【doc】 HPLC法测定当归南枣颗粒中阿魏酸的含量

【doc】 HPLC法测定当归南枣颗粒中阿魏酸的含量 HPLC法测定当归南枣颗粒中阿魏酸的含 量 第21卷第5期 2005年10月 广东药学院 JOURNALOFGUANGDONGCOLLEGEOFPHARMACY V01.21No.5 Oct.2005 HPLC法测定当归南枣颗粒中阿魏酸的含量 张晓婷,饶莉忠(广州星群(药业)股份有限公司,广东广州510288) 摘要:目的建立”-3归南枣颗粒中阿魏酸的HPLC方法.方法采用HPLC法,选用Cis柱,以甲醇一l%()乙酸(体积比30:70)为流动相, 检测波长320nm.结果阿魏酸在3.5,2lg/mL范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系,回归方程:Y=84300p+71480,r=0.9998,平 均回收率为99.16%,RSD=1.29%(n=5).结论本方法简便,准确,.-j-~于”-3归南枣颗粒的质量控制. 关键词:HPLC;阿魏酸;当归南枣颗粒 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1006—8783(2005)05—0524—02 DeterminationofferulicacidinDangguiNanzaogranulesbyHPLC ZHANGXiao?ting,RAOLi—zhong(GuangzhouXingqunPharmaceuticalCO.,Ltd.,Guangzhou510288,China) Abstract:ObjectiveToestablishamethodforquantificationofferulieacidinDangguiNanzaogranulesbyHPLC.MethodsHPLC chromatographywasconductedwithaC18column(4.6mm×150mm,5m),methanol一1%aceticacid(30:70)asamobilephase, flowrateat1,0mL/min,UVdetectionat320rim,andthecolumntemperatureat30?.ResultsFerulicacidshoweda璺oodlinear correlationintherangeof3.5, 2lg/mL,r=0.9998,withtheaveragerecoverywas99.16%andRSDwas1.29%(n=5). ConclusionFhemethodissimple,accurateandreliable. Keywords:HPLC;ferulieacid;DangguiNanzaogranules 当归南枣颗粒是由当归,大枣,何首乌3味中药制 成,具有补血活血,调经止痛的功效.用于血虚,月经 不调,痛经,月经期症候群所引起的头痛,呕吐,失眠, 肋痛及习惯性便秘等症,其现行标准收载于卫生部药 品标准中药成方制剂第十二册,但只有理化鉴别和当 归薄层鉴别,为提高检测手段,更有效地控制产品的内 在质量,本文采用HPLC法对阿魏酸进行含量测定,取 得满意的结果,报道如下. 1仪器与试药 1.1仪器 Water高效液相色谱仪:1525高压泵,2487检测 器,Breeze色谱工作站. 1.2试药 阿魏酸(中国药品生物制品检定所,批号0773— 9809),当归南枣颗粒(广州星群(药业)股份有限公 司,批号:BA90001,BA90002,BA90003),阿魏酸阴性对 照颗粒(广州星群(药业)股份有限公司),甲醇 (Lichrosolv,MerkKgaA)为色谱纯,水为重蒸馏水,其他 试剂均为分析纯. 作者简介:张晓婷(1970一),女,制药工程师,主要从事药品 质量控制. 524 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:Lichrospher5-Cl8(4.6mmx150mill,5 m),流动相:甲醇-1%()乙酸(体积比30:70),流速: 1.0mL/min,检测波长:320nm,柱温:30qC,进样量:20 .理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于2000. 2.2对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品适量,加甲醇溶解,稀释, 摇匀,制成每1mL含20g的溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备 取本品研细,精密称取0.5g,置具塞锥形瓶中,用 甲醇-乙酸乙酯(体积比95:5)50mL,超声处理30min 使溶解,过滤,用甲醇-乙酸乙酯(体积比95:5)适量洗 涤容器及残渣,合并滤液和洗液,置蒸发皿中,水浴蒸 干,残渣加水30mL溶解,洗涤,移置分液漏斗中,用乙 酸乙酯(25,20,20,10mL)萃取4次,合并提取液,水浴 蒸干,残渣加甲醇溶解,并定容于5mL量瓶中,摇匀, 滤过(0.45m),即得. 2.4线性关系考察 精密称取阿魏酸对照品适量,加甲醇溶解,稀释, 摇匀,制成每1mL含21g的溶液,分别精密量取适 量,加甲醇稀释制成每1mL含阿魏酸3.5,7,10.5,14, 第5期张晓婷,等.HPLC法测定当归南枣颗粒中阿魏酸的含量 17.5,21g/mL的溶液,按上述色谱条件,分别以20 L进样,记录峰面积,以峰面积(A)对质量浓度(P)作 线性回归,得回归方程为A=84300p+71480,r: 0.9998. 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明阿魏酸在3.5,21g/mL范围内,质量 浓度与峰面积呈良好的线性关系. 2.5精密度试验 取对照品溶液,按上述色谱条件,以20进样, 记录峰面积,重复进样5次,结果:阿魏酸平均峰面积 为1838600,RSD=0.71%(n=5). 2.6稳定性试验 取供试品溶液,按上述色谱条件,以20进样, 记录峰面积,每隔1h进样1次,共进样6次,RSD为 1.4%(/’t=6),表明供试品溶液在6h内基本稳定. 2.7加样回收率试验 取已知含量供试品(批号:BA90003)0.25g,精密 称定,精密加入一定量的阿魏酸对照品,按供试品溶液 制备项下的方法制备,依样品测定项下的方法测定,计 算回收率,结果见表1. 2.8样品测定 3讨论 510152025 t/min 分别取对照品溶液和供试品溶液,按上述色谱条 件,分别以20进样,记录峰面积,以外标法计算供 试品中阿魏酸的含量.结果见表2,色谱图见图1. 表1加样回收率试验结果 Tab.1Recoverytestresetofferulicacid 表2样品含量测定结果(n=3) Tab.2Assyingresultsofsamples B h一^,\ 510152025 t/min A阿魏酸对照品;B样品;C阴性刘照 图1HPLC图谱 Fig.1HPLCchromatogram 3.1阿魏酸是弱酸,用弱酸性流动相可抑制其电离, 使峰型稳定分离度好,本文对多组流动相系统如不同 比例的甲醇.水系统,甲醇.不同浓度的乙酸系统等进 行了试验比较,最后选用甲醇.1%乙酸(体积比30:70) 为流动相. 3.2当归为当归南枣颗粒的主药,而阿魏酸又为当归 有效成分之一.,因此,本文选取阿魏酸作为本品的 含量测定指标之一.本文参考有关文献[4,5],对阿魏 酸的提取方法进行了实验比较,最后采用甲醇.乙酸乙 酯(体积比95:5)为溶剂提取阿魏酸,用乙酸乙酯除去 其他杂质.结果表明本法简便,准确,可用于当归南枣 颗粒的质量控制. 510152025 t/min (致谢:本文承广东省食品药品监督管理局审评认 证中心魏雪芳副主任药师审核,特此感谢) 参考文献: [1]郭磊.镇咳药物的研究进展[J],国外医学:制剂,合成,生化 分册,2000,21(1):9. [2]USPXXII[Z].1996.406. [3]王克祥,范秋霞,窦万有.HPLC测定新生化冲剂中阿魏酸的 含量[J].中成药,2003,25(10):855. [4]潘瑞乐,陈迪华,沈连刚,等.高效液相色谱法测定中药升麻 中阿魏酸和异阿魏酸的含量[J].药物分析杂志,2000,20 (6):396. [5]苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京:人 民卫生出版社.2000.398. (收稿日期:2005—05—17) 525