见血封喉内生真菌Rhizoctonia

见血封喉内生真菌Rhizoctonia 见血封喉内生真菌Rhizoctonia 天然产物研究与开发NatProdResDev2009,21:424-427,432 文章编号:1001-6880(2009)03-0424-05 见血封喉内生真菌Rhizoctoniasp.J5化学成分研究 阙东枚,戴好富,黄贵修2,戴文君,梅文莉 .中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海口571101; .中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,儋州571737 摘要:应用多种柱色谱技术,从见血封喉内生真菌Rhizoctoniasp.J5发酵液中分离纯化了7个化合物,根据理 化性质和波谱数据分别鉴定为对羟基苯乙醇(1),对羟基苯甲醛(2),5一羟甲基-2一糠醛(3),甘草素(4),24一亚甲 基-24(25)-二氢羊毛甾醇(5),(,5,8a,22E,24R)-5,8-桥二氧麦角甾一6,22一二烯一3一醇(6),(3卢,5,8,22E, 24R)-5,8-桥二氧麦角甾-6,9(11),22.三烯.3.醇(7).以上化合物均为首次从见血封喉内生真菌中分离得到. 抗菌活性测试结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明化合物4具有抗金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性. 关键词:见血封喉;内生真菌;Rhizoctoniasp.;化学成分 中图分类号:Q946.91;R914文献标识码:A ChemicalConstituentsfromtheEndophyticFungus Rhizoctoniasp.J5ofAntiar~toxicaria QUEDong—mei,DAIHao—fu,HUANGGui—xiu,DAIWen-jun,MEIWen—li InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,ChineseAcademyofTropicalAgricultu ralSciences,Haikou571101,China; EnvironmentandPlantProtectionInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScie nces,Danzhou571737,China Abstract:Sevencompoundswereisolatedfromthefermentationbrothofendoph~iefungusR hizoctoniasp.J5ofAntiaris toxicaria.TheirstructureswereelucidatedasP-hydroxyphenylethylalcohol(1),P-hydroxy benzaldehyde(2),5-hydroxym? ethyl-2-furancarboxaldehyde(3),liquiritigenin(4),24-methylene-24(25)-dihydrolanoste rol(5),(3JB,5,8,22E, 24R)-5,8-epidioxyergosta-6,22-dien一3一 o1(6),and(3/3,5a,8a,22E,24R)-5,8-epidioxyergosta-6,9(11),22-tfien-3一ol (7)byphysicochemiealandspectraldata.Allthecompoundswereisolatedfromtheendophyt icfungusofAntiaristoxi— carlaforthefirsttime.Bioassayresultsshowedcompound4possessedantibacterialactivitya gainstStaphylococcusalzreus andmethicillin?resistantStaphylococcusalzFeus. Keywords:Ant/ar/stoxicaria(Pers.)Lesch;endophyticfungus;Rhizoctoniasp.;chemicalc onstituents 见血封喉[Antiaristoxicaria(Pers.)Lesch.]为 桑科(Moraceae)见血封喉属(Antiaris)植物…,别 名:加布,剪刀树,箭毒木,在我国主要分布于海南, 云南,广东和广西等地,是世界上木本植物中最毒的 树种之一,已被列为三级珍稀保护植物_2J.民问人 药用于强心,催吐,痢疾,麻醉剂等J.国外研究表 明,其乳汁和种子中均富含强心苷类化合物,具有强 心作用;其根皮中富含黄酮类化合物,有些具有抗炎 和抗肿瘤活性J.因此,见血封喉具有潜在的药物 开发利用价值.本文首次对见血封喉内生真菌的化 学成分进行初步研究,从内生真菌Rhizoctoniasp.J5 收稿日期:2008-01—15接受日期:2008-05-07 基金项目:973 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 前期研究专项(2007CB116306);海南省自然科 学基金(30608);海南省自然科学基金指导性计划 (80671) }通讯作者Tel:86—898-66988061;E?mail:meiwenli@yahoo.com.an 发酵液中分离得到7个化合物,分别为对羟基苯乙 醇(1),对羟基苯甲醛(2),5一羟甲基-2一糠醛(3),甘 草素(4),24一亚甲基.24(25)一二氢羊毛甾醇(5), (3,5,8,22E,24R)一5,8一桥二氧麦角甾-6,22一二 烯一3一醇(6),(3口,5,8,22E,24R)-5,8-桥二氧麦 角甾-6,9(11),22.三烯一3一醇(7).采用滤纸片琼脂 扩散法进行抗菌活性测试,结果表明,甘草素具有抗 金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活 性.通过HPLC分析技术测得对羟基苯乙醇在发酵 液中相对含量较高,有着潜在的资源化利用前景. 1实验部分 1.1仪器与材料 北京泰克仪器有限公司X-5型显微熔点仪(未 校正);VGAutospec-3000型质谱仪;JASCO-20C数 阙东枚等:见血封喉内生真菌Rhizoctoniasp.J5化学成分研究 字旋光仪;BrukerAV-400核磁共振波谱仪(TMS内 标);薄层层析硅胶和柱层析硅胶(青岛海洋化工 厂);SephadexLH-20(Merck公司);D一101大孔吸附 树脂(天津市大钧科技开发有限公司);ZD.8802摇 床(太仓市华利达实验设备有限公司);DIONEX SUMMIT高效液相色谱仪(P680A泵,UVD170U紫 外 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 器,Chromeloen色谱工作站,KROMASIL—C18 柱);硫酸卡那霉素(上海生工有限公司);氟康唑 (贵州科伦药业有限公司,批号:A0503l4);柱色 谱所用试剂均为分析纯;HPLC所用试剂均为色谱 纯,水为超纯水. J5号真菌分离自见血封喉[Antiaristoxicaria (Pers.)Lesch.]的板状根,于2007年3月采集于海 南省儋州市中国热带农业科学院植物园,植物由中 国热带农业科学院热带作物品种资源研究所王祝年 副研究员鉴定,J5号真菌由本研究组鉴定为丝核菌 属(Rhizoctonia),植物标本和菌株保存在中国热带 农业科学院热带生物技术研究所. 活性测试供试菌株:金黄色葡萄球菌(Staphylo— COCCU.$aureus)购于海南农垦医院;耐甲氧西林金黄 色葡萄球菌9551(methicillin—resistantStaphylococcus aurgus,MRSA)由中国热带农业科学院热带生物技 术研究所保藏;白色念珠菌(Candidaalbicans)购于 海南省药品检验所. 1.2培养基及培养条件 PDA培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂 20g,定容至1L,pH自然,121oC灭菌20min.PD 培养基:马铃薯200g,葡萄糖20g,定容至lL,pH 自然,121?灭菌20min.NA培养基:牛肉膏3g, 蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂20g,定容至1L,pH7.0 72,121?灭菌20min.YPD培养基:葡萄糖20 g,胰蛋白胨2Og,酵母粉10g,琼脂20g,定容至1 L,pH7.0,121oC灭菌20min. 内生真菌J5经PDA培养基斜面活化,切成黄 豆粒大小的菌丝块,接种于容量为5L的装有2L PD培养基的三角瓶中,室温,164r/min振荡培养6 d,得发酵液80L. 金黄色葡萄球菌和MRSA采用NA培养基.白 色念珠菌采用YPD培养基. 1.3提取与分离 发酵液经过滤,分为发酵上清液和菌丝体.发 酵上清液减压浓缩得粗浸膏,粗浸膏分散于水中成 为悬浊液后用乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯浸膏4.2 g.菌丝体用95%乙醇超声浸提,减压浓缩浸提液 得粗浸膏,粗浸膏分散于水中成为悬浊液后依次用 石油醚,乙酸乙酯萃取,分别得石油醚浸膏20.0g, 乙酸乙酯浸膏4.0g. 发酵上清液乙酸乙酯浸膏经硅胶柱层析,以氯 (45:1—15:1)梯度洗脱,得到l3个组分 仿/甲醇 (Fr.1一Fr.13).Fr.2(433.0mg)依次经Sephadex LH-20凝胶(95%乙醇)和硅胶(石油酬丙酮5:1) 柱层析,得到化合物2(4.0mg).Fr.3(213.0mg) 经硅胶(石油醚/丙酮7:1)柱层析,得到化合物3 (5.0rag).Fr.6(806.0mg)依次经硅胶(氯仿/丙 酮40:1)和SephadexLH-20凝胶(95%乙醇)柱层 析,得到化合物1(546.0mg).Fr.7(232.0mg)依 次经SephadexLH一20凝胶(95%乙醇)和硅胶(氯 仿/甲醇35:1)柱层析,得到化合物4(2.8mg). 菌丝体乙酸乙酯浸膏经硅胶柱层析,以氯仿/甲 醇(100:1—10:1)梯度洗脱,得到9个组分(Fr.1一 Fr.9).Fr.2(20.0mg)依次经硅胶(石油醚/丙酮 30:1)和硅胶(石油醚/乙酸乙酯8:1)柱层析,得到 化合物5(3.2mg).Fr.4(100mg)经硅胶(石油醚/ 丙酮15:2)柱层析,得到化合物6(14.0mg)和化合 物7(11.0mg). 1.4生物活性试验 将样品配成浓度为10mg/mL的溶液,选用直 径为6mm的灭菌滤纸片,滤纸片加样品溶液5O ,重复三次,待溶剂挥干后,将已点样的滤纸片贴 于已涂供试菌悬液100IzL(菌液浓度1O一10cfu/ mE)的琼脂培养基上,放置20min后,金黄色葡萄 球菌和MRSA放人培养箱中37?无光照培养,白色 念珠菌在常温下培养,24h后测定其抑菌圈大小. 金黄色葡萄球菌和MRSA以硫酸卡那霉素,白色念 珠菌以氟康唑作为阳性对照. 2结果与讨论 2.1结构鉴定 对羟基苯乙醇(1)无色针晶(甲醇),mp.82 — ,三氯化铁一铁氰化钾反应阳性,示存在酚羟 83? 基.分子式C8H10O2.EI—MSm/z:138[M].H NMR(CDOD,400MHz):7.03(2H,d,J=8.2Hz, H-2,6),6.70(2H,d,J=8.2Hz,H-3,5),3.68(2H, t,J=7.2Hz,H8),2.71(2H,t,J=7.2Hz,H-7); CNMR(CDOD,100MHz)6:131.1(C—1),130.9 (C-2),116.2(C-3),156.8(C4),116.2(C-5), 426天然产物研究与开发V01.21 130.9(C-6),39.4(C-7),64.6(C一8).以上数据与 文献报道的数据J一致. 对羟基苯甲醛(2)白色固体(甲醇),mp.115 — 117?,三氯化铁一铁氰化钾反应阳性,示存在酚 羟基.分子式CH60:.EI—Msm/z:122[M].H NMR(CD3OD,400MHz)6:9.72(1H,s,CHO),7.73 (2H,d,J=8.6Hz,H一2,6),7.18(2H,d,J=8.6Hz, H-3,5);"CNMR(CD3OD,100MHz):130.4(C一 1),133.5(C-2),l16.9(C一3),165.2(C-4),116.9 (C-5),133.5(C-6),192.9(CHO).以上数据与文 献报道的数据一致. 5.羟甲基_2.糠醛(3)棕色油状物(甲醇), mp.35—36?.分子式C6H6O3.EI?MSm/z:126 [M].HNMR(CD3OD,400MHz):9.53(1H,s, H-6),7.38(1H,d,J=3.5Hz,H-3),6.58(1H,d,J = 3.5Hz,H_4),4.61(2H,s,H-7);"CNMR (CDOD,100MHz):154.0(C-2),123.6(C一3), 110.9(C4),163.3(C-5),179.5(C-6),57.7(C-7). 以上数据与文献报道的数据j一致. 甘草素(4)黄色固体(丙酮),mp.200,203 ?.分子式Cl5Hl204.EI—MSm/z:256[M]. [仪]2D5_36.1.(c0.09,MeOH)o1HNMR(Acetone—d6, 400MHz):7.72(1H,d,J=8.6Hz,H-5),7.40 (2H,d,J=8.4Hz,H一2,6),6.89(2H,d,J:8.5 Hz,H-3,5),6.57(1H,dd,J=8.6,2.2Hz,H-6), 6.42(1H,d,J=2.2Hz,H?8),5.45(1H,dd,J= 13.0,2.8Hz,H-2),3.05(1H,dd,J=16.7,13.0 Hz,H一3),2.67(1H,dd,J=16.7,2.6Hz,H-3);"C NMR(Acetone—d6,100MHz)6:80.6(C-2),44.7(C一 3),190.5(C4),129.5(C一5),111.2(C-6),165.2 (C-7),103.7(C一8),164.5(C一9),115.3(C一10), 131.3(C一1),128.9(C一2),116.2(C-3),158.6(C一 4),116.2(C-5),128.9(C-6).以上数据与文献 报道的数据一致. 24一亚甲基(25).二氢羊毛甾醇(5)白色无 定形粉末(氯仿),mp.127—128?.分子式C,H: 0.EI—MSm/z:440[M].HNMR(CDC13,400 MHz)6:4.71(1H,s,H-31),4.66(1H,s,H-31),3.23 (1H,dd,J=11.6,4.6Hz,H-3),2.22(1H,In,H一 25),1.03(3H,d,J=6.8Hz,H-27),1.02(3H,d,J = 6.7Hz,H-26),0.99(3H,s,H-29),0.98(3H,s, H-19),0.92(3H,d,J=6.2Hz,H-21),0.88(3H,s, H-28),0.81(3H,s,H一30),0.69(3H,s,H一18);C NMR(CDC1,100MHz):35.6(C一1),27.9(C-2), 79.0(C.3),38.9(C4),50.4(C-5),18.3(C-6), 26.5(C-7),134.4(C一8),134.4(C_9),37.1(C一10), 21.0(C.11),31.0(C一12),44.5(C一13),49.8(C一 14),30.9(C—l5),28.2(C一16),50.5(C一17),15.8 (C.18),19.1(C.19),36.5(C-20),18.7(C-21), 35.0(C-22),31.3(C-23),156.9(C-24),33.8(C一 25),22.0(C-26),21.9(C一27),24.3(C一28),28.0 (C-29),15.4(C-30),105.9(C一31).以上数据与文 献报道的数据J一致. (,5.8a,22E,24R)-5.8一桥二氧麦角甾. 22一二烯3.醇(6)白色针晶(氯仿),mp.182—183 ?,Liebermann,Burchard反应阳性.分子式C28H O3.EI—MSm/z:428[M].HNMR(CDCI3,400 MHz):6.49(1H,d,J=8.4Hz,H.7),6.24(1H,d,J :8.4Hz,H-6),5.22(1H,dd,J=15.2,7.2Hz,H一 23),5.14(1H,dd,J=8.1,15.4Hz,H-22),3.96 (1H,tt,.厂=11.2,5.1Hz,H-3),1.22(3H,s,H一19), 1.09(3H,d,J=6.7Hz,H-21),0.99(3H,d,J=6.8 Hz,H-28),0.83(3H,d,J=6.5Hz,H-26),0.82 (3H,d,J=6.3Hz,H-27),0.74(3H,s,H—l8);"C NMR(CDC1,100MHz):34.7(C一1),30.1(C-2), 66.4(C-3),36.9(C4),82.1(C-5),135.4(C-6), 130.7(C-7),79.4(C一8),51.1(C-9),37.0(C一1O), 23.4(C一11),39.4(C—l2),44.6(C-13),51.7(C一 14),20.8(C一15),28.6(C-16),56.2(C-17),13.0 (C-18),l8.4(C一19),39.7(C-20),20.9(C-21), 135.2(C-22),132.3(C-23),42.8(C-24),33.1(C一 25),2O.O(C-26),19.9(C-27),17.6(C-28).以上 数据与文献报道的数据J一致. (3口.5,8oL,22E,24R)_5,8一桥二氧麦角甾-6,9 (11),22一三烯3.醇(7)白色针晶(氯仿),Lieber— mann—Burchard反应阳性.分子式C28H42O3.EI—MS m/z:426[M].HNMR(CDC13,400MHz):6.59 (1H,d,J=8.4Hz,H-7),6.28(1H,d,J=8.4Hz,H一 6),5.47(1H,in,H一11),5.24(1H,dd,J=15.4,7.4 Hz,H-23),5.14(1H,dd,J=15.4,8.1Hz,H-22), 3.97(1H,ITI,H-3),1.22(3H,s,H-19),1.O9(3H,d, J=6.7Hz,H-21),0.99(3H,d,J=6.8Hz,H-28), 0.83(3H,d,J=6.5Hz,H-26),0.82(3H,d,J=6.3 Hz,H-27),0.74(3H,s,H一18);"CNMR(CDC13,100 MHz):35.1(C一1),30.6(C-2),66.5(C一3),37.0 (C4),82.6(C-5),135.4(C-6),130.7(C-7),78.8 阙东枚等:见血封喉内生真菌Rhizoctoniasp.J5化学成分研究427 (C一8),143.0(C-9),38.3(C一10),119.5(C.11), 41.3(C一12),44.3(C一13),49.3(C一14),21.0(C一 15),29.2(C一16),56.1(C—l7),13.0(c一18),25.6 (C一19),39.7(C-20),20.9(C-21),135.6(C-22), 132.5(C-23),42.8(C-24),33.1(C-25),20.0(C- 26),19.9(C-27),17.6(c一28).以上数据与文献报 道的数据J一致. 2.2生物活性 本实验采用滤纸片琼脂扩散法进行抗菌活性测 试,结果表明,化合物4对金黄色葡萄球菌和MRSA 有明显抑制作用,对白色念珠菌则没有表现出活性; 其余化合物均没有表现出抗金黄色葡萄球菌,MR. SA和白色念珠菌活性. 化合物1,2为重要的有机合成中间体.化合物 1用于合成美多洛尔,倍他洛尔,红景天苷等药 物..,对慢性髓原白血病l<562细胞株具有细胞毒 活性_1?.化合物2用于合成羟氨苄青霉素,增效剂 甲氧苄氨嘧啶,羟氨苄头孢霉素,祛痰药物杜鹃素等 药物,茴香醛,香草醛等香料,除草剂敌草腈和溴苯 腈等农药?. 化合物日具有抗心肌缺血,抗氧化和心血管 系统作用,可抑制醛糖还原酶的活性.化合 物4具有抗溃疡和解痉作用,能抑制单胺氧化酶,可 治疗精神抑郁病引,本实验发现其也有抗金黄色葡 萄球菌和MRSA活性. 化合物6,7为麦角甾醇类化合物,均有免疫抑 制活性"].化合物6对L一1210细胞18],人乳腺癌 MCF_7细胞,Walker256肉瘤细胞,人肝癌PLC/ PRF/5细胞,KB细胞j,HepG2和NCI-H460肿瘤 细胞【2?均有体外细胞毒活性. 2.3对羟基苯乙醇含量的HPLC分析 通过HPLC分析技术,在流动相为乙腈一水(4: 6),流速0.5mI_/min,紫外检测波长277nm,柱温为 室温,进样量为lO的色谱条件下,测得对羟基苯 乙醇在发酵上清液乙酸乙酯部分含量为15.3%,即 1L发酵液中含8mg对羟基苯乙醇,含量较高,有 着潜在的资源化利用前景. 参考文献 1ChenHY(陈焕镛).FloraHainanica(vo1.2)(海南植物志. 第二卷).Beijing:SciencePress,1965.384. 2YiGL(易观路),XuFH(许方宏),LuoJH(罗建华),et a1.StudyonrareandendangeredplantAntiariztoxwada. TropFor(热带林业),2004,32:20. 3MeiWL(梅文莉),GanYJ(干玉娟),DaiHF(戴好富). Advancesinreseamhofchemicalconstituentsandpharmaco— logicalactivitiesofAntmristoxicaria.ChinTradit胁r6Drugs (中草药),2008,39:151—154. 4Xuez(薛震),"S(李帅),WangSJ(王素娟),eta1.Stud— iesonchemicalconstituentsfromthecormofCrema~tra印一 pendiculata.ChinJChinMaterMed(中国中药杂志), 2005,30:511-513. 5ChenYG(陈业高),YuLL(于丽丽).Studiesonthechemi— calconstituentsofPsoraleacorylifoli~.JYunnanNormal Univ(云南师范大学),2005,25(4):52,54. 6DaiHF(戴好富),ZhouJ(周俊),PengZG(彭再刚),et a1.StudiesonthechemicalconstituentsofSchizandrachinen sis.NatProdResDev(天然产物研究与开发),2001,13 (1):24-26. 7WangYF(王易芬),MuTH(穆天慧),ChenJJ(陈纪军), eta1.StudiesonchemicalconstituentsfromtherootsofPo一 船咖kingianum.ChinJChinMaterMed(中国中药杂 志),2003,28:524-527. 8ShiraneN,MurabayashiA,MasukoM,eta1.Effectonergos— terolbiosynthesisofafungicide,SSF一109,inBotrytiscinerea. Phflochemist~,1990,29:2513-2520. 9GanYJ(干玉娟),ZengYB(曾艳波),.MeiWL(梅文莉), eta1.Isolationandidentificafionofthechemicalconstituents fromLentinusgiganteusBerk.ChinJMedChem(中国药物 化学杂志),2007,17:104—107. 10MiaoZY(缪震元),SunCE(孙长恩),HuaWS(华万森), eta1.ThesynthesisofP—hydroxyphenylethylalcoho1.ChinJ SynthChem(合成化学),2002,10:481484. 11UDH,ZhuTJ,FangYC,eta1.Theantitumorcomponents frommarine—derivedbacteriumStreptoverticilliumluteoverti- cillatuml1014II.JOceanUnivChina,2007,6:193—195. 12LvXY(吕心阳),RenXJ(任学军),ZhaoZL(赵志林),et a1.TheprocessandapplicationofP-hydroxybenzaldehyde. Chemlatermediate(化工中间体),2004,1(5):52-55. 13ZhuDN(朱丹妮),LiZM(李志明),YanYQ(严永清),et 0Z.Aresearchonchemicaldynamicchangesanddrugeffica— cyofSMScompoundprescriptionchemicalresearcheson SMSprescription(II).ChinJChinMaterMed(中国中药杂 志),1998,23:291-293. 14XiaY(夏云),LiZM(李志明),ZhuDN(朱丹妮),eta1.A researchonchemicaldynamicchangesanddrugefficacyof SMScompoundprescriptionchemicalresearchesonSMSpre- scriptionI.ChinJChMaterMed(中国中药杂志),1998, 23:230-231. (下转第432页) 432天然产物研究与开发V01.21 参考文献 1LuoDS(罗达尚),SunAL(孙安玲),XiaGC(夏光成).In— vestigationonTibetanmedicinesMeconopsis.ChinTradit HerbDrugs(中草药),1984,15(8):23_24. 2YangYC(杨永昌).TibetanMedicines(藏药志).Xining: QinghaiPeople'sPublishingHouse,1991.465468. 3GaoLM(高黎明),WangXX(王小雄),ZhengSZ(郑尚 珍),eta1.ChemicalconstituentsofMeconopsisintegrifoliaas aTibetanmedicinalherb(I).JNonhwestNormalUniv, NatSci(西北师范大学,自科版),1997,33(3):49— 52. 4GuanYL(官艳丽),DawaZM(达娃卓玛),GesangSL(格 桑索朗),eta1.Studyonessentialoilfromflowe~ofMeco? nopsisintegrifolia.JChinPharm(中国药学杂志),2007, 42:539-540. 5WuHF(吴海峰),PanL(潘莉),ZouDS(邹多生),eta1. AnalysisonvolatileoilsfromthreespeciesofMeconopsisby GC.MS.JChinpharm(中国药学杂志),2006,41:1298一 】300. 6ChenXL(陈行烈),ZhangHD(张惠迪).Studyofthe chemicalingredientsofessentialoilofMeconopsisintegrifolia (Maxim)Franch.JXinjiangUniv(新疆大学),1989,6 (4):75_77. 7XiangL,XingDM,WangW,eta1.AlkaloidsfromPortulaca oleraceaL.Phytochemisry,2005,66:2595-2601. 8DuZL(杜彰礼),YinZQ(殷志琦),Yewc(叶文才),et a1.CoumarinsandflavonoidsfromleavesofBroussonetiapa一 m.NatProdResDev(天然产物研究与开发),2008, 20:630-632. 9ZhouHY(周惠燕),LiSM(李士敏).Studyonconstituents fromleavesofPhyllostaehyspubescens.JChinPharm(中国 药学杂志),2006,41:662-663. 10YuDQ(于德全),YangJS(杨峻山).AnalyticalChemical Manual(分析化学手册,第七分册:核磁共振波谱分析). Beijing:ChemicalIndust~Press,1999.835. 11WangY(王岩),ZhouLL(周莉玲),LiR(李锐),eta1. StudiesonthechemicalconstituentsofAmpelopsisgrossedent— ata.JChinMedMat(中药材),2002,25:254—256. (上接第427页) 15ShimizuM,ZenkoY,TanakaR,eta1.Studiesonaldosere ductaseinhibitorsfromnaturalproducts.V.Activecompo- nentsofHachimi-jio—gan(KampoMedicine).ChemPharm Bull,1993,41:1469.1471. 16PanX(潘宣),KongLD(孔令东),ZhangY(张勇),eta1. Invitroinhibitionofratmonoamineoxidasebyliquirifgenin andisoliquirifgeninisolatedfromSinofranchetiachinensis.Ac- taPharmSin(中国药理),2000,21(10):88-92. 17FujimotoH,NakayamaM,NakayamaY,eta1.Isolationand charaterizationofimmunosuppressivecomponentsofthree mushrooms,Pisolithustinctorius,Microporusflabelliformisand Lenzhesbetulina.ChemPharmBull,1994,42:694.697. 18MatsuedaS,KatsukuraY.Antitumoractivephotochemical oxidationproductsofprovitaminD.ChemInd,1985,1:411. 19KahlosK,KangasL,HihunenR,eta1.Ergosterolperoxide, anactivecompoundfromInonutusradmtus.PlantaMedica, 1989,55:389—390. 20LinCN,TomeWP,WonSJ.NovelcytotoxicprinciplesofFor— mosanGanodermalucidum.JNatProd,1991,54:998—1002. 21SongSS(宋珊珊),WangNL(王乃利),GaoH(高昊),et a1.Bioactivealkaloidsandsterolsfromamarinefungus 96F197.ChinJMedChem(中国药物化学杂志),2006,16 (2):93-97.