消毒剂效力验证方案

分发号： 起 草 人 起草日期 共 8 页 第 1 页 部门审核 审核日期 质量部审核 审核日期 批 准 人 批准日期 生效日期 替 代 － 分发部门 质量部、原料药车间、综合制剂车间、粉针车间 消毒剂效力验证 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 目录 1． 概述 2． 验证目的 3． 验证人员 4． 验证内容 4.1 验证准备 4.2 中和剂毒性和效力试验 4.3 消毒剂最佳消毒杀菌效果的时间确认 4.4 消毒剂效力特性试验 4.5 表面试验确认 5. 偏差分析 6. 再验证周期 7. 最终评价及验证 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 8. 验证 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 9. 时间进度表 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8 页 第 2 页 1． 概述： 消毒剂的消毒效果评价，是以消毒剂与微生物接触后，测定残留的微生物数量，以杀灭率表示结果，对消毒剂杀灭效果进行评价。为了准确评价消毒剂对微生物的杀菌作用，在消毒试验中要求选择加入适当的中和剂。中和剂的作用就是不仅能及时中止消毒剂的杀菌作用，而中和剂本身及其与消毒剂的反应产物应对微生物无抑菌或杀菌作用，且对微生物的生长无影响。 2. 验证目的：通过特定的微生物与某消毒剂在 规定 关于下班后关闭电源的规定党章中关于入党时间的规定公务员考核规定下载规定办法文件下载宁波关于闷顶的规定 的使用浓度下，接触规定的时间后，对微生物进行培养计数，考察消毒剂的消毒、杀菌效果。 3. 验证人员： 姓 名 所在部门 职务 职 责 负责组织协调及方案的审核 负责方案的起草，安排实施 负责验证各项数据的记录整理 方案实施，数据测定、记录 方案实施，数据测定、记录 负责本方案在原料车间的实施 负责本方案在粉针车间的实施 负责本方案在综合制剂车间的实施 4. 验证内容： 4.1 验证准备：试验均需在百级层流保护下进行验证试验。 4.1.1 试验所用消毒剂： 消毒液的名称 新洁尔灭 乙醇 甲酚皂 配制消毒液的浓度 0.1% 75% 3% 原液的浓度 5% 95% 50% 原液的规格 500ml 500ml 500ml 原液的来源 山东利尔康消毒科技有限公司 天津市北方天医化学试剂厂 河北京京制药厂 4.1.2试验所用菌种：所用菌种均由中国药品生物制品所检定所提供。 金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]， 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8 页 第 3 页 铜绿假单胞菌[CMCC（B）10104]， 枯草芽胞杆菌[CMCC（B）63501]， 生孢梭菌[CMCC（B）64941]， 白色念株菌[CMCC（F）98001]， 黑曲霉[CMCC（F）98003] 4.1.3试验所用培养基：所用培养基均由中国药品生物制品所检定所提供。 培养基名称 批号 营养琼脂培养基 070523 硫乙醇酸盐流体培养基 070625 改良马丁培养基 060420 改良马丁琼脂培养基 060309 营养肉汤营养基 060323 4.1.4试验所用仪器设备： 仪器名称 型 号 厂 家 检定效期至 集菌仪 HTY-2000A型 杭州泰林 培养箱 HH-B11-600 天津市实验仪器厂 培养箱 HH-B11-500 国营创新医疗器械厂 培养箱 JP-600 武汉武昌实验仪器厂 培养箱 GHP-9160 上海博讯实业有限公司医疗设备厂 4.1.5菌液制备： 4.1.5.1取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许接种至营养肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时；取经33℃培养23小时的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单孢菌肉汤培养物1ml，加9ml生理盐水，10倍稀释至约10-5～10-7之间，约为50～100cfu/ml，备用。 4.1.5.2将生孢梭菌的新鲜培养物少许接种至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24小时；取经33℃培养23小时的生孢梭菌硫乙醇酸盐流体培养基 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8 页 第 4 页 的培养物1ml，加9ml生理盐水，10倍稀释至10-5～10-7之间，约为50～100cfu/ml， 混匀备用。 4.1.5.3将白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁琼脂培养基中，23～28℃培养24～48小时。取经25℃培养46小时的白色念珠菌真菌斜面培养物，加入生理盐水4ml洗下孢子，吸出转移至空白试管作为原液，取1ml加9ml生理盐水，10倍稀释至10-5，约为50～100cfu/ml，混匀备用。 4.1.5.4将黑曲霉菌斜面的新鲜培养物接种至改良马丁琼脂斜面培养基上，23～28℃培养5～7天，使大量的孢子成熟。取经25℃培养7天的黑曲霉真菌斜面培养物，加入生理盐水4ml洗下孢子，吸出转移至空试管作为原液，稀释至10-4，约为50～100cfu/ml，混匀备用。 4.1.6 菌落计数：分别取上述黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌菌液1ml加入培养皿，每种菌液平行做2个平皿。注入营养琼脂培养基约15ml。30～35℃培养48小时。分别取上述白色念珠菌、黑曲霉菌菌液1ml加入培养皿，每种菌液平行做2个平皿。注入改良马丁琼脂培养基约15ml，23～28℃培养72小时。菌液计数结果分别见附表一和附表二。 4.1.7 中和剂、消毒液的制备： 4.1.7.1中和剂的制备： 中和剂 聚山梨酯80 卵磷脂 无菌纯 水用量 配制量 0.1%聚山梨酯80（用于醇类） 1%的卵磷脂+0.1%聚山梨酯80 （用于酚类） 配制人： 复核人： 配制日期： 年 月 日 4.1.7.2消毒液的制备： 消毒剂名称 消毒剂浓度 原液浓度 无菌纯水用量 消毒剂用量 配制量 新洁尔灭 0.1% 5% 乙醇 75% 95% 甲酚皂 3% 50% 配制人： 复核人： 配制日期： 年 月 日 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8页 第 5 页 4.2中和剂毒性和效力试验： 4.2.1 中和剂毒性试验： 4.2.1.1 试验组：将上述制备好的10～100cfu/ml的微生物加入到10ml中和剂中，作用10min后，用薄膜过滤法过滤，用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗（100ml/膜）后，取出滤膜，菌面朝上，细菌贴于营养琼脂培养基平板上，置30～35℃恒温培养箱培养48小时；真菌贴于改良马丁琼脂培养基平板上，置23～28℃恒温培养箱培养72小时，取出，观察计数。 4.2.1.2 菌液组：直接加10～100cfu/ml微生物于培养基中，在相应温度的培养箱内培养，取出，观察计数。 4.2.1.3 回收率＝（试验组菌落数/菌液组菌落数）×100% 4.2.3.4 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 要求：回收率应≥70%。 4.2.3.5中和剂毒性试验结果见附表三。 4.2.2中和剂效力试验： 4.2.2.1中和产物：将中和剂1ml与消毒剂9ml混和，即得。 4.2.2.2 试验组：将上述制备好的10～100cfu/ml的微生物加入到10ml中和产物中，作用10min后，用薄膜过滤法过滤，用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗（100ml/膜）后，取出滤膜，菌面朝上，细菌贴于营养琼脂培养基平板上，置30～35℃恒温培养箱培养48小时；真菌贴于改良马丁琼脂培养基平板上，置23～28℃恒温培养箱培养72小时，取出，观察计数。 4.2.2.3 菌液组：直接加10～100cfu/ml微生物于培养基中，在相应温度的培养箱内培养，取出，观察计数。 4.2.2.4 回收率＝（菌液组菌落数-试验组菌落数）/菌液组菌落数×100% 4.2.2.5标准要求：回收率应≥70%。 4.2.2.6中和剂效力试验结果见附表四。 4.3消毒剂最佳消毒杀菌效果的时间确认： 4.3.1将待测消毒剂用无菌纯水稀释至待测浓度，备用。 4.3.2将上述制备好的10～100cfu的微生物和10ml的消毒剂直接混合，在1分钟、3分钟、5分钟、10分钟，这四个时间间隔条件下，采用薄膜过滤法过滤，用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（冲洗液用量500ml/膜）冲洗后，取出滤膜，菌面朝上，细菌贴于营养琼脂培养基平板上，置30～35℃恒温培养箱培养48小时；真菌贴于改良马丁琼脂培养基平板上，置23～28℃恒温培养箱培养72小时，取 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8页 第 6 页 出，观察计数。结果见附表五。 4.3.3阳性对照：以无菌纯水代替消毒剂，同时同以上步骤操作。 4.4消毒剂效力特性试验： 4.4.1用无菌纯水将消毒剂稀释至规定浓度，分装到10ml无菌试管中。 4.4.2将稀释至106~108cfu/ml的微生物接种至盛有10ml消毒剂的试管中，使接种后的浓度大于104cfu/ml（原因：消毒就是要让微生物降低10-3），混合后按最 佳杀菌时间放置（并在试管外标注好最佳杀菌时间）。 4.4.3然后把菌—消毒剂混合液倒入100ml中和剂中，混合均匀后，按薄膜过滤法过滤，再用100ml的中和剂冲洗滤膜3次。 4.4.4取出滤膜，菌面朝上，细菌贴于营养琼脂培养基平板上，置30～35℃恒温培养箱培养48小时；真菌贴于改良马丁琼脂培养基平板上，置23～28℃恒温培养箱培养72小时，取出，观察计数。结果见附表六。 4.4.5阳性对照：以无菌纯水代替消毒剂，同时同以上步骤操作。 4.4.6标准要求：与阳性对照比较，微生物数量应下降3个对数值（细菌芽胞至少2个对数值）。 4.5表面试验确认： 4.5.1洁净室擦拭条件： 试 验 部 位 质量部 无菌Ⅲ室：墙壁（以西墙为主）； 地面（以东北角为主）；工作台面；集菌仪上表面；无菌检验员手指；启盖器 原料车间 干粉间：墙壁（以西墙为主）； 地面（以东北角为主）；取样台面；干粉机外表面；出料工手指；出料手套；料铲 粉针车间 非青线分装间：墙壁（以北墙为主）；地面（以西北角为主）； 1号分装机台面、分装机长手指；盛胶塞用不锈钢桶 综合制剂车间 普线制粒干燥间：墙壁（以西墙为主）； 地面（以东北角为主）；压片机转台；制粒工手指；铝塑包装机下成型模具；周转桶把手 所用器具 无菌镊子、无菌生理盐水、灭菌脱脂棉球 擦拭面积 25cm2 4.5.2 检验供试品（质量部）或分装产品（粉针车间）或出料（原料车间）或制粒干燥（综合制剂车间）前对洁净室表面的擦拭试验：分别用无菌生理盐水湿润灭菌的脱脂棉球，平稳而缓慢地擦拭试验部位的表面，在向前移动的同时将其从 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8 页 第 7 页 一边移动到另一边，然后将擦拭后的棉球放入培养基中培养计数。 4.5.3 检验供试品（质量部）或分装产品（粉针车间）或出料（原料车间）或制 粒干燥（综合制剂车间）后对洁净室表面的擦拭试验：分别用无菌生理盐水湿润灭菌的脱脂棉球，平稳而缓慢地擦拭试验部位的表面，在向前移动的同时将其从一边移动到另一边，然后将擦拭后的棉球放入培养基中培养计数。 4.5.4 用制备好的消毒剂在最佳消毒杀菌时间内对检验供试品（质量部）或分装产品（粉针车间）或出料（原料车间）或制粒干燥（综合制剂车间）后的洁净室 进行消毒杀菌，然后分别用湿润的灭菌脱脂棉球，平稳而缓慢的擦拭试验部位的表面，在向前移动的同时将其从一边移动到另一边，最后将擦拭的棉球放入培养基中，培养计数。结果见附表七。 4.6消毒剂效力验证小结 小结人： 日期： 5.偏差分析：在方案的执行过程中遇到任何短缺的数据或异常情况应被作为偏差 记录下来，并经调查分析，出具解决方案，由质量部审核，质量负责人批准。（附表八） 6.再验证周期: 正常情况下，消毒剂再验证周期为一年。 7.最终评价及验证报告: 消毒剂效力验证确认后，对试验结果进行综合分析，并作出评价。验证过程中如出现偏差，应填写偏差报告，由验证结果及偏差报告综合分析写出验证报告，作出验证结论，可以用于公司质量部、原料车间、粉针车间及综合制剂车间工艺生产的消毒杀菌。 8.验证记录: ·细菌培养菌落计数 附表一 ·真菌培养菌落计数 附表二 ·中和剂毒性试验结果 附表三 分发号： 文件名称 消毒剂效力验证方案 共 8 页 第 8 页 ·中和剂效力试验结果 附表四 ·消毒剂最佳消毒杀菌效果的时间确认结果 附表五 ·消毒剂效力特性试验结果 附表六 ·表面挑战试验结果 附表七 ·偏差报告 附表八 9.时间进度表 验 证 工 作 内 容 起 始 时 间 附表一 细菌培养菌落计数 菌 种 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 铜绿假单胞菌 生孢梭菌 第 代 第 代 第 代 第 代 1号 2号 1号 2号 1号 2号 1号 2号 计数(CFU) 均值(CFU) 试验人： 复核人： 配制日期： 年 月 日 附表二 真菌培养菌落计数 菌 种 黑曲霉菌 白色念珠菌 第 代 第 代 1号 2号 1号 2号 计数(CFU) 均值(CFU) 试验人： 复核人： 配制日期： 年 月 日 附表三 中和剂毒性试验结果 试验日期及时间 中和剂名称 试验菌 第 代 试验 次数 菌落计数 回收率 （%） 试验组 菌液组 1 2 平均 1 2 平均 金黄色葡萄球 菌 第 代 1 2 3 铜绿假单胞菌 第 代 1 2 3 枯草芽胞杆菌 第 代 1 2 3 生孢梭菌 第 代 1 2 3 黑曲霉 第 代 1 2 - 3 白色念株菌 第 代 1 2 3 操作人： 复核人： 结果： 评价： 评价人： 评价日期： 年 月 日 附表四 中和剂效力试验结果 试验日期及时间 中和剂名称 试验菌 第 代 试验 次数 菌落计数 回收率 （%） 试验组 菌液组 1 2 平均 1 2 平均 金黄色葡萄球 菌 第 代 1 2 3 铜绿假单胞菌 第 代 1 2 3 枯草芽胞杆菌 第 代 1 2 3 生孢梭菌 第 代 1 2 3 黑曲霉 第 代 1 2 - 3 白色念株菌 第 代 1 2 3 操作人： 复核人： 结果： 评价： 评价人： 评价日期： 年 月 日 附表五 消毒剂最佳消毒杀菌效果的时间确认结果 试验日期及时间 消毒剂名称 消毒剂浓度 试验菌 菌落计数 试验组 阳性对照 1分钟 3分钟 5分钟 10分钟 金黄色葡萄球菌 第 代 铜绿假单胞菌 第 代 枯草芽胞肝菌 第 代 生孢梭菌 第 代 白色念株菌 第 代 黑曲霉 第 代 操作人： 复核人： 结果： 评价： 评价人： 评价日期： 年 月 日 附表六 消毒剂效力特性试验结果 试验日期及时间 消毒剂名称 消毒剂浓度 试验菌 试验 次数 菌落计数结果 下降对数值 试验组 菌液组 1 2 平均 1 2 平均 金黄色 葡萄球菌 第 代 1 2 3 铜绿假 单胞菌 第 代 1 2 3 枯草芽胞 杆菌 第 代 1 2 3 生孢梭菌 第 代 1 2 3 白色 念株菌 第 代 1 2 3 黑曲霉 第 代 1 2 3 操作人： 复核人： 结果： 评价： 评价人： 评价日期： 年 月 日 附表七 表面试验确认结果 车间（部门） 消毒液的配制 消毒剂名称 消毒剂浓度 原液浓度 无菌纯水用量 消毒剂用量 配制量 配制人： 复核人： 配制日期： 年 月 日 擦拭地点 前的菌落计数 后的菌落计数 消毒杀菌前 消毒杀菌后 操作人： 操作日期： 检验人： 复核人： 检验日期： 结果： 评价： 评价人： 评价日期： 年 月 日 附表八 偏差报告 验证方案： 编号： 偏差描述： 发现者： 确认者： 日期： 日期： 解决方案： 实施部门负责人： 质量部审核： 日期： 日期： 质量负责人： 日期： 备注：