HIV感染者_AIDS患者外周血CD_38_省略_子在CD_4_CD_8_T淋巴

#论著# HIV感染者/ AIDS患者外周血 CD38 HLA-DR分子 在 CD+4 CD+8 T淋巴细胞上的表达 汪习成1,吴昊2,李太生3,冯鲜妮2,徐斌2, 邱志峰3,徐莲芝2, 汪俊韬2 ( 11 淮安市第四人民医院,江苏 淮安 223300; 21 首都医科大学附属北京佑安医院, 北京 100054; 31 北京协和医院,北京 100730) 摘要: 目的 观察国内艾滋病病毒 ( HIV) 感染者/艾滋病( AIDS) 患者外周血 CD38、HLA-DR 分子在 CD+4 、 CD+8 T 淋巴细胞上表达的变化, 并探讨这些变化的临床意义。方法 用流式细胞仪检测 51 例正常对照、14 例 HIV 感染者和 36 例 AIDS 患者的外周血 CD+4 、CD+8 T 淋巴细胞表面的CD38、HLA-DR 分子的表达,用分枝 DNA( bDNA) 法检测 11 例 HIV感染者和 18 例 AIDS患者的血浆病毒载量。结果 CD+4 HLA-DR+ 细胞百分比显示, AIDS 组显 著高于正常组及 HIV 组; CD+8 HLA-DR+ T 细胞百分比显示 HIV 组与 AIDS 组间无差异, 而它们均显著高于正常 组。CD+8 、CD38 + 细胞百分比则是 AIDS 组> HIV组> 正常组, CD+8 CD38+ 、CD+8 HLA-DR+ 、CD+4 HLA-DR+ 细胞百 分比与病毒载量显著正相关。结论 在 HIV 感染过程中, HLA- DR+ 、CD38 + 在 CD+4 、CD+8 T 淋巴细胞上的表达均 显著增加,反映 T 淋巴细胞异常激活; 尤其是 CD+8 CD38+ 细胞百分比随着疾病进展逐渐升高, 预示疾病进展程度。 在评价H IV 感染者和 AIDS 患者的免疫状况时,不仅要考虑免疫细胞数量和功能的变化, 还应考虑免疫细胞的激 活水平。 关键词: 艾滋病病毒感染者/艾滋病患者; CD38 ; HLA-DR; 病毒载量 中图分类号: R512191; R392. 11 文献标识码: A 文章编号: 1007- 3523( 2003) 01- 0001- 04 Expression of CD38 HLA-DR on CD + 4 and CD + 8 T lymphocytes in peripheral blood of people living with HIV/ AIDS WANG Xi-cheng , W U Hao , L I Tai-sheng, et al1 ( Div ision of Inf ectious D iseases , Beij ing Youan Hosp ital , Beij ing 100054 , China) Abstract: Objective This study was designed to investigate the change in expression of CD38 HLA-DR on CD+4 and CD+8 T lymphocytes in peripheral blood of people liv ing with HIV/ A IDS and to explo re clinical significance of such change1Methods T he plasma viral load of 11 asymptomatic HIV infected individuals and 18 AIDS patients was detem- ined by bDNA1Expression of CD38 HLA-DR on peripheral blood CD+4 and CD+8 T lymphocytes was analysed by flow cy- tometry in 51 healthy blood donors, 14 asymptomatic HIV infected individuals and 36 AIDS patients1Results Percentage of CD+4 HLA-DR + cells in the A IDS group w as shown to be higher than in the HIV group and normal con- tr ols1 Percentag e of CD+8 HLA-DR+ cells was higher in both HIV and AIDS groups than in normal controls1 The percent- age of CD+8 CD38 + cells in AIDS g roup> in HIV group> normal controls1 There w ere positive correlations betw een per- centages of CD+8 CD38 + , CD8 HLA-DR + , CD+4 HLA-DR + cells and plasma vir al load1Conclusion In t he process of HIV infection, expression of CD38 HLA-DR on peripheral blood CD + 4 and CD + 8 T lymphocytes increased, r eflecting t he fact that T lymphocytes were abnormally activated, and that percentage of CD+8 CD38 + T cells increased along with disease prog ress, w hich can be used to predict the severity of the infection1 In H IV infection monitoring, not only immunolog ic cells but also the level of cellular activation should be considered1 Key words: HIV/ AIDS; CD38; HLA-DR; Vir al load 收稿日期: 2002- 10- 11; 修回日期: 2002- 11- 20 基金项目:北京市科学技术委员会资助( 合同 劳动合同范本免费下载装修合同范本免费下载租赁合同免费下载房屋买卖合同下载劳务合同范本下载 编号:H010210120113) 作者简介:汪习成( 1966- ) , 男,江苏省泗阳县人, 江苏省淮安市 第四人民医院副主任医师,医学硕士,从事感染性疾病的科研及临床 工作。 艾滋病病毒 ( Human immunodeficiency v irus, H IV)感染使机体免疫细胞异常激活和功能缺陷, 国 外研究表明, CD38、HLA-DR分子在 CD+4 、CD+8 T 淋 巴细胞上的表达代表了机体的免疫细胞激活状态, 能 反映HIV感染者/艾滋病( AIDS)患者免疫细胞的异 常激活程度, 是疾病进展和高效抗逆转录病毒疗法 ( HAART)效果观察的指标[ 1] , 而我国则很少这方面 的报道。为此, 我们观察了国内 HIV 感染者/ AIDS 1中国艾滋病性病 2003年 2月第 9卷第 1期 Chin J AIDS/ ST D Vol19 No11 Feb. 2003 患者外周血 CD38、HLA-DR分子在 CD+4 、CD+8 T 淋巴 细胞上表达的变化, 并探讨这些变化的临床意义。 1 材料与方法 111 正常对照组 2000年 5月~ 2001年 2月,于北 京协和医院血库采集 51例健康献血员的抗凝全血。 所有献血员均临床查体正常, 肝、肾功能正常,血清乙 型肝炎(乙肝)病毒表面抗原( HBsAg)、乙肝病毒核心 抗原( HBcAg )、抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、抗- HIV 均阴性,且无其它自身免疫性疾病。其中男 27 例、女 24例,平均年龄 36 ? 10岁。 112 HIV感染者/ AIDS患者 1999年 12月~ 2001 年 12月, 选择北京佑安医院门诊或住院的 HIV 感染 者/ AIDS患者 50例(门诊随访患者 42例,住院病人 8例) ,其中男 31 例、女 19 例, 年龄最大 56 岁, 最小 10岁,平均 3316 ? 912 岁。所有入选病例均未接受 HAART 治疗,但均经蛋白印迹实验确证血清抗-HIV 阳性。按照美国疾病控制与预防中心( CDC) 1993年 修订的 HIV 感染者的临床分类与诊断 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 , 其中 HIV 感染者 14例,AIDS 患者 36例。 感染途径: 经血液传播者 34例; 经性传播 8例, 其中异性恋者、同性恋者各 3 例, 双性恋者 2例; 感 染途径不详者 8例。所有患者均无吸毒史。 113 观察项目及方法 正常对照及所有 HIV 感染 者/ AIDS 患者均用流式细胞仪检测了外周血 CD+3 CD+4 、CD+3 CD+8 、CD+4 HLA-DR+ 、CD+8 HLA-DR、 CD+8 CD38 + T 淋巴细胞。所用仪器为 COUNTER EPICS XL 流式细胞仪(美国COUNTER公司) ,所用 的荧光标记单克隆抗体购自法国 Immunotech公司。 对 29例患者用分枝脱氧核糖核酸( bDNA)法检 测血浆病毒载量。主要仪器为 QUANT IPLEXTM bDNA System 340病毒定量检测仪(德国 Bayer-Ch-i ron公司) , 主要试剂为 QUANT IPLEXTM HIV 核糖 核酸( RNA) 310 ASSAY ( bDNA) 试剂盒 (购自德国 Baye-r Chiron 公司, Cat1No1116147) , 严格按照说明 书操作。所用的荧光标记单克隆抗体购自法国 Im- munotech公司。 114 统计学方法 用统计学软件 Spss 1010 for Window s对实验结果进行 F 检验、q 检验、t 检验, 独 立样本间 Pearson相关系数 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 。 2 结果 211 外周血 CD+4 、CD+8 T淋巴细胞检测结果 51例 正常对照和 50 例 HIV 感染者/ AIDS 患者外周血 CD+4 、CD+8 T 淋巴细胞检测结果显示 (表 1) , CD+4 T 细胞绝对计数和 CD4/ CD8 比值均为正常对照组> HIV感染组> AIDS 患者组 ( P 值均< 01001)。而 CD+8 T 细胞的绝对计数显示HIV 感染组显著高于正 常对照组和 AIDS患者组, 但 AIDS患者组与正常对 照组间差异无显著的统计学意义。 表 1 外周血 CD+4 、CD+8 T细胞检测结果 CD4/ CD8 CD+4 T 细胞 计数( / mm3) CD+8 T 细胞 计数( / mm3) 正常对照组 ( n = 51) 1158 ? 0158 857 ? 264 579 ? 175 H IV 感染者 ( n = 14) 0149 ? 0124* 456 ? 205* 992 ? 323* AIDS患者 ( n = 36) 0111 ? 0109* 62 ? 53* 676 ? 517 * 与对照组比较 P < 01001。 212 外周血 CD+4 HLA-DR+ 、CD+8 HLA-DR+、CD+8 CD38 + T淋巴细胞检测结果 CD+4 HLA-DR+ 细胞百 分比显示, AIDS患者组显著高于正常对照组和 HIV 感染组,正常对照组与 HIV 感染组间差异无显著的 统计学意义(表 2) ; CD+8 HLA-DR+ T 细胞百分比均 显示, H IV 感染组与 AIDS患者组显著高于正常对照 组,而 HIV 感染组与 AIDS 患者组间差异无显著的 统计学意义。CD+8 CD38+ T 细胞百分比为 AIDS 患 者组> HIV感染组> 正常对照组 ( P 值均< 01001)。 表 2 外周血 CD+4 HLA-DR+ 、CD+8 HLA- DR+ 、 CD+8 CD38 + T细胞检测结果 CD+4 HLA-DR + T 细胞 CD+8 HLA-DR + T 细胞 CD+8 CD38 + T 细胞 正常对照 组( n= 51) 10138? 4158 15143 ? 6176 45102 ? 10130 HIV 感染 组( n= 14) 17107? 10159 31129 ? 16166* 57188 ? 22102* AIDS 患者组 ( n= 36) 36146? 17175* 32166 ? 12113* 86127 ? 10128* * 与正常对照组比较 P < 01001。 213 T淋巴细胞亚群检测结果与病毒载量的相关性 分析 检测了 29例 HIV 感染者/ AIDS 患者的血浆 病毒载量, 其中 11例 HIV 感染者血浆病毒载量平均 值为 3188 ? 0174 log 拷贝/ mm3, 18 例 AIDS 患者血 浆病毒载量平均值为 5107 ? 0166 log 拷贝/ mm3, 两 组间差异有极显著的统计学意义 ( t = 41494, P < 01001) , 提示 AIDS 患者的血浆病毒载量明显高于 HIV 感染者。直线相关分析显示 (表 3, 图 1、2) , CD+4 T 细胞绝对计数与血浆病毒载量呈负相关,且相 关度最大 ( r = - 01607, P = 01001) ; CD+8 CD38+ 、 CD+4 HLA-DR + 细胞的百分比与病毒载量正相关。 2 中国艾滋病性病 2003年 2月第 9卷第 1期 Chin J AIDS/ ST D Vol19 No11 Feb. 2003 表 3 直线相关分析( n= 29) CD+4 VL( log) CD+4 r = - 01607 P = 01001 CD+8 r = - 01063 P = 01503 CD+8CD 38 + % r = - 01707 r = 01597 P = 01001 P = 01001 CD+8DR + % r = - 01531 r = 01437 P = 01001 P = 01018 CD+4DR + % r = - 01661 r = 01507 P = 01001 P = 01005 图 1 CD+4 T细胞与病毒载量的相关性分析 图 2 CD+8 CD38+ T细胞与血浆病毒载量的相关性分析 3 讨论 HIV 以 CD4分子为受体,因而主要感染 CD+4 的 细胞,导致 CD+4 T 淋巴细胞进行性减少[ 2]。本组资 料亦显示, CD+4 T 细胞计数和 CD4/ CD8 均为正常对 照组> HIV 感染组> AIDS 患者组; CD+4 细胞计数 与血浆病毒载量明显负相关, 相关系数最大 ( r = - 01607, P < 01001)。CD+8 T 淋巴细胞是主要的免疫 效应细胞, CD+8 T 细胞的数量和功能是控制 HIV 感 染的一个重要因素。本组资料 CD+8 T 细胞计数显示 HIV 感染组明显高于正常对照组和 AIDS 患者组。 说明在无症状感染阶段, CD+4 细胞即开始减少, 但仍 能维持一定的辅助功能, 此时 CD+8 T 细胞反应性处 于高水平, 能将体内病毒控制在较低水平。进入 AIDS期后, CD+4 细胞进一步下降,而升高的 CD+8 细 胞也降至接近正常人的水平[ 3]。 人类主要组织相容性复合物( MHC)是人体细胞 重要的表面抗原,而HLA-DR是 MHC Ò类分子的主 要抗原之一。正常情况下, 它仅分布于 B 细胞、活化 的 T 细胞、巨噬细胞、树突状细胞和精子等[ 4]。 HLA-DR在免疫应答中的主要作用是与 T 细胞表面 的 CD4 分子和/或抗原结合,促进抗原传递, HLA-DR 表达是 T 细胞活化的标志[ 5]。本组资料 CD+4 HLA- DR+ 、HLA-DR+ CD+8 T 细胞百分比均显示 AIDS 患 者组及 HIV 感染组高于正常对照组, HIV 感染者 HLA-DR+ 表达增加表示疾病进展。如 Kentens[ 1]等 观察HLA-DR+ CD+8 细胞在感染的早期即升高,并预 示患者进展为 AIDS 的可能性大。HLA-DR+ CD+4 、 HLA-DR+ CD+8 细胞百分比与血浆病毒载量正相关, 可能病毒激活 CD+4 、CD+8 细胞, 而活化的 CD+4 细胞 更利于病毒的复制[ 6]。 人的 CD38分子是分子量为 45kD 的单链跨膜糖 蛋白, 胞外决定簇(羧基端)为功能区,是一种多功能 酶,在细胞的信号转导中起作用, 其细胞外功能区上 点突变可抑制信号转导[ 7]。CD38的分布较独特, 主 要由一些幼稚细胞和早期的造血细胞表达; 在细胞 成熟过程中消失,当成熟细胞活化后又重新出现。在 成人, CD38蛋白主要表达于大多数的 NK 细胞、T 细 胞、B 细胞和单核/巨噬细胞。CD38的表达受到生理 和药物等调节,如细胞因子、凝集素等,主要为上调作 用,还未发现有下调的因素。CD38分子通过对激活信 号的转导, 促进 T 细胞激活,因而 CD38可作为细胞活 化的标志[ 8]。本组资料显示, CD+8 CD38+ 百分比呈现 AIDS 患者组 > HIV 感染组> 正常对照组, 提示 AIDS患者免疫细胞异常激活,破坏严重。HIV 感染 者 CD38在 CD+8 T 细胞上的表达显著升高, 与疾病进 展密切相关,表示预后不良。P1B™rgisser[ 9]通过横向 3中国艾滋病性病 2003年 2月第 9卷第 1期 Chin J AIDS/ ST D Vol19 No11 Feb. 2003 研究, 发现 46例 HIV 感染者/AIDS 患者 CD+4 细胞 与病毒血症呈负相关 ( r = - 0144, P = 010121) , CD + 8 CD38 + 百分比与病毒血症呈正相关, 且相关系数 较CD+4 细胞高 ( r = 0176, P < 010001) , 认为 CD8 CD38百分比可以作为血浆病毒载量的替代指标。本 组资料显示 CD+8 CD38+ 百分比与血浆病毒载量呈正 相关, ( r = 01597, P = 01001) ,与 CD+4 细胞数呈负 相关, ( r = - 01707, P = 01001) , 可见能反映疾病 进展。 病毒复制与细胞激活互相促进。在HIV 感染过 程中, 病毒持续高水平复制不断产生抗原, 刺激 CD+4 、CD+8 细胞, 使之处于持续高水平激活状态。 HIV 选择性地感染激活 CD+4 细胞, 而激活的 CD+4 细胞易被病毒感染而加速 HIV 复制。HIV 感染使体 内T 淋巴细胞异常激活, 细胞表面的 HLA-DR、CD38 表达增高。在血清阳转时, 即可观察到 HLA-DR 和 CD38在 CD+8 T 细胞上高表达。在整个感染过程中, CD+8 HLA-DR + 一直处于高水平状态,而 CD+8 CD38+ 细胞则随着疾病的进展逐渐升高[ 10] , 且具有较高的 百分值,因而 CD+8 CD38+ 百分比更能反映体内免疫细 胞的激活水平和疾病的进展情况。 观察 T 淋巴细胞表面的分子表达, 能较全面直 观地了解机体的免疫状态, 有利于判断病情和疗效。 尽管这些分子在细胞上表达的功能和意义,对疾病进 展起促进作用还是抑制作用还不清楚[ 11] , 但本研究 显示, CD+4 HLA-DR+ 、CD+8 HLA-DR+ 、CD+8 CD38+ T 淋巴细胞检测能很好地反映患者免疫细胞异常激活 状态, 能预示疾病的进展,有助于病情判断。对 HIV 感染者不但要观察免疫细胞数量和功能的变化,还要 观察其激活水平。 参考文献: [ 1] Kestens L, Vanham G, Gigase P, et al. 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