天南星_虎掌南星_生_制品毒性比较研究

天南星_虎掌南星_生_制品毒性比较研究 () 天南星 虎掌南星生 、制品毒性比较研究 吴连英 程丽萍 毛淑杰 王孝涛 ()中国中医研究院中药研究所 北京 100700 天南星原名虎掌 ,是天南星常用品种及现1 . 3 . 3 冷浸液 ( 今出口药材主要品种之一 ,商品统称为天南星 。 取定量的天南星生 、制品粉末 过 60 目 ) () 因生品有强烈刺激性 ,国家药典规定供内服需 筛,加 3 . 5 倍蒸馏水在室温 16,17 ?下浸渍 用炮制品 。现行的炮制工艺各地不统一 ,一药48 h 后 ,以 3000r/ min 离心 20 min ,取上清液 ,低多法 ,缺乏统一的制品质量标准 。我们在文献 温挥去部分水分 , 制成 1 ml 相当生药 1 . 0g , 供 研究及炮制生产现况调查的基础上 ,对其炮制 小鼠腹膜刺激实验用 。 工艺做了改进试制 ,并通过了中试验证 。 1 . 4 实验动物 为了进一步探讨新工艺制品是否达到了老 Wistar 种大白鼠 ,昆明种小白鼠 ,大耳白家 工艺制品相同的“制毒”效果 ,在当前其毒性成 兔 ,由中国中医研究院实验动物中心提供 。 分尚不清楚的条件下 ,选用了毒性和刺激性等 2 实验方法和结果 药理指标 ,对天南星生品及新 、老制品进行了比 2 . 1 急性毒性实验 2 . 1 . 1 天南星生、制品混悬液对小鼠死亡率的 较研究 。 影响 1 实验材料 ( ) ( 1 . 1 原材料取体重 20 ?2g 小白鼠 , 禁食 16 h 不禁 ) 产自河南 ,购自河南禹县药材公司 。经王 水,按体重随机分组 ,生品组 20 只 ,新 、老法制 孝涛研究员鉴 定 系 天 南 星 科 植 物 掌 叶 半 夏 品组各 10 只 ,雌雄各半 。分别以最高浓度 、最 大容量的生 、制品混悬液 12g/ kg ,一次灌胃 ,观 Pi nel l i a ped at isect a Schot t 的干燥块茎 。 1 . 2 炮制品 姜、矾煮制品按《中国药典》天南察 7 天 。结果除生品组有 15 %小鼠死亡外 ,新 ( ) 星炮制项 法?, ?老法制品均未见有小鼠死亡和明显 1 ( ) 下制作 下简称老法。矾制品为改进的新毒性反应 。表明一次给药无法测出 L D,故采 50 () 法 下简称新法 ?、新法 ?。文章待发表。 用多次给药测定最大耐受量 。 1 . 3 实验样品制备 方法与制剂同上 。每组小鼠 20 只 ,雌雄各 1 . 3 . 1 混悬液 ( ) 半 。生品低剂量组总剂量为 10g/ kg?d,生品 ( ) 天南星生品 原生药, 新 、老法制品粉末 ( 高剂量组和新 、老法制品组总剂量为 36g/ kg?() 过 100 目筛,供毒性实验用 。上述样品粉碎 , ) d,均分作 3 次灌胃 , 每次间隔 4 h , 观察 7 天过 200 目筛 ,实验前用蒸馏水配制成所需浓度 , 结果生品低剂量组未见有小鼠死亡 ,个别小鼠 供家兔点眼实验用 。 活动减少 , 生品高剂量组有 60 %小鼠死亡 , 而 1 . 3 . 2 水煎剂( ) 新法 ?, ?、老法制品组均未见有死亡 ,存活 取一定量的天南星生品 , 新 、老法制品饮 的小鼠未见异常 , 体重均较药前增加 6 ,9g 片 , 加 6 倍蒸馏水浸泡 1 h 后 , 煎沸 40 min , 过 ( ( ) 表明生品最大耐受量为 10g/ kg?d,新法 ?, 滤 ,药渣加 5 倍蒸馏水再煎沸 40 min ,过滤 ,合 ) ( ) ?、老法制品在 36g/ kg?d以上 ,制品毒性比 并滤液 , 水浴浓缩至 1 ml 相当于生药0 . 5g , 备 生品明显降低 。 用 。 2 . 1 . 2 天南星生、制品水煎剂对小鼠死亡率的 影响日灌胃 1 次 ,连续 28 天 。每隔 5 天称量一次体 5 组 ,每组 10 只 ,给药重 ,并按体重调整给药剂量 。服药 28 天后停食 方法同上 。实验分 ( ( ) 组水煎剂总剂量为 120g/ kg?d, 对照组给淀 一宿 , 眼 眶 静 脉 取 血 , 测 定 外 周 血 像 RBC , ) ( ) ( ) 粉悬液总剂量为 60g/ kg ?d, 均分作 3 次灌 WBC 及 Hb 含量, 肝功能 AL T , 金氏法, 肾 () 功能 B U N ,二乙酰一肟法。停药后第二天解 胃 ,观察 7 天 。结果给药组和对照组一样 ,均未 见有小鼠死亡和异常表现 ,各组小鼠体重量较 剖大鼠 ,取心 、肝 、脾 、肺 、肾等主要脏器 ,作病理 药前增加 9 ,10g 。表明煎剂的毒性比混悬液 组织学检查 ,观察对上述指标的影响 。 毒性大大降低 。 2 . 2 . 1 对大鼠体重的影响 服药后各组大鼠体 重均较前增加 ,其中新 2 . 2 亚急性毒性实验 ( ) 取体重量 100,150g 大白鼠 60 只 ,雌雄兼 法?, ?和老法制品组明显高于生品两个剂 用 ,分 6 组 ,每组 10 只 ,天南星生品低剂量组以 量组 ,与对照组比无明显差异 ,新 、老法制品组 ( ) ( ) 2 . 5g/ kg?d,其高剂量组和新法 ?, ?、老法 比亦无差异 。见表 1 。 ( ) 制品以 5g/ kg?d,对照组给等容积常水 ,均每 表 1 天南星生 、制品对大鼠体重的影响 药后不同时间体重增加值 g 剂 量药前体重 组别( )g/ kg?d 5d 10d 15d 20d 27d g 1) 1)2)2)2) 对照组121 . 39 ?12 . 44?6 . 8356 . 59 ?13 . 16 97 . 06 ?5 . 75?15 . 93 ?16 . 9230 . 81 97 . 26 139 . 54 2) 2)3)3)3)118 . 08 ?9 . 68 20 . 83 ?10 . 8220 . 02 ?26 . 44 60 . 69 ?26 . 41 72 . 79 ?30 . 71 101 . 67 ?30 . 83 2 . 5 4) 6)6)6)6)115 . 96 ?11 . 61 12 . 42 ?15 . 0217 . 52 ?22 . 00 34 . 11 ?23 . 62 44 . 05 ?20 . 30 61 . 43 ?22 . 48 生品5 6)6)6)122 . 75 ?8 . 61 83 . 67 ?15 . 31 95 . 68 ?15 . 34 129 . 30 ?16 . 67 5)6)新法 ? 5 23 . 55 ?9 . 08?10 . 83 53 . 49 1 ,6)6)6)120 . 89 ?8 . 16 85 . 99 ?8 . 35 87 . 23 ?8 . 03 112 . 63 ?21 . 91 1)6)27 . 81 ?6 . 42 56 . 12 ?5 . 85 新法 ? 5 122 . 97 ?9 . 58 81 . 86 ?12 . 24 96 . 49 ?12 . 65 120 . 92 ?14 . 26 24 . 85 ?5 . 76 52 . 45 ?12 . 93 老法 5 )) ) 5 1) 2) 34 注 : ?n = 10?x ?s ?与对照组比较 P < 0 . 05 P < 0 . 01P < 0 . 001 ?与生品组比较 P < 0 . 05 P < 0 . 01) 6P < 0 . 001 2 . 2 . 2 对大鼠血像及肝胃功能的影响兔 ,给药眼分别滴入 0 . 2 ml 的 5 %和 10 %的生服药 28 天后 ,各组大鼠的 RBC , WBC , Hb ( ) 品混悬液和 2 %新法 ?, ?、老法制品混悬 ( ) 及血 清 谷 丙 转 氨 酶 S GP T 、血 清 尿 素 氮 液 ,对照眼滴等容积淀粉混悬液 。2 min 后立即 () B U N等生理生化指标 ,均在正常生理范围内 用 40 ml 生理盐水冲去药液 ,观察 3 h 内兔眼结 波动 ,组间比较未见显著差异 。 膜出现水肿反应只数和反应强度 。结果生品两 2 . 2 . 3 对大鼠主要脏器的影响 病理组织学检 个剂量组均在滴药 1 h 内出现明显的水肿反应 ,查结果 ,老法和新法 ?制品 ( 水肿率为 100 % , 水肿强度为“ 7 ”即上 、下眼 组各见 1 只大鼠的肝细胞有点状和灶性坏死 ,) 结膜全部水肿 , 眼睑外翻至少持续 2 h 以上 。 生品大剂量组见有 2 只大鼠的肝细胞有浊肿 ,( ) 而新法 ?, ?、老法制品组 3 h 内 ,未见有水肿其余各组未见异常 。各组各动物其他主要脏器 反应 。表明新 、老法制品刺激作用较生品明显 均属正常 。个别大鼠肺部有轻度间质性肺炎 , 减弱或消失 。新 、老制品减弱程度相近 。见表 可能与粉末灌胃给药有关 。 2 。 2 . 3 刺激性实验 2 . 3 . 2 对小鼠腹膜刺激作用比较2 . 3 . 1 对家兔眼结膜刺激作用比较 参考文献 体重 17,22g 小白鼠 ,雌雄兼用 。实验组 2 方法取体重量 2,3 kg 健康家 分别给予生 、制品冷浸液以 1 . 25g/ kg 和 2 . 5g/ 中国中药杂志 1997 年第 22 卷第 2 期?91 ? kg 剂量 ,对照组给等容积蒸馏水 , 均为一次腹3 讨论与小结 腔注射 ,观察 30 min 内小鼠发生扭体反应只数 天南星为毒性中药 ,生品对口腔 、咽喉及皮 ( ) 和次数 。结果新法 ?, ?、老法制品组小鼠发 肤有很强的刺激性 。我们采用粉末为主对天南 生扭体反用只数均较生品有明显和不同程度的 星生 、制品的毒性和刺激性进行研究 。结果表 减少 , 其中以新法 ?为明显 , 其扭体次数新法 明 ,其生品可使兔眼结膜出现明显的水肿反应 ( ) ?, ?制品明显低于生品和老法制品 ,老法制 和小鼠腹膜刺激引起的扭体反应 ,而炮制后的 品和生品差异不明显 。见表 3 。 新法和老法制品一样 ,刺激作用明显降低 。 天南星混悬液以最大剂量一次灌胃 ,仅生 表 2 天南星 、生制品混悬液品有一定的毒性反应 ,受药物浓度和给药容积 对兔眼结膜刺激作用比较 限制 ,无法测出 L D。24 h 内灌胃 3 次 ,生品最 50 3 小时内水肿反应数 ( ) 剂量水肿率大的耐受量为 10g/ kg?d,新 、老制品在 36g/ 组别滴眼数g/ 眼 % - + 6 7 ) ( kg?d以上 。生品混悬液大 、小剂量组连续服 0 . 04 10 10 0 0 0 淀粉液0 药 4 周 ,于药后 5 天起其体重增加值明显低于 1)生品 生 0 . 01 5 0 0 0 5 100 对照组和新 、老制品组 。 品 新法 1)0 . 02 5 0 0 0 5 100 上述研究表明 ,天南星生品确有明显的毒 ? 新法 )2 0 . 04 10 10 0 0 0 0 性和刺激性 ,改进新工艺制品和老工艺制品一 ? )2 0 . 04 10 10 0 0 0 0 样 ,毒性和刺激性明显降低或消除 ,新工艺制品 老法 )2 0 . 04 10 10 0 0 0 达到了老工艺制品相同的“制毒”效果 。亦说明 0 1) 炮制是有其科学内含的 。 注 : ?与对照组比较 P < 0 . 001?与生品组比较 2) P < 0 . 001 天南星入药 ,尤其是入丸 、散时要求采用炮 制品 ,以保证临床用药的安全 。本实验病理组 表 3 天南星生 、制品冷浸液织学检查中 ,发现个别大鼠肝脏有病变 ,提示临 对小鼠腹膜刺激作用比较 3 床以粉末丸 、散时剂量不宜过大 。文献要求 剂量天南星入丸散剂量为 1,5 分 ,是妥当的 。 组别动物数扭体数扭体次数g/ kg 天南星生 、制品水煎剂 , 日总剂量 120g/ 10 0 对照组0 ?0kg ,各组均未见有明显毒性反应 ,提示天南星毒 8 . 30 ?6 . 02 生品 新1 . 25 10 9 性成分可能难溶或不溶于热水 。 3)0 ?0 法 ? 1 . 25 9 0 有报道天南星 A rsae consa n g ui neu m 刺激 1) 2 . 89 ?3 . 954 新法 ? 1 . 25 9 5 成分为强心甙类。本课题研究的品种虎掌 4)5 . 50 ?6 . 99 老法 1 . 25 10 7 南星 ,经预试未见有强心甙反应 。天南星的毒 对照组15 1 0 . 33 ?1 . 29性成分或刺激性成分目前尚不清楚 ,有待进一 生品 14 . 07 ?13 . 03 15 13 2 . 5 步研究 。 2)新法 ? 1 . 20 ?3 . 36 2 . 5 15 4 4 参考文献2) 新法 ? 3 . 60 ?6 . 57 中国药典 1 一部. 1990 :47 1 2 . 5 15 9 5)陈奇. 中药药理实验. 贵阳 :贵州人民出版社 ,1988 : 10 . 27 ?11 . 76 老法 2 2 . 5 15 11 35 1) 2) 陕西中医学院方剂教研室. 中药方剂简编. 西安 :陕西 ?与生品组比较P < 0 . 05 P < 0 . 01 注 : ?x ?s3 人民出版社 ,1974 :38 3) 4) 5) P < 0 . 001 ?与新法 ?制品组比较 P < 0 . 05P < ( ) 毛维伦等. 中草药 ,1988 ;19 12:16 0 . 01 4 1995 —08 —28 收稿