丹参护肝机理的研究
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药理?
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一
j一0丹参护肝机理的研究
翌至兰兰生许瑞龄陈贤明赵元昌尹镭韩德五f2:, ,D1f一
(山西医学院太原030001)
提要实验结果
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
明,丹参能明显抑制正常及损伤肝细胞脂质过氧化反应,诱导细胞色索P4SO~
台成防止损伤肝细胞蛋白质,DNARNA尿索及铜兰蛋白的降低,减轻肝毒物对体外培养肝细胞
超微结构的损伤.一
美量词肝脏丹参脂质过氧化作用
临床应用丹参治疗急,慢性肝炎有显着疗
披.我室多年来对丹参进行了一系列研究,证
明其对急,慢性实验性肝损伤具有明显防治作
用,但对其防治肝病机制所知较少,为此,
我们进行了如下实验研究.
材料
动物Wistar雄性大鼠,体重180,200g.
药物丹参,faprzewalskliMaxim,,
Salviamiltiorrhizae(鉴定人}简洋辉,江西
药物研究所)煎剂.经水煎醇沉后,取上清液
制成(每ral含生药0.5g).丹参注射液:上海
第一制药厂产品(批号.861101),临用时用
D-Hanks液稀释成75mg/ml.D-半乳糖胺:
重庆医科大学化学室产品(批号6905~3).
RPMI--1640干粉培养基(LifeTechnologies
INC美国)配翻时,称取5.2g,加0.8gNaECO,,
再加三蒸水至500ml,经超净过滤后,加人
青,链霉素100u/ml,胰岛素0.2u/ml,分装
于无菌瓶中,4?保存备用.
方法
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一
,丹参对四氯化碳致俸外培养肝细胞损
伤的保护作用
参照Seglen的方法”,在乙醚麻醉下经大
鼠门静脉插管,用O.25胰蛋白酶缓冲液循环
灌流离体肝脏,分离收集肝细胞.肝细胞收获
中国中药杂声l992年第l倦第4期
率为(1,)×10个细胞/肝,台盼蓝染色计数
细胞存话率为9O以上.用含lO小牛血清的
RPMI-1640培养液稀释成5×10个细胞/ml,接
种子24孔培养板中,每孔Iml,共40孔,分为
正常组,丹参对照组,损伤组及丹参治疗组.
细胞置CO培养箱中预培养1.54,时后,于丹参
对照组及丹参治疗组内加丹参注射液151/孔,
继续培养2小时后,丹参糟疗组及损伤组内加
2Occl?酒精溶液l51,再培养4小时,各组
同时终止培养.分别取上层培养液5O1捌谷丙
转氨酶(GpT)(改良金氏法),5Ol捌尿素氨
(睬乙酰=肟法),500~1测铜兰蛋白含量(微量
法),1OO1掼I雨二醛(MDA)(TBA荧光法)”„
肝细胞经离心去上清液,加人4ml冰生理盐水,
18000r/min,1分钟,制成肝细胞匀浆,分别铡
MDA(TBA发光法),总蛋白含量(Folin一酚
法)及尿素氨含量.
电镜标本制备:干培养板各孔底预先置一
小块盏玻片,终止培养后取出,制成扫描电镜
标本.余下肝细胞,每五孔(同组)倾倒一
起,离心去上清液,铷成透射电镜标本.
=,丹参对四氯化碳致整体大鼠肝损伤的
保护作用
动物随机分为正常组,损伤对照组及丹参
治疗组.实验第l天,丹参治疗组动物皮下注
射丹参煎剂2,5g/kg,每日2次,共4天.损伤
„省科研基盘资助.
?233?
对照组注射等量生理盐水.实验第3天,瓶组
动物给予CCh灌胃一次,2.5ml/kg.各组动物
千最后一次给药后禁食l驯,时,处死动物取血
测GPT.准确称取中叶肝组织0.2g,放入冰
0.25瑚01/Lsucr0se—Tris—itC1缓冲渡1ml中,
于冰浴中用高速匀浆机1800Or/min研磨1分钟,
制成肝匀浆,测定细胞色素P45o(一氧化碳差
光谱法).另取肝组织0.5g,加冰生理盐水
5ml,制成肝匀浆,分别测RNA(地依酚珐),
DNA(二苯胺法),MDA及总蛋白含量.
三,丹参对D一半乳糖胺(GAIN)致整体
大鼠肝损伤的保护作用
动物随机分为?正常组,?丹参组,?
GaIN组及?GaIN+丹参组.实验第l天开始,
?,?组动物皮下注射丹参煎剂0.5ml/100g,
每日2次,共3天.实验第2天下午?,?组动
物腹腔注射GaIN1800mg/kg,40小时后,乙
醚麻醉下,腹主动脉取血,测GPT,取肝中叶
0.2g制成肝匀浆,测细胞色素P450及MDA含
量.
结果
一
,丹参对CCh致原代培养大鼠肝细胞损
伤的保护作用
生化测定结果:CCh中毒肝细胞GPT释放
明显增加,MDA生成显着增多,尿素,蛋白
质及铜兰蛋自的合成明显减少.加入丹参后,
GPT释放减少,7?12.20.09S?0.019”8.I?3.9??
正常对照l16.I?19.90.235?0.03312.O?3.6
X?s口10与正常对照比?P<O.05?P<0.01
与CC1?组三巴?P<0.05?P<O.Ol(下同)
234t
表2丹参对cch损伤肝细胞蛋白质及铜兰
兰皇笪星望兰堕
组剐(mg/5总
xI
蛋
0?
白
~胞)(u善岛胞)
表3丹参对cc1.损伤肝细胞尿素代谢的影响
组别0s/5×10(g/5×10(“g/4x10
塑照塑塑2塑璺
CCI?组86.I+2.317.9?I.9I.104.I?6.5??
CCI?+丹参69.9+1.652.5?13.2122.3?I4.3
丹参对照72.9?2.341.9?10.4117.9?10.7
正常对厢82.4?4.6I2.8?B.2125.2?6.
表面绒毛致密,呈规则指状突起,纹理清楚.
CCI?中毒盱细胞表面绒毛稀疏,排列紊乱,甚
至绒毛完全脱失,呈光板状.加入丹参后,可
明显减轻CCI?所致肝细胞膜表面的损伤,透射GPT明显升高,
肝脏MDA含量显着增加,细胞色素P450,DNA
及RNA含量明显减少.经丹参疗后,SGPT
明显降低,肝脏MDA显着减少,细胞色素P450,
表4药物对ccI.损伤肝脏MDA.细胞色素P450
及sePT,9影响
COl?101290.9?32.94.851.29O.o91?o.o9
CO1.+丹参ioG33.9?380.92+2?0.2O.3O3?O.09
正常对照642.9?21.12.96?0.{5O.296?O.11,1
表5药物对cch损伤肝脏DNA.RNA及
总蛋白含量的影响
组n(盱)()(耀舁)
DNA,RNA含量明显增加.但各组总蛋白含量
无统计学差异.结果表明,丹参能明显抑制
CCh中毒大鼠肝脏脂质过氧化反应,防止
DNA,RNA及细胞色素P450的减少.
三,丹参对GaIN致损伤大鼠肝脏MDA及
细胞色素P450含量的影响(表6)
表6药物对(;tin中毒动物肝脏的影响
与正常对照比?P<O.05?P<O.01与Gain比”P<0.91
GaIN中毒大鼠GPT明显升高,肝脏MDA
含量亦显着增加,细胞色素P450含量明显减
少.经丹参治疗后,GPT及MDA含量明显降
低,细胞色素P450含量显着增加.值得注意的
是,丹参能明显增加正常大鼠肝脏细胞色素
P450含量,抑制MDA的生成,表明丹参可诱
导正常大鼠肝脏细胞色素P450的合成,抑制其
脂质过氧化反应.
讨论
目前认为,肝细胞损伤主要是由于毒物进
入肝细胞内,经代谢产生自由基,引起脂质过
.
中国中药杂毒l.92年第l7卷第4期
氧化反应,导致细胞瑛结构的破坏,钙离子内
流,使钙稳态失衡,以及脂质过氧化引起的链
锁反应中生成大量自由基,与大分子物质
DNA,RNA及蛋白质交联,破坏其结构与机
能,从而导致肝细胞坏死”.实验结果表
明,丹参能明显抑制肝细胞脂质过氧化反应,
因而使肝细胞变性坏死减轻.细胞膜结构的完
整性对维持肝细胞正常功能所必需,肝细胞超
微结构的损伤,必然导致生物嗔通透性增加,
细胞外钠,水内浣增加,导致肝细胞肿胀,线
粒体及内质网等亚细胞器空泡变性,溶酶体破
裂,释放溶酶体酶,加重肝损伤.丹参可减轻
???
?肋
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=D0
???
“黯;;
?
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7l3
参
丹照
组+对?蘸
脂质过氧化反应,因而降低膜通透性,稳定了
生物膜.丹参保护细胞膜结构的完整性从超微
结构观察也得到证实.细胞色素P450是肝脏混
台功能氧化酶系的关键酶,参与生物转化.肝
损伤时,该酶活性受抑制,生物转化功能发生
障碍”“.丹参可诱导细胞色素P45O的合成,改
善生物转化功能,对减轻肝损伤也起一定作
用.
丹参能增加损伤肝细胞DNA,RNA及蛋
白质的含量,有利于促进肝细胞再生与修复.
铜兰蛋白缺乏,导致铁运输和利用障碍,引起
贫血,组织缺氧,肝脏缺氧影响再生与修复.
丹参促进铜兰蛋白的合成,间接有利于肝组织
再生与修复.此外,丹参可促进损伤肝细胞尿
素台成,这在降低血氨和防止肝性脑病的发生
上将起一定作用.
参考文献
[1]王祯苓等.中医杂志1982I(1)t67
【2]马学惠等.中西医结台杂志1988I8,161
[$]HanDewuetI.Abstr4cl}OfChiaeBeMed;eine目
1983l2:106
(4]马学惠等,中西医结台杂志198S-3;180
[5]SeglenP0.MethedCellBicl197el13:29
【6]Y4giK.BieehemMed1979~16;216
[7]Om?TetII_JBi~1Chem1864I258:2570
[8]C~o?erDScta1.BiochempharmaeM1984;33:359
(9]Weddlecc?tITBiolChem196{251:493
[1O3s?h?eFAXetB1.
TP4thoI1930:100:25
C11]Levi~wet1.Biochema?dBiephysi1975;158:
8l2
l990年8月3日收稿
q}细辛挥发油抑制大鼠棉球肉芽肿形成与
血清锌,铜含量的关系
i
壁垒兰V谢伟闽琳(宁夏医学院银]750004)眨2?7/口,j一
提要腹腔注射毛纲辛辽细辛挥发油.可以抑制大鼠棉球肉芽肿形成.
此作用与血清锌含量降
低有关.
关键伺毛细辛辽细辛挥发油内芽组织锌
细辛属植物为传统中药.细辛亚属的毛细
辛挥发油与杜衡亚属的辽细辛挥发油均有显着
抑制小鼠和大鼠急性,亚急性渗出性炎症及慢
性炎症肉芽组织增生的作用.等安全剂量时毛
细辛挥发油的抗炎作用略强于辽细辛挥发油,
特别是对慢性炎症所致内芽组织增生的抑制作
用与地塞米栓相当.一系列研究指出类固酵激
素致刨口愈告不良(肉芽组织增生抑制)是因
降低了血清及皮肤锌含量所致??..毛细辛,
辽细辛挥发油是否也因降低血清锌含量而发挥
上述药理作用尚未见报逋.本文对此进行了动
物实验研究,探索细辛挥发油抑制中药杂志1992年第l7卷第4期