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蛋白质提纯干实验报告.doc

蛋白质提纯干实验报告

胡小荣
2017-11-27 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《蛋白质提纯干实验报告doc》,可适用于综合领域

蛋白质提纯干实验报告蛋白质提纯干实验一、实验目的:了解模拟免疫干实验的方法和意义掌握用protein软件提纯蛋白质的方法。进一步熟悉层析、热变性、盐析等常用生化分离方法的原理和应用。二、实验原理:“Protein”软件有个任务即组待分离纯化的蛋白。任务要求利用软件提供的几种实验技术提纯每一个目的蛋白最终达到单向电泳一条带双向电泳一个点而且使用的人时和经费(根据提取步骤计算得到)不得超过一个特定值。在每个任务开始时软件给出目的蛋白的一些性质如热稳定的温度范围和pH稳定范围等利用这些信息可以使实验少走弯路。“Protein”提供的分离纯化方法有七种:热变性硫铵沉淀排阻层析(凝胶色谱)离子交换层析吸附层析聚焦层析制备电泳。在“Protein”所提供的各种分离纯化方法中热变性法和盐析法是比较好的粗提方法在提纯的早期使用效果较好。层析是各种方法中最强有力的方法制备电泳虽然纯化倍数高但是回收率低。在各种层析方法中又以离子交换层析最为有效和易于使用并且耗费的人时和经费也较少。排层层析和聚焦层析耗费较大但在某些特定情况下这两种方法是不可替代的。“Protein”提供了四种电泳方法:即SDSPAGE、PAGE、等电聚焦电泳和双向电泳。这些电泳方法不但可以用以检测样品的纯度而且也给出了样品的一些信息如分子量、等电点等这些信息对于后续提纯有重要的参考价值等电聚焦电泳和PAGE还可以用于制备。本实验要求完成实验软件中三种酶的分离纯化。Windows号酶号酶是酵母体内产生的在以下稳定稳定pH范围,。分离纯化步骤:、热变性:、离子交换层析:、吸附层析:、电泳检测DIDEM检测ISOELEC检测PAGE检测SDSPAGE检测此酶PI为左右Mr为左右。Windows号酶号酶在以下稳定稳定pH范围,。分离纯化步骤:、热变性、吸附层析、凝胶色谱、电泳分析DIDEM检测ISOELEC检测PAGE检测SDSPAGE检测此酶的PI为左右Mr为左右Windows号酶号酶在以下稳定稳定pH范围,。分离纯化步骤:、热变性、吸附层析、凝胶色谱、电泳检测DIDEM检测ISOELEC检测PAGE检测SDSPAGE检测此酶的PI为左右Mr为左右。

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