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双波长紫外分光光度法测定红曲中洛伐他汀(Lovastatin)的含量

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双波长紫外分光光度法测定红曲中洛伐他汀(Lovastatin)的含量 《中国食品添加剂》 China Food Additives 2000 No . 4 林启寿.中草药成分化学,1977:305—3ll L.J.Porter et a1.,Phytochem,9,1363. 1970 柴田承二等.药学杂志 (目),72,1386,1952 V.V.S.M urti et a1.,Proc.Ind.Acad.Sci., 34,319. 1951 L.Horhammer et a1.,Arch.Pharm.,28& 425.1953 J.A.Mears et a1...

双波长紫外分光光度法测定红曲中洛伐他汀(Lovastatin)的含量
《中国食品添加剂》 China Food Additives 2000 No . 4 林启寿.中草药成分化学,1977:305—3ll L.J.Porter et a1.,Phytochem,9,1363. 1970 柴田承二等.药学杂志 (目),72,1386,1952 V.V.S.M urti et a1.,Proc.Ind.Acad.Sci., 34,319. 1951 L.Horhammer et a1.,Arch.Pharm.,28& 425.1953 J.A.Mears et a1.,Phytochem ., I l,4ll。l972 Studies on the M ethod of Flavones Extraction from Chinese Hawthorn Leaf & Analysis of the Basic Structure W ang W ei,Zhou Zenghui,Cui Yan,Cheng Jing (School of Chemistry and Life Science,7ianjin Normal University Tianjin,300074) ABSTRACT: The article introduced three different ways to extract flavone from Chinese hawthorn leaf. They are hot water extraction, alcohol extraction and acid precipitation.By comparing of the different ways it is found that the hot water extraction is a better way.The article analyzed the structure of total flavones with ultraviolet spec- trum and colour test etc.F1avones extracted form Ch inese hawthorn leaf by hot water ex. traction are analyzed for their basic structure. W ORDS: flavones, acid precipitation, deco mpression distillation, ultraviolet spectrum ,colour test 双波长紫外分光光度法测定红曲中洛伐他汀(Lovastatin)的含 \/ 一 / 广} f 7 文镜顾晓玲常平金宗濂 I I 7一 \ / — — (北京联合大学应用文理学院保健食品功能检测中心 北京,100083) 摘要:对紫外分光光度计测定红曲中洛伐他汀 (Lovastatin)的方法进 行研究.采用 75% 乙醇 对红 曲中的 Lovastatin超 声提取 20min.离心后用中性氧 化铝柱层析吸附上清液中的色素.一定条件下 Lovastatin不被吸附而随着洗脱液 流出. 由于Lovastatin在 246nm,254nm两波长下其吸光度之差 (A 一 正好能够代表一个特征吸收峰的峰高,并且经实验测定与 其浓度 的关系符合比尔定律.而红曲色素在此波长下 △A值极小,因此采用双波长紫外分光光度法能够排除样品经吸附层 析分离后残存色素的干扰,完成对样品中 Lovastatin含量的定量测定.在本实验条件下 6次重复测定加标样品的 回收率 为 97.5±1.38%,变异系数为 1.4%。样 品中 Lovastatin的最低检测下限为 0.65#n1/H】1.利用本实验 条件 成功 测定 了三 种红 曲发酵制品中 Lovastatin的含量。同时测定加标回收率。结果看到实测样 品的回收率都在 95% 以上,标准偏差 小于 0.2. 说明该方法具有良好的实用性.适用于中小企业对 Lovastatin产品的科研开发及产品质量控制。 关键词: 堂,塑丝地口, 长 光光 起、 虢 ·中国发酵工业协会特种功能发酵制品专业委员会资助项 目 r 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Addjtjv 2O00 No . 4 在 工业化国家 ,冠 心病是 最常见 的致 死 疾病。引起冠心病的因素很多,临床和病理 学研究 证 明,高胆 固醇血症是动脉粥 样硬化 和冠 心病 形 成 的主要 原 因 。1979年 远 腾 从 红曲霉发酵液中分离得到 Lovastatin,并发现 它是一种有效降血浆胆固醇的活性物质[1]。 这一研究成果后来被美国及欧洲许多科学工 作 者 的研 究 所证 实[21。 由于 Lovastatin来 源 于 红 曲,安 全 且抑 制胆 固醇 合成 的 机 理 清 楚 ,效果 好, 因此受 到 广泛 的重 视 和 好评 。 专家们认为 Lovastatin的发现和开发利 用, 是防止心血管病的一个突破性进展 。 人体 中约 7O% 胆固醇由体内合成,抑 制体 内过多的胆 固醇 合成 是防止心血 管病的 一 种有效途径。机体 内从 乙酰 CoA合成胆 固醇的主要代谢途径中,由羟甲基戊二酰 CoA (HMG—CoA) 还原 为二 羟 甲基 戊 酸 这 一 步反 应是合成胆固醇 的限速步骤 。催 化此步 骤 的酶是羟 甲基戊二酰 CoA还原酶[41。 由于 Lovastatin与该 酶 作 用 底 物 HMG—CoA 有 相似 结构 ,因而成 为 该酶 的竞争 性抑制 剂。 Lovastatin可阻断二羟甲基戊酸的合成 进 而抑 制胆固醇的合成。有文献报道 Lovastatin 结构中的六氢萘环是一个重要基团。由于这 一 基 团 的存 在 使 Lovastatin比 HMG—CoA 对酶有更大的亲和性,因此可以很成功的阻 断胆固醇合成从而降低血浆中的胆 固醇水 平 151。 白红 曲的发酵 产 物 中发 现 Lovastatin之 后,红曲的研究引起国内外的极大关注,国 内许多过去生产红曲色素的厂家都希望了解 自己产品中 Lovastatin含量有多少,更希望 能够 提 高 红 曲发酵 制 品 中 Lovastatin含 量。 为此,就需要有一个准确且行之有效的检测 方法。红曲样品中存在大量红曲色素 的干 扰,高效液相色谱法 由于经过高效层析 分 离, 因此 能够 准确测定 Lovastatin含量 。但 是高效液相色谱仪设备昂贵,又需要专业技 术人员操作。对于目前国内生产红曲的大量 、 r ’ ’ , — — — ~ 一 l2 一 中小企 业 显然 不 适 用 。紫外 分 光 光 度 法 简 便、快速,仪器设备相对高效液相色谱法便 宜 很多 。如果能够用 紫外分光 光度 计测定样 品中 Lovastatin含量 ,对生产厂 家 产 品质量 控 制及进 一 步 开 发研 究将 十 分 有 利 。 然而 由 于 红 曲 初 级 样 品 中 主 要 是 大 量 色 素, Lovastatin含量很 低 ,如 采 用一 般 的紫外 分 光光度法无法对样品中的 Lovastatm进行测 定 。 本实验对紫外分光光度计测定 红曲 中 Lovastatin的方法进行研究。发现高效的提 取与分离方法是能够用紫外分光光度计测定 红曲样品中 Lovastatin的先决条件,并采用 双波长紫外 分光光度法最 大限度地排除残余 色素的干扰,使应用紫外分光光度计准确测 定 红 曲发酵制 品中的 Lovastatm 含量 成 为可 能 。 1 实验材料 1.1 仪器 UV—UIs8500型双光束紫外 可见分光 光度计 (上海天美科学仪器有限公司) 1.2 试剂 Lovastatin(中国医学科学院医药生物技 术研究所);层析用 中性氧化铝 (上海五四 化 学 试剂 厂 ) 100—200目; 甲 醇 (北 京 化 工 厂) 分析纯 ;无水 乙醇 (北京化工厂)分 析纯;95% 乙醇 (北京化工厂)分析纯。 1-3 样 品 义乌红 曲粉 (由中国发酵工 业协 会特 种 功能发酵制品专业委员会提供,义乌市天然 色素实业有限公司生产) 东方红曲片 (河北涿州东方生物技术有 限公 司) 血脂康胶囊 (北京北大唯信生物科技有 限公 司) 2 实验原 理 Lovastatin易溶于 75% 乙醇 ,可 用其 作 为从红曲中提取 Lovastatin的溶剂。采用超 声 提 取 的方 法 以 提 高 Lovastatin的 提 取 效 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Additives 2000 No . 4 率。超声 提取后 离心分离 除去不溶 杂质。 Lovastatin和色素等可溶性杂质混于上清液 中,色素等可溶性杂质会干扰 Lovastatin比 色 测定 ,需 要 用 吸 附柱 层析 吸 附 色 素 和 杂 质。一定条件下 Lovastatin不被吸附而 随着 洗 脱 液 流 出。 由 于 Lovastatin在 246nm、 254nm 两波长下其吸光度之差 (A 一A ) 与其浓度的关系符合比尔定律。而红曲色素 在此波 长下 △A极小, 因此 采用双波长 紫外 分光光度法能够排除红曲色素干扰,完成对 样 品中 Lovastatin含 量的定量测定 。 3 实验方法与结果 3.1 吸 附层 析柱的制备 将 100—200目中性 氧 化铝 在 100℃ 活 化 30min,冷却至室温,取 5g用 75% 乙醇浸 泡悬浮后装人 内径为 0.9cm的柱子中,用 75% 乙醇 25ml淋洗 柱子 。 3.2 分析 波长 的选 择 分别称取不含 Lovastatin的红曲色素两 份各 0.300g,其中一份加人 0.2mg Lovastatin 标 准 品,再 称 取 同样 量 的 Lovastatin标 准 品,三份样品分别用 95% 乙醇定容到 lOml, 均超声提取 20min,离心 (400r/min) 10min, 取上 清液 4ml浓缩到 近 0.5ml,分 别加 人 到 3 个 层 析 柱 中, 用 95% 乙 醇 洗 脱 , 收 集 第 4—7ml流 出液 ,用 紫外 分 光 光度 计 样 品 进 行波长扫描。标 准 Lovastatin、红 曲色素、 及红 曲色素加标 准 Lovastatin三 个样 品 的紫 外 吸收曲线见 图 1。从 图 1中可 以看 到 ,标 准 Lovastatin在 228、238、246nm 处 各有 一 个 特 征 吸收 峰 (见 图 1中的 C)。238nm 处 吸收值最大;不含 Lovastatin的红 曲色素在 200—260nm 整个扫描范围都有很强烈的紫 外吸收 (见 图 1中的 B),在 220—240nm 吸 光度有很 大变 化 ,而 246—254nm 吸光 度 的 变化很小;含 Lovastatin的红曲色素其吸收 曲线实际上是红曲色素吸收曲线与 Lovastatin 吸收曲线 的加 和 (见 图 1中 的 A)。尽 管理 论上 Lovastatin对 238nm波长紫外光吸收最 波长(nm) 图 1 Lovastatin、 不含 Lovastatin 的红曲色素及含 Lovastatin 红曲色素的光吸收曲线 A=含 Lovastatin的红曲色素 B:不含 Lovastatin的红曲色素 C: l_ovastatin 强烈 ,用 238nm 波 长测 定 灵敏 度 最 高 。但 由于色素的干扰,如果使用 238nm波长测 定,所测出的吸光度值实际上是红曲色素与 Lovastatin共同产生的。若将其作为Lovastatin 的含量 ,则 即引起了很大正误 差。产生被测 样 品中 Lovastatin含 量很 高 的假 象 。从 图 1 中可 以看到 ,246nm 是 Lovastatin的另 一个 吸收峰 ,其 峰谷吸 收波 长 为 254nm。246nm 与 254nm 的 吸光 度 之差 正 好反 映 出这一 吸 收峰的峰高。尽管色素在此波长范围仍有很 强 的光 吸收,但 在 246nm、254nm 的波长 下 测定其吸光度的改变量 (△A)却很小。因 此 用分 光光度计测定样 品 中 Lovastatin含 量 时应 采用 双 波长 测定 的方 法 。检 测 波 长 为 246nm和 254nm。用两个波长之差 (A246一A254) 来计 算含量 。这样 就排除 了样 品经吸附层析 分离后残存色素的干扰。使得用紫外分光光 度计定量测定红 曲样 品 中 Lovastatin含 量 成 为可能 。 3.3 提取溶剂 的选 择 一 13 — 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食 品添 加剂》 China Food Additives 2000 No . 4 Lovasmfin在 无水 甲醇、 无水 乙 醇 、 甲 醇、95% 乙醇、75% 乙醇等溶剂中都能较 好的溶解,以下实验对这几种溶剂的提取效 果进 行 比较 。 精密称取 30.Omg义乌红曲分别用无水 乙醇 、95% 乙醇 、75% 乙醇 、无水 甲 醇 和 甲醇 定容 到 lOml,超 声 提 取 20min,离 心 (4000r/rain)lOmin。取 4ml上清液浓缩到 近 0.5ml,经柱层析分离后,用紫外分光光度 计测定洗脱液中Lovastatin含量。实验重复 7 次 ,结果 见表 1。 表 1 不同溶剂提取义乌红曲中 Lavas~fin的结果 (喇 P值 为 F_一种 与上 一种 溶剂 的 比较 。 表 1结 果 表 明 ,75% 乙 醇 的 提 取 效 果 最 好。 3.4 标 准 曲线的绘制 精密 称取 3.2mg Lovastatin标 准 品溶 于 50ml 75% 乙醇,配成 64ug/ml的溶 液。分 别 量 取 0.5、 1.0、 2.0、 3.0、 4.0、 5.0、 6.0、 8.0、9.Oml定 容 到 lOml,使其 浓 度 分别 为 3.2、 6.4、 1 2.8、 19.2、 25.6、 32.0、 38.4、 51.2、57.6和 64~g/ml。用双波长 方法测定 其含量,并将结果绘制标准曲线如 图 3所 示 ,其线性 回归方程为 Y=O.0363X+0.0032, 值为0.9999。表明Lovasmtm在 3.2—64ug/ml 的浓度范 围 内与 △A 槲一瑚 呈 良好 线 性 关 系,符合比尔定律。 3.5 方法回收率和精密度的测定 称取 30.Omg义乌红曲用 75% 乙醇定容 到 lOml作 为 未 加 标 样 品。 称 取 2.1mg Lovastatin标 准 品用 75% 乙醇定容 到 50ml, 摇匀后精密量取 5ml放人一 10ml的容量瓶 一 14 一 、 < 甘 浓度(u g/m1) 图2 Lovastatin标准曲线 中,再 同样称取 30.Omg义 乌 红 曲加 人 其 中,并定容到 lOml作为加标样品。两份样 品平行操作,经超声提取、离心、浓缩、柱 层析分离等步骤后测定 Lovasmtm含量,重 复 3次; 相 同 条 件 下 再 次 重 复 , 但 标 准 Lovastatin加入量为 0.23mg,结果见表 2。 表 2 方法回收率和精密度测定结果 (n=6) 结果表明,用此方法测定 义乌红 曲中 Lovastatin可 以获得较好 的回 收率 和 重复 性 。变异系数为 1.4%。 3.6 紫外分 光光度法 测定红 曲 中 Lovastatin 含 量的最低检 出限 首先测定 UV—VIS8500型双光束紫外可 见分光光度计的仪器噪声。在两个相同的石 英 比色杯 中放人 75% 的 乙醇, 测定 其 在 246、254nm 的吸光值 12次, 算 出 246与 254nm时的吸光值 之差,并求出 l2次的平 均值 0.0030作为仪器噪声值,理论 上利用 双波 长法测定 样品 中 Lovastatin含 量 得到 的 吸光值之差至 少要 大 于 噪 声值 的两 倍 即 0.O060。 分别称取不同量的红曲同样定容到 lOml, 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Additiv 2000 No . 4 同样超 声 、离 心、 浓 缩 、 上 柱、 洗 脱、 收 集 、测定 ,最后得 出检测下 限结果见 图 3。 波 长 (nm) 图3 Lovastatin最低检测下限吸收光谱 A是红曲样品 Lovastatin浓度为 0.65/~/ml时的吸收光谱 B是将 A中样品稀释 0.5倍后 Lovastatin的吸收光谱 图 3中 的 A是 义乌 红 曲样 品经 前 处理 后 ,测 定 浓 度 为 0.65~g/ml Lovastafin的 光 吸收 曲线。从 图中可 以分 辨 出 Lovastatin的 三个 特 征 吸 收 峰 。 此 时 A, 一A, 的 值 为 0.0229。实 验 发现 若 样 品 中 Lovastatin低 于 此浓 度,仪器将不 能检 测到 Lovastatin的特 征 峰。 图 3中 的 B为 义乌 红 曲样 品 经 前 处 理并稀释后测定的光吸收曲线。虽然此条件 下 A 一A 的吸光值 为 0.0069即仪器噪声 的两倍 以上 ,但 由于在 吸收曲线 上不能看到 Lovastatin的三个特 征 峰 ,不能 认 为检 测 到 了样 品 中的 Lovastatin。 因此 ,尽 管理 论上 测量值大于噪声值的两倍被认为有效,但在 本实验条 件 下 ,Lovastatin的检 测 下 限还是 应定为 0.65FLg/m1。 3.7 样品 中 Lovastatin含量 的测定 在上述实验条件下分别测定义乌红 曲、 东方 红曲 片和 血脂康 中 Lovastatin含 量 , 以 检验实验方法的实用性。其中义乌红曲重复 7次 测 定并 同时做 加 标 回收 率 (n=3); 东 方红曲片重复 5次测定,并同时做加标回收 率 (n--3);血脂康 重复 测 定 5次 并 同时 做 加标回收率 (n=3)。结果见表 3、图 4和 图 5。图 5是 标准 Lovastatin的光吸收 图谱 。 表 3 样品中 Lovastafln含量的测定结果 (mg/g)(X ±SD) 波长 (nm) 图4 义乌红曲样 品经前处理 后的光吸收曲线 波长 (rim) 图 5 标准 Lovastatin的光吸收曲线 将 图 4和 图 5比较 ,可 以看到 样 品经 前 处理后 ,尽 管绝大部分 色素 干扰 已经 祛除 , 但 还残 存有 少量 的干扰 ,表 现 为 254nm 波 一 1 5 — 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 China Food Additives 2000 No.4 长处 样 品 的光 吸 收值 比标 准 Lovastatin大 。 在这一点 ,标 准 Lovastatin已经没 有 光 吸 收 (吸光度值 接近于零 ),样 品的 吸光 度值 来 自色素的干扰。因此在采用吸附层析后仍然 要用双波长法测定是必需的。从表 3可以看 到实测样 品的回收率都在 95% 以上,标准 偏差小于 0_2。说 明该方法具有 良好的实用 性 。适用于 中小企 业对 Lovastatin产 品的 科 研 开发及 产品质量控制 。 4 讨 论 4.1 用 紫 外 分 光 光 度 计 测 定 样 品 中 Lovastatin,前处理工作 十分重 要 。本 实验 在 吸附剂的选择 上, 曾将活性 炭、高岭 土、硅 藻 土、硅胶 、 羟基 磷 灰 石 与 中性 氧 化 铝 比 较。结果是 中性 氧化铝分离色素和 Lovastatin 的效果最好。活性炭虽能很好的除去色素, 但 经 实 验 测 定 , 它 同 时 也 吸 附 了 大 量 的 Lovastatin,且不易洗脱下 来,其它几种吸附 剂对红曲色素的吸附作用都不理想。 4-2 采用超声提取样 品 中的 Lovastatin是省 时、省力的好方法 。本实验 中使 用的样 品量 较少 ,提取溶剂相对较多。在这样条件下 ,将 样 品从提取 5min到 1h取 5个时间段进行比较 , 发现超声提取 10rain就能提取完全 为更加 保险,本实验采用了 20min作为提取时间。 4-3 对于吸附层析洗脱 剂的收集量 问题, 实验 中用 0.05g义乌红 曲 (用 量 高于 一 般情 况下 的取样 量) 经超 声 提取 、 离心 、浓 缩、 层析柱处理,并从加样后 开始收集洗脱液, 进行紫外扫描。在开始的第 3ml一8ml以后 没有 发 现 Lovastatin,在 第 4—7ml中均 有 Lovastatin.因此在确定收集体积时,选择 了 第 4—7ml共 4ml,以确保 Lovastatin完 全被 收集。在对实际样品进行测定时,取样量低 于 0.0 ,因此 收集 第 4~7ml这 4ml洗 脱 液,样品中的 Lovastatin将完全包含在 内。 样 品上柱 前浓缩的 目的是为 了减 少层 析过程 中的扩散 ,取得更 好的分离效果 并缩小洗脱 液收集体积。浓缩宜采用冷冻真空法,如用 一 16 一 沸水浴 加热会使 Lovastatin有一定损 失。 4.4 对于色素含量很 高而 Lovastatin含 量 相 对很 少 的样 品。 在 用 75% 乙醇溶 解 、超 声提 取、离心后 ,可将样 品浓缩近干 ,之后 用 无水 乙醇溶解 。再用 无水 乙醇为流动相进 行 中性 氧化 铝层析分 离。 (中性 氧化 铝 的处 理 及层析柱 的平衡 也相 应 用无 水 乙醇 。) 由 于采用 无水 乙醇 为 流 动相 ,极性 比 75% 乙 醇更低 ,因此流 出液 中的色素更少 ,更有利 于紫外分光光度计的测定。 4.5 尽管本实验中采用了吸附层析的前处 理方法 ,但经这样处理 的样 品 中还是 会存在 残存 的色素 ,并在检 测波长下有光 吸收。遇 到这样 多组分吸 收曲线部分重叠 的情 况 (见 图 1), 如用 经典 的 (单 波长 )分 光光 度 法 进行定量分析,必须解联立方程,工作烦琐 且有 较大误 差。而 且多组分吸收 曲线若 绝大 部 分重叠就 不能用经典 的 分光 光度 法 测 定。 为 了解决上 述问题 ,在经典分光光度 法的基 础 上,双波 长法 显著提高 了分光 光度法的灵 敏 性和 选择性。 因此 ,本 实验 选用 了双波长 分 光光度法 测定 以减少 色素等 杂质的干扰 。 4.6 实验 中曾试 图用 干扰 曲线扣 除 法排 除 紫外测定 中色素 的干扰 。经实验发现 ,干扰 曲线扣除法也能够有效排除色素干扰。但与 双波长法比较,操作烦琐,且回收率并不高 于双 波长法 。因此 ,本 实验选择 了双波长法 解 决色素干扰 的问题 。 4.7 本 实验 方法 样 品 虽 经 吸 附 层 析 分 离, 但这样的前处理方法并不能将 Lovastatin与 它 的 类 似 物 分 离 。 虽 然 这 些 类 似 物 与 Lovastatin相 比含 量很 少 。但 还 是 会使 测定 结果略有偏高。这些类似物大多也具有 与 Lovastatin相 同的生 理活 性 。因此 本方 法 所 测定的结果严格来讲包括了 Lovastatin以及 它的类似物。如要精确了解样品中Lovastatin 的含量 ,可 用高效 液相 色谱 将 Lovastatin与 它的 类 似物 彻 底分 离后 再 用 紫外 检 测 器 对 Lovastatin定 量分析 。 维普资讯 http://www.cqvip.com 《中国食品添加剂》 Chma Food Additives 2000 No . 4 参 考 文 献 l Endo,A_Monacolin K,A new hypochlesterolemic agent produced by a Monascus species , J.Antibiotics,1977,32:853—854 2 Al~xts,A_W .Mevinolin,A highly potent competitive inhibitor of hydmxymethylgutaryl—ooenzyme A reductase and a cholesterol agent.Proc.Nat1.Acad.Sci.US八 1980.77:3957—3961 3 苏学惠 .新型降血脂药物——羟甲基戊二酰辅酶 A还原酶抑制剂 .国外医药抗生素分册,1994,15(41:305—308 4 沈同、王镜岩等 .《生物化学》.北京.高等教育出版社.第 2版下册,1991:l94—198 5 张俊杰.赵树欣,赵华等 .红曲霉及其生理活性物质 .食品研究与开发,1998,19:14-18 Determination of Lovastatin Content in M onascus by Double W ave Length UV Spectrophotometry W en Jing,Gu Xiaoling,Chang Ping,Jing Zonglian (Center of Functional Inspection of Health Food,College of Applied Science and Humanities,Beijing Union University Beijing,100083) ABSTRACT:An UV spectrophotometry method for determination of Lovastatin in M onascus was studied.Using 75% ethanol for supersonic extraction of Lovastatin from M onascus was carried out for 20 mi nutes. After centrifugation, the pigment of the supernatant was adsorbed by a neutral alum inum oxide column. Under a particular condition the Lovastatin was not adsorbed and eluted with the eftuent.It was ob— served,that the absorbency difference between 246nm and 254nm (A246一A245)could aN- press a characteristic absorb peak of Lovastatin,and the relationship between the absorbency variation and its concentration iust obeyed the Bear Law.The above experi. ments indicated.using double wave length UV spectrophotometry co uld exclude the disturbance of the remaining pigment、and co uld be successfully used fo r Lovastatin quantity analysis.According to 6 repeated determi nation of the Lovastatin samples plus standard sample.their reco very rates were 97.50± 1.38% and the absorb variation was 1.4%.The minimum allowable detection quantity of Lovastatin was 0.65pg/nl1.Under the same experimental conditions as mentioned above,the co ntent of Lovastatin in three kinds of M onascus fermentation products were determined.For detection of reco very rate the standard Lovastatin was added at the same time.The results showed that the recovery rates of these samples were all above 95% and the standard deviation was less than 0.2.The results revealed that this method may provide a practical value for detection of Lovastatin content.It iS useful in the large and medium sized enterprises fo r co ntrolling and testing the quality of the products. KEY W O RDS:monascus,lovastatin,double wave length UV spectrophotometry 一 17 — 维普资讯 http://www.cqvip.com
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