细胞毒性检测方法比较

细胞毒性检测方法比较细胞毒性检测方法比较实验原理： MTT可以被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物甲瓒 formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。 CCK-8 是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线...

细胞毒性检测方法比较实验原理： MTT可以被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物甲瓒 formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。 CCK-8 是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考图1)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。 WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。 AlamarBlue 细胞增殖过程中，细胞体内的环境由氧化环境变化成还原环境，呼吸链中的NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高。AlamarBlue被细胞内吞后，在细胞质中被以上这些代谢中间体还原，最后释放到胞外。被还原AlamarBlue?的积累使培养基从无荧光的靛青蓝转变成有荧光的粉红色，通过普通分光光度仪与荧光光度仪来检测培养基中OD值和荧光强度的变化从而分析细胞增殖的情况。 MTT法要加MTT和DMSO 易产生误差细胞毒性较大 CCK-8法只需加CCK-8 检测灵敏度高，易溶毒性较小解 AlamarBlue法只需加AlamarBlue 比前两种方法更灵细胞毒性最小，敏，应用范围更广染色后细胞还可继续培养

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