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首页 细菌标本片的制备及染色方法课件

细菌标本片的制备及染色方法课件.ppt

细菌标本片的制备及染色方法课件

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2019-06-05 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《细菌标本片的制备及染色方法课件ppt》,可适用于高等教育领域

技能训练细菌标本片的制备及染色方法能利用不同的材料进行细菌标本片的制备掌握常规的染色方法并认识细菌的不同染色特性实训目标酒精灯、接种环、载玻片、吸水纸、生理盐水、美蓝染色液、革兰氏染色液、瑞氏染色液、染色缸、染色架、洗瓶、显微镜、香柏油、乙醇乙醚、擦镜纸、细菌培养物(大肠杆菌、葡萄球菌等)、细菌病料、无菌镊子和剪刀、特种铅笔等仪器材料方法步骤(一)细菌标本片的制作(二)常用的细菌染色方法(三)常用染色液的配制(一)细菌标本片的制作.涂片标本的制作()涂片()干燥涂片()固定涂片.血液推片和组织抹片的制作()血液推片的制作()组织抹片的制作.涂片标本的制作()涂片取清洁载玻片一块用吸管吸取生理盐水滴置于玻片中央再将接种环在火焰上灭菌待冷后从固体培养基上挑取少许菌落置于玻片上的生理盐水中混均匀并在玻片上涂成直径约为cm的涂面要求薄而均匀。()干燥涂片在室温下自然干燥必要时将涂面向上置火焰上来回微烤使其干燥。()固定涂片干燥后将涂面向上在火焰上快速来回通过~次其温度以手背接触玻片底面感觉微烫手为宜。.血液推片和组织抹片的制作()血液推片的制作取一张边缘整齐的载玻片用其一端蘸取少许血液在另一张干净无油脂的载玻片上以deg角度均匀地推成一薄血涂片以红细胞不重叠为宜。()组织抹片的制作待检尸体经无菌手术切开胸腹腔后用经火焰灭菌的镊子夹起组织用灭菌剪刀剪下小块组织将组织切面在载玻片上等距离轻压几下使其留有组织切面的压迹。(二)常用的细菌染色方法.美蓝染色法.革兰氏染色法.瑞氏染色法.美蓝染色法在已固定好的抹片上滴加适量美蓝染色液覆盖涂面染色~min水洗吸水纸轻压吸干或晾干和镜检结果菌体呈蓝色。.革兰氏染色法()在固定好的抹片上滴加草酸铵结晶紫染色液作用~min水洗。()加革兰氏碘液作用~min水洗。()加%酒精脱色约s至min水洗。()加稀释石炭酸复红复染s左右水洗吸干后镜检。结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色革兰氏阴性菌呈红色。.瑞氏染色法细菌抹片自然干燥后滴加瑞氏染色液于涂片上以固定标本~min后再滴加与染色液等量的磷酸缓冲液或中性蒸馏水于玻片上轻轻摇晃使与染色液混和均匀min左右水洗干后镜检结果菌体呈蓝色组织细胞等物呈其他颜色。(三)常用染色液的配制.碱性美蓝染色液.革兰氏染色液.瑞氏染色液.碱性美蓝染色液甲液:美蓝g、酒精mL乙液:苛性钾溶液mL先配甲液将美蓝放入研钵中徐徐加入酒精研磨均匀后把甲、乙两液混合过夜后用滤纸过滤即成。新鲜配制的美蓝液染色不好陈旧的染色好。.革兰氏染色液()草酸铵结晶紫溶液甲液:结晶紫g、酒精ml乙液:草酸铵g、蒸馏水ml将结晶紫放入研钵中加酒精研磨均匀制成甲液然后将完全溶解的乙液与甲液混合即成。()卢戈氏碘液碘g、碘化钾g、蒸馏水ml。将碘化钾放入研钵中加入少量蒸馏水使其溶解再放入已磨散的碘片徐徐加水同时充分磨匀待碘片完全溶解后把余下的蒸馏水倒入再装入瓶中。()石炭酸复红稀释液取碱性复红酒精饱和溶液(碱性复红g溶于酒精ml中)ml和石炭酸水溶液ml混合即为石炭酸复红原液。再取原液ml和ml蒸馏水混合即成石炭复红稀释液。.瑞氏染色液取瑞氏染料g纯中性甘油ml在研钵中混合研磨再加入甲醇ml使其溶解装入中性瓶中过夜次日过滤盛入棕色瓶中保存于暗处。保存越久染色越好。课后作业写出实习报告掌握美兰染色的方法掌握革兰氏染色的方法ByeBye

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