二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响
二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响
作者:党建章, 朱海兰， 杨智伟， 黄仕容 【关键词】 二氧化氯;
灵芝;菌丝生长 摘要:目的探讨二氧化氯作为消毒剂应用于灵芝
栽培和液体培养。
方法
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平板法测定灵芝菌丝的生长和摇瓶发酵法测定
灵芝的生物量。结果在未高温灭菌的培养基中添加 0.7%
(vțv-1)的二氧化氯，灵芝菌丝生长良好;灵芝菌丝液体发酵
重量接近对照组。结论为灵芝栽培和液体发酵培养奠定基础。 关
键词:二氧化氯; 灵芝; 菌丝生长 The Effects of Chlorine
Dioxide on the Mycelium Growth of Ganoderma lucidum Abstract:ObjectiveTo explore the application of chlorine dioxide as antiseptic in cultivation and submerged cultural of Ganoderma lucidum.MethodsThe mycelium growth of Ganoderma lucidum was determined by plate culture method and biomass by submerged culture method. ResultsMycelium of Ganoderma lucidum grew fine and the weight of it came close to the contrast when 0.7% (vțv-1)chlorine dioxide was added to the medium which was not sterilized by high temperature. ConclusionThis provides a firm foundation for the cultivation and submerged culture of Ganoderma lucidum. Key words:Chlorine dioxide;
Ganoderma lucidum; Mycelium growth
灵芝Ganoderma lucidum作为药用真菌其功效已家喻户晓。近年
来灵芝作为保健食品和美容化妆品的添加剂，其应用日益广泛。传统
方法栽培灵芝，培养料均要高温灭菌。笔者在筛选灵芝培养的消毒剂
时，发现二氧化氯对各类微生物都有较强的杀灭和抑制作用，而且对
人畜无害,1,，但对灵芝菌生长却作用甚微。本文初步研究了不同浓
度二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响，以及7种不同灵芝菌耐受二氧化
氯的能力。 1 材料与仪器 1.1 供试菌种 赤芝
(Ganoderma.lucidum)AS. 565，由本系提供。美国灵芝、日本灵芝、
惠州灵芝、信州灵芝、紫芝、黑芝均购自山东金乡真菌研究所。杨树
菇、云芝、茯苓、茶新菇、金针菇均购自华中农业大学。霉菌(黑曲霉、根霉、青霉)，细菌(大肠杆菌、枯草杆菌)由本系提供。 1.2 斜面培养基(%)马铃薯(去皮)20;葡萄糖 2;KH2PO4 0.3;MgSO4ț7H2O 0.15;琼脂 2;pH6.5。 1.3 摇瓶种子和发酵培养基(%)葡萄糖20 g;蛋白胨10 g;酵母膏2 g;水1 000 ml;pH自然。 1.4 药品二氧化氯(ClO2)为深圳市科瑞德消毒用品科技开发有限公司产品，商品制剂 ClO2含量为2%(Wțv-1)，用前加适量柠檬酸活化。其他化学试剂均为国产
分析
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纯。 1.5 仪器恒温培养箱 PYX-DHS-60X75-BS 上海跃进医疗器械厂，高温消毒柜 TOMYSS-325 TOMY KOGYO CO.LTD.日本，MFS-11多功能三维旋混仪(摇瓶机) 深圳潘西诺生物科技有限公司。 2 方法 2.1 ClO2对霉菌和细菌的抑制作用每个培养皿中加入20 ml斜面培养基，趁热加入 ClO2，摇匀，使 ClO2制剂最终浓度为0.1%,1.0%(每100 ml培养基中加 ClO2制剂0.1 ,1.0 ml)，以未加 ClO2并经高压灭菌过的培养基作为对照。涂布法接种霉菌和细菌，每个浓度每种菌各接3个培养皿，霉菌置于28?、细菌置于37?恒温培养，隔天观察生长情况，培养5 d。 2.2 ClO2对赤芝的抑制作用 方法同上述，ClO2浓度为0.1%,5.0%，每个浓度设3个重复。接入赤芝菌丝，置于28?恒温培养，隔天观察菌丝生长情况，培养10 d。 2.3 ClO2对其他种灵芝及食用菌的影响根据上述实验结果，确定培养赤芝时 ClO2的最适浓度为0.7%。在斜面培养基中，加入 ClO2，使其最终浓度为0.7%。接入其他灵芝菌和食用菌，每种菌种设3个重复，培养8, d。 2.4 ClO2对灵芝摇瓶培养的影响 将葡萄糖、蛋白胨培养基1 000ml装入3 000 ml三角瓶中，加入0.7% ClO2，立即用保鲜膜密封,摇匀,放置1 h，然后用灭过菌的棉塞替换保鲜膜，另设对照组，接入赤芝液体菌种，接种量10%。放入多功能三维旋混仪中培养，摇瓶温度30?、转速为150 r/min。摇瓶3,4 d，发酵液有浓厚的灵芝特有的气味，并伴有大量的菌丝球时，可终止发酵。将发酵液在100目筛网中过滤，用自来水反复冲洗，然后将菌丝体置于80?烘干至恒重，称重。以每升培养基中含菌丝干重表示(gțL-1)。
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