advia2400-ALT测定

丙氨酸氨基转移酶（ALT）试验标准操作程序 Standard Operation Procedure of Alanine Aminotransferase（ALT）Test (Siemens Adiva 2400) 文件名 丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定     编制人 审核人 批准人 批准日期                 修改日期 签 字 修改日期 签 字                         复审日期 签 字 复审日期 签 字                                                                         1．目的    3 2．范围    3 3.术语    3 4.测定原理    3 4.1原理    3 4.2公式    3 5.试剂组成    3 5.1试剂盒：    3 5.1.1试剂成分以及浓度    3 5.1.2有效期    4 6.试剂校准及量值溯源    4 6.1校准步骤    4 6.2量值溯源体系图    4 7.参数设定    4 8.干扰性    5 9.方法学特性    5 9.1精密度    5 9.2 可分析范围：    6 9.3相关回归统计    6 10工作程序    6 10.1样本准备    6 10.2标本的拒收    6 10.4质量控制    6 10.5标本测定    7 10.6临床意义    7 11.生物参考区间    8 12安全性和注意事项    8 13.主要参考文献    8 1．目的 1.1主要用于定量测定血清或血浆中ALT的活性 1.2本程序用于操作的规范化 2．范围 2.1住院病人，门诊病人，体检人群 3.术语 3.1．丙氨酸氨基转移酶测定是基于Wroblewski and LaDue的工作 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 序，后经H.U. Bergmeyer改良的IFCC推荐的方法进行. 4.测定原理 4.1原理 丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化L-丙氨酸转氨基到a-酮戊二酸（a-KG），形成L-谷氨酸盐和丙酮酸盐在乳酸脱氢酶的作用下还原为乳酸盐，同时将NADH氧化为NAD+。光吸收的改变与ALT的活性成正比，采用双波长（340/410nm）速率法测定。 4.2公式 L-丙氨酸 +a-酮戊二酸    丙　酮酸盐 + L-谷氨酸盐 丙酮酸盐　+ 　NADH       乳酸盐 + NAD 5.试剂组成 5.1试剂盒： Siemens Advia 2400配套试剂 5.1.1试剂成分以及浓度 试剂 成分 浓度 试剂1 L-丙氨酸 610 mmol/L LDH（猪心脏） ≥ 1.2 KU/L 叠氮化纳 0.09% 试剂2 a-酮戊二酸 93 mmol/L NADH 1.41 mmol/L 叠氮化纳 0.09%       警告：该试剂含有动物来源的成份，防止病原携带及污染 注意：高浓度叠氮化纳易在铜或铅制管道内形成易爆品，在排放前大量用水进行稀释，按相关医疗废物排放标准进行排放， 5.1.2有效期 在2-8℃下保存，未开封的试剂盒上有效期内均有效。开封后在机稳定期为60天。 注意：试剂不可冷冻保存 6.试剂校准及量值溯源 校准是采用固定系统因子值（FV），该值是根据NADH在340nm的摩尔消光系数，同时结合IFCC参考方法病人结果进行修正。建议每天做RBL。 6.1校准步骤 6.1.1在操作面板上,按start→选择one-pnt.smp Analyze→选择Temp.item select→选择Temp.sample select→选择CTT位置→CTT01→Start运行。 6.1.2查看校准结果：在菜单面板上，点Calibration→View calibration curve→选择Test name→查看定标结果。 6.1.3校准结果的 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 ：校准完成后对BAbs、S1Abs、K值进行判断，是否符合其校准要求，比较K值变化，K值超过±2SD应重新校准，并记录校准情况及K值。符合〈生化组生化分析仪校准程序〉LAB-PF-028-03。 6.2量值溯源体系图 ALT 可溯源到IFCC 参考方法, 参考品为IFCC-454 并结合病人样本。 7.参数设定 8.干扰性 Advia 2400       干扰物 干扰物水平 ALT样本检测结果 干扰性 胆红素（结合/未结合） 25mg/dL 49 U/L 无显著干扰 溶血 500 mg/dL 49 U/L 无显著干扰 脂血 500 mg/dL 50 U/L 无显著干扰         在仪器Analytical Parameters (Serum) window设置窗口, 可以建立该系统的脂血（混浊度）、 溶血及黄疸指数。 干扰实验数据结果如下： 9.方法学特性 9.1精密度 Advia 2400           样本类型 水平( U/L) 批内 总变异 SD CV% SD CV% 血 25 0.6 2.3 0.9 3.7 尿 138 0.9 0.7 1.5 1.1             9.2 可分析范围： 0 U/L to 1100 U/L，采用仪器自动重检分析范围可高达6600 U/L。 9.3相关回归统计 10工作程序 10.1样本准备 常规空腹采血。在血清或血浆准备时，应避免血清和已分离的红细胞过长接触。见标本管理文件. 10.2标本的拒收 病人姓名、标本联号、病区、床号、ID号、住院号不符者拒收。抽血不足1mL标本，抽血不当导致标本被严重稀释等不符者按标本拒收程序文件执行。 10.3标本的储存和处理 报告发出后，标本存放于注明日期,标本类型,检验者放入冰箱保存3天,3天后按生物 安全管理 企业安全管理考核细则加油站安全管理机构环境和安全管理程序安全管理考核细则外来器械及植入物管理 程序处理。 警告：所有血液标本都应视为具有潜在的生物危害性，对于血液标本的处理应遵照本科室的生物安全防范的相关规定。 10.4质量控制 10.4.1质控品： 质控品与样品的性质类似，是监测仪器正常工作的必须品。因为样品可在有随机检测能力的仪器中随机检测而非批量检测，所以质控品应该包含在整个24小时的时间段内。质控品包括至少包括二个浓度值的配套质控品或替代质控品，按照厂家规定进行保存。在正式使用前均应建立各自的平均值和可接受范围。若质控结果超出了可接受变异范围，则根据您的Advia2400系统操作手册中列出的步骤进行排除或重新定标校准。 10.4.2 Siemens质控品，两个浓度水平。中值和高值 10.4.3质控标本测定 每天早晨标本上机前进行质控的测定。在冰冻室内取出配制分装好的质控（一次配制10天用的质控品，放入冰冻室）放置与室温相同。运行仪器，将QC1和QC2分别放Advia 2400生化仪样品架上相应设置位置，在样品菜单选择质控项目，开始测定。结果判断及失控处理：采用Westgard多规则质控法判断质控结果，观察质控图，若有失控，按失控处理程序纠正,参见010-MP-ProcIQC-C2001《生化室内质控程序》。完成后仪器将留下原始记录，并同时通过LIS传入电脑。质控结果没有落在可接收范围提示检验结果无效。如果失控将按生化组质量管理程序处理。质控结果的查看，在仪器上可看原始结果是否受控,F5-F7-F3。也可以在LIS系统中查看。 10.5标本测定 10.5.1标本编号及上样：将已离心贴好条码标本与申请单核对姓名、检验目的后编流水号，在LIS系统一般检验“信息处理”屏幕扫描登录病人信息，再将标本依次放入样品架上，注意条码位置应恰当,条码高度不高于样品架1厘米，标本如有纤维蛋白应重新离心。 10.5.2.测定项目选择： 仪器使用条码系统，放入样本盘后，不需输入检验项目点START即可测定；如条码不能识别，在Request→Order Entry→Order no. →Posi. No. →Tray cup→Samp. No. 处输入标本位置及样品号，点start开始测定。 10.5.3结果处理： a) 结果传输：测定完成后，仪器自动将结果传输到LIS系统，若传输出现故障，可手动传输，在Request→Review/Edit→Host transfer屏幕选择传输标本号→Execute。 b）报告审核及发放： ――病人信息核对：报告审核人核对病人信息及检测项目，对不符合处及时确认后更正。 ――历史结果回顾：对照病人以前结果及临床诊断，如有不符，应及时查找原因，直到问题解决后才能进行审核发出报告，参见010-MP-ChecRep -C《报告审核程序》。 ――完成审核：报告审核人对上述核查无误后，点审核，报告即可发出。 c)报告时间： 4小时以后。 10.6临床意义 10.6.1 10.6.2 11.生物参考区间 本室：                      U/L (37℃) 试剂厂家推荐生物参考值范围： 10-49 U/L (37℃) 11.1本室选取临床相对正常的病人（无肝脏疾病） 人，测定ALT，其中99.0%的结果为U/L,超出厂家推荐的生物参考范围。 12安全性和注意事项 12.1该仪器在出现特殊故障时会向操作者报告出错信息，详见Dimension系统操作手册。 12.2使用过的比色杯带有人体体液，需要进行适当的处理以避免皮肤接触和感染。 13.主要参考文献 13.1临床检验操作规 010-ES-2400 Ope-C4028《 Advia 2400分析仪操作程序》 010-MP-CaliPro-C4014《生化分析仪校准程序》 010-MP-ProcIQC-C2001《生化室内质控程序》 010-MP-ProcEQA-C2002《生化室间质评程序》 010-MP-ChekRep-C1103《报告审核程序》 010-TS-VemiUpp-S3001《上肢静脉血标本采集操作程序》 010-TS-GoiStor-S3023《标本出入库程序》 13.2参考文献 1. International Federation of Clinical Chemistry, Committee on Reference Systems for Enzymes, Chem Clin Lab Med 2002; 40 (7):718–724. 2. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 3rd ed. Washington: AACC Press (1990). 3. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2004. NCCLS Document EP05-A2.