北京化工,1991,21(3):13-17. [9]张萍,杨清华,史翠花,等.抗氧剂2246在br生产中的应用[j].合成橡胶工业,1994,17(4):20 7-211. [10]张天永,池立峰,夏文娟,等.抗氧剂2246的合成研究[j].化学工业与 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 ,2009,26(1):19-2 2. [11]莫照兰.养殖牙鲆细菌性疾病调查及鳗弧菌致病性研究[r].青岛:中国科学院海洋研究所,2001. [12]覃映雪,池信才,苏永全,等.网箱养殖青石斑鱼的溃疡病病原[j].水产学报,2004,28(3):297-3 02. [13]王国良,金珊,薛良义.海水网箱鲈鱼皮肤溃烂病及其病原菌的研究[j].黄渤海海洋,2000,18(3):8 5-89. [14]张春云,王印庚,荣小军.养殖刺参腐皮综合征病原菌的分离与鉴定[j].水产学报,2006,30(1):118 -123.
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