[整理版]芦荟大黄素的研究停顿况金金论文

[整理版]芦荟大黄素的研究停顿况金金论文 1 引言 芦荟大黄素(AE)是蓼科植物掌叶大黄的根和块茎中含有的一种活性成分,也是 [1]芦荟中含有的重要的药理成分羟基蒽醌衍生物中的一种。其作为中药中的一种重要的活性成分，已经发现了很多的药理作用，对诱导癌细胞凋亡，与DNA作用、对免疫细胞的增殖都有一定的作用。人们对它的研究已经从分离提取等方法的研究逐步上升到在医学领域的应用作用。本文就近些年有关芦荟大黄素的提取方法、测定方法以及其应用进行了简单综述。 2 芦荟大黄素的性质 芦荟大黄素的分子式CHO，分子量270.2 ，结构式如图1，其为橙色针状结15105 晶(甲苯中), 或土黄色结晶粉末。 熔点223,224?，易升华。可溶于乙醛、苯、热乙醇、稀氨水、碳酸钠和氢氧化钠水溶液。在乙醚及苯中呈黄色, 氨水及硫酸中呈绯红色。在酸性溶液中被还原则生成蒽酚及其互变异构体的蒽酮。 图1 芦荟大黄素的化学结构式 Fig1 Chemical structure of aloeemodin 3 芦荟大黄素的提取方法 3.1一般萃取 [2]陈伟等以无水乙醇为萃取剂，从芦荟叶片和渗出汁液中提取芦荟大黄素。把熟库拉索芦荟叶片切割成10片，清洗干净后，收集渗出来的汁液，水浴加热蒸干，得到黄色的芦荟大黄素的粗产品，把产品放置在烧杯中，每次用5ml的无水乙醇提取4次，过滤，即可得到芦荟大黄素。 3.2超临界CO流体萃取 2 [3]卢智等采用最常用的等温降压技术，在此过程中，芦荟萃取物和夹带剂随CO流出萃取釜，然后流入低压的分离釜。压力降到二氧化碳临界压力以下时，2 会极大地降低芦荟大黄素在CO的溶解度，最后芦荟大黄素和夹带剂会被留在2 分离釜中，进而达到分离提取的目的。 3.3 微波辅助萃取 [4] 马稳等利用微波辅助正交实验法研究芦荟中芦荟大黄素的最佳提取工艺，考 察微波辐射功率、乙醇浓度、料液比及辐射时间等单因素对提取率的影响，进行正交实验。结果表明微波辅助萃取使得芦荟大黄素的提取率为1.25%，与传统醇提法相比，该法省时、提取率高。 4 测定方法 4.1高效液相色谱法 [5]薛小平等利用HPLC法对自制的清热解毒方流侵膏的芦荟大黄素的含量进行了测定，结果表明该方法简便可靠，重复性好，可以为质量控制提供参考依据。 [6]杨文远等用反相高效液相色谱法分离并测定了决明子中芦荟大黄素和大黄素, 建立了该中药中芦荟大黄素、大黄素分离、测定的色谱方法。分析表明, 各地决明子中均含有相当量的芦荟大黄素和大黄素, 不同样品之间含量有一定差别, 有的甚至差别较大, 但总体水平有一定规律性。 4.2 毛细管区带电泳法 [7]王德先等建立了毛细管区带电泳测定中药芦荟中的有效成分芦荟甙和芦荟大 - 1 - 1黄素的分析方法。定量分析表明 ,芦荟甙的质量浓度为 0 .0 2 9g. L, 1. 0 0 g. L时，其峰面积与质量浓度呈线性关系 (r =0 .997);芦荟大黄素的质量浓度为 5.4mg/L, 8.4mg/L时，其峰面积与质量浓度呈线性关系 (r =0 .999)。 4.3 荧光光度法 [8] 齐登福等利用荧光光度法研究确定了测定芦荟大黄素的适用条件。在λ/ ex - 1 = 470/ 540nm，pH = 7. 0的实验条件下，测定的线性范围为1.0,8.1μg. mL ,em -1检测限为0. 031μg. mL，方法精密度为2. 18 % ，并成功地测定了样品决明子、血清和尿样中芦荟大黄素的含量。 4.4分光光度法 [9] 杜永峰等建立了纯化大黄素的新方法，并改进了分光光度法测定大黄素含量的方法。测定结果准确、设备简单、成本低廉、实用性强，适合大批量样品的测试。 4.5电化学方法 [10] 邹洪等用单扫示波极谱法研究了芦荟大黄素的电化学行为。研究了芦荟大黄素在水溶液中的电化学行为, 提出了电极反应机理, 建立了芦荟大黄素的单扫示波极谱分析方法, 测定了中药大黄中的芦荟大黄素的含量, 结果良好。另 T外, 还考察了芦荟大黄素对O的清除作用。 2 [11]林新华等芦荟大黄素在以0. 1 mol/ L HAc (pH =2.89) 为支持电解质，玻碳电极为工作电极的吸附伏安行为.结果表明芦荟大黄素存在一个准可逆的双电子转移过程,其峰电流I 和峰电位E与溶液pH 值有关. 同时还建立了用1.5阶pp 该法用于含有芦荟大黄素体系的测定，微分阳极溶出伏安法测定含量的新方法. 具有简便、快速、准确等优点.可用于不同品种芦荟中芦荟大黄素的直接测定。 4 芦荟大黄素的作用 5.1芦荟大黄素诱导肿瘤细胞的凋亡 [12]Lee等报道芦荟大黄素能诱导肺癌细胞株CH发生凋亡，用不同浓度27 的AE作用于肿瘤细胞，会发现剂量-时间依赖性的抑制关系，同时发现这种抑 [13]制作用在AE的浓度为50um时效果最显著。在AE诱导肿瘤细胞凋亡研究中，酶的参与是一个重要因素，但怎样具体诱导肿瘤细胞的凋亡的过程还在进一步的研究当中。 5.2芦荟大黄素清除氧自由基 2-芦荟大黄素含有多个酚羟基蒽醌类化合物，蒽醌类化合物具有对O的清除作用是通过自身含有的酚羟基基团与超氧阴离子发生了单电子转移所致。研究 2-表明芦荟大黄素对O、和?OH均与很强的清除能力，抑制的效果随浓度的增大 [14]而增强。?OH的清除率是反映了药物抗氧化性的重要指标。 5.3芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖的影响 T淋巴细胞在抗原或者在有丝分裂原的刺激下活化和增殖是人机体非常重 [15]要的免疫反应，研究发现芦荟大黄素可以影响巨噬细胞分泌细胞因子。芦荟大黄素可以阻断PHA引起的淋巴细胞升高，且与药物的剂量有关，因为淋巴细胞的钙离子的升高，会使细胞外的钙离子内流，进而会使芦荟大黄素对此有抑制作用。 5.4关于芦荟大黄素其他方面的研究 关于芦荟大黄素的研究是多方面的，不只限于有益的方面，科学家也同时 [16]注意到芦荟大黄素的毒性方面的研究。Mueller等通过芦荟大黄素作用于淋巴瘤细胞，发现芦荟大黄素能诱导细胞的DNA发生损伤，损伤作用是通过抑制一 [17]种酶实现的。这也可能是蒽醌类衍生物毒性和诱导作用的原因。Wolfle等将 几种羟基蒽醌类衍生物作用于小鼠的原代肝细胞，发现这些物质对肝细胞恶性转化有影响，芦荟大黄素对诱导肝细胞遗传物质的合成有提升作用。这个发现也表明某些蒽醌类衍生物在生物体内的致癌作用也许和肿瘤的发生有一些关系[18]。 6 展望 近些年来，关于芦荟大黄素(AE)已经从药学、医学以及临床疗效研究的宏观领域延伸到了一个更广泛、更深入的分子生物学(比如与蛋白质、DNA的作用)的微观领域。加大AE在人体内外的药理作用，将会有助于AE发挥更大的生物学的用途，更广泛的运用到医学临床领域，攻克医学难题，更好的造福人类。 参考文献 [1]Yang F, Zhang T, Ting G, et al. Preativev isolation and purification of hydr -oxyanthraquinones from Rheum officinale Baill by high-speed counter chromatography using pH-modulated stepwise eution.J Chromatogr A,1999,858(1):103-107. [2]陈伟, 林新华, 黄丽英, 等.芦荟甙和芦荟大黄素的提取和同时测定，福建分析测试,2002, 11(1):1512-1514. [3]卢智. 超临界CO流体萃取芦荟大黄素的研究. 食品工程, 2011,(1):36-38.2 [4]马稳, 李鸿雁. 微波辅助提取芦荟大黄素工艺的研究. 食品工业科技，2009,(7):254-256. [5]薛小平, 鹿燕敏, 王倩, 等. HPLC法测定清热解毒方中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素及大黄素甲醚的含量. 中国实验方剂学杂志, 2009, 15(7):6-8. [6]杨文远, 王天勇. 反相高效液相色谱法同时测定决明子中芦荟大黄素和大黄素. 分析试验室,1997,16(2):55-57. [7]王德先, 杨更亮, 王琳颖, 等. 毛细管区带电泳测定芦荟中的有效成分. 色谱, 2000, 18(5):423-425. [8]齐登福. 荧光光度法测定中药芦荟大黄素. 山东工程学院学报，2002,16(2):5-8. [9]杜永峰, 许丽梅, 姚秉华. 分光光度法测定大黄中大黄素的含量, 化学分析计量. 2001, 16(6) :43-45. [10]邹洪, 袁倬斌. 芦荟大黄素的电化学研究. 分析测试学报,1997,16(6):61-63. [11]林新华,黄丽英,陈伟,等.芦荟大黄素1.5阶微分阳极溶出伏安法测定及电化学性质研究. 电化学,2001,7(4):487-493. [12] Lee HZ ,Hsu SL, Liu MC,et al. Effects and mechanisms of aloe-emodin on cell death in human lung squamous cell carcinoma. European Journal of Pharmacology,2001,431:287-295. [13]史朋,段开文. 芦荟大黄素诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展.口腔材料器械杂志, 2006,15(4):217-219. [14]黄丽英, 林新华, 陈伟, 等. 芦荟大黄素、芦荟素清除自由基作用的研究. 中国医院药 学杂志, 2006, 26(1):12-14. 2+[15]李臣宇,李新,李丽军,等. 芦荟大黄素对T淋巴细胞增殖和细胞[Ca]变化的影响.中医 药, 2008,39(8):1192-1196. [16]Mueller S.O., Stopper H. Characterization of the genotoxicity of anthraquinones in mammalian cells. Biochim Biophys Acta,1999,1428(2):406-414 [17] Wolfle D,Schmutte C, Westendorf J,et al.Hydroxyan-thraqui.nones as tumor promoters: enhancement of malignant transformation of C3H mouse fibroblasts and growth stimulation of primary rat hepatocytes. Cancer Res,1990,50(20):6540-6544. [18]罗文敏,毓江萍.大黄中五种葸醌衍生物的HPLC测定.药物分析杂志,1989,9(5): 259-262( 致谢 本论文在进行过程中，得到了淮北师范大学化学与材料科学学院的大力支持，王 岩玲老师的悉心指导，在葛金柱、张春兰的帮助，才能得以完成此论文。在此，也对 曾给予我帮助和支持的其他老师和同学一并表示感谢～