4种茶叶水提物的利尿作用

第 28 卷 第 12 期 2 0 1 1 年 1 2 月 沈 阳 药 科 大 学 学 报 Journal of Shenyang Pharmaceutical University Vol. 28 No. 12 Dec． 2011 p. 938 收稿日期:2011-04-25 作者简介:孙艳(1986-) ，女(汉族) ，河南遂平人，硕士研究生，E-mail sunyan1986221@ 126． com;袁丹(1963-) ，女(汉 族) ，辽宁丹东人，教授，主要从事中药活性成分及质量标准研究，Tel． 024-23986502，E-mail yuandan_kampo@ 163． com。 文章编号:1006-2858(2011)12-0973-03 4 种茶叶水提物的利尿作用 孙 艳，张 琳，王启隆，余自云，鹿野美弘，袁 丹 (沈阳药科大学 中药学院，辽宁 沈阳 110016) 摘要:目的 比较研究绿茶、乌龙茶、红茶和普洱茶水提物的利尿作用。方法 分别灌胃给予生理盐 水负荷大鼠 0. 5 g·kg －1和 1. 0 g·kg －1剂量的 4 种茶叶水提物，测定大鼠 4 h尿量及尿液中 Na +、K + 排泄量。结果 与模型对照组比较，4 种茶叶水提物均能使大鼠 4 h 尿量及尿液中 Na +排泄量显著 增加，但对尿液中 K +排泄量的影响则有所不同，其中乌龙茶和红茶水提物均能使大鼠尿液中 K + 排泄量显著增加，而绿茶和普洱茶水提物对尿液中 K +排泄量无显著性影响。结论 4 种茶叶水提 物均有明显的利尿作用，其中普洱茶的利尿作用与氢氯噻嗪相当，但对尿液中 K +排泄量无显著性影 响，可避免噻嗪类利尿药常见副作用—低钾血症的发生，是一种具有较好利尿功能的健康茶饮。 关键词:茶;水提物;Na +;K +;利尿;排泄;大鼠 中图分类号:R 96 文献标志码:A 茶叶为山茶科植物茶 Camellia sinensis(L．) O． Ktze．的嫩叶或嫩芽经加工制成的干燥品［1］， 《新修本草》有“茗利小便”的记载［2］，《茶谱》记 载饮茶“利水道”［3］。现代研究表明，茶叶具有较 强的利尿和增强肾脏排泄的功能，并有利于泌尿 系统结石的排出［4］。作者采用大鼠经典水负荷 利尿模型［5］，比较研究了绿茶、乌龙茶、红茶和普 洱茶 4 种主要茶叶水提物的利尿作用，以探讨它 们对人体排尿功能的调节作用。 1 仪器与 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 Metabolica MC-ST 型大鼠代谢笼(自然基因 科技有限公司) ，VITROS 5600 全自动生化免疫整 合系统(美国 Johnson 公司) ，岛津 LC-2010AHT高 效液相色谱仪(日本 Shimadzu公司)。 氯化钠注射液(沈阳志鹰制药厂，批号: 10020403) ，氢氯噻嗪片(天津力生制药股份有限 公司，批号:1004008) ，甲醇(色谱纯，天津市大茂 化学试剂厂) ，冰乙酸(分析纯，天津市大茂化学 试剂厂) ，水为重蒸水。 绿茶、乌龙茶、红茶和普洱茶购于沈阳茶城。 SD大鼠，雄性，体质量为(220 ± 20)g，沈阳药 科大学实验动物中心提供，合格证号为 SCXK (京)2009-0004。 2 方法 2. 1 茶叶水提物的配制 分别称取绿茶、乌龙茶、红茶和普洱茶等 4 种茶叶各 10 g，加入 100 倍量沸水，水浴提取 1 h，滤过，滤液减压浓缩至干，即得茶叶水提物。 使用前配成 0. 05 g·mL －1和 0. 10 g·mL －1的茶叶 水溶液。 2. 2 4 种茶叶水提物中嘌呤生物碱和 Na +、K + 含量测定 采用 HPLC法测定了 4 种茶叶水提物中嘌呤 生物碱(咖啡因、可可碱和茶碱)的含量，色谱条 件如下。色谱柱:Inertsil ODS-3 (250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ，流动相:体积分数为 1%的冰乙 酸溶液(A) ，体积分数为 1%的冰乙酸-甲醇溶液 (B) ，梯度洗脱程序［0-30 min:5% ～28%(φ)B］， 检 测 波 长:270 nm，柱 温:45 ℃，流 速: 1. 0 mL·min －1。采用 VITROS 5600 全自动生化免 疫整合系统测定茶叶水提物中 Na +、K +含量。 2. 3 生理盐水负荷大鼠的利尿实验 采用 Aston 方法［6］对 SD大鼠进行筛选，即将 大鼠置于代谢笼中适应 3 d，禁食不禁水 18 h 后， 灌胃给予去离子水 25 mL·kg －1，收集 2 h 尿液，排 尿质量大于灌胃质量 40%的大鼠，即为合格。 将合格大鼠随机分为模型对照组、阳性药物 组和给药组，每组 8 只。实验前大鼠禁食不禁水 24 h，各组大鼠灌胃给予生理盐水 25 mL·kg －1，形 成盐水负荷模型。20 min 后，模型对照组灌胃给 予去离子水(10 mL·kg －1) ，阳性药物组灌胃给予 氢氯噻嗪(0. 02 g·kg －1) ，给药组分别灌胃给予 4 种茶叶水提物(相当于生药 0. 50 g·kg －1 和 1. 00 g·kg －1) ，将灌胃后的大鼠放入代谢笼中，收 集 4 h尿样，每隔 1 h 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 收集的尿量。合并各时 间段尿样，混匀后，测定总尿样中的 Na +、K +含量 (VITROS 5600 全自动生化免疫整合系统)。 实验数据以 珋x ± SD 表示，采用 SPSS 13. 0 统 计软件进行单因素方差分析和显著性检验，组间 比较采用 Dunnett's T3 法，P ＜ 0. 05 认为有显著性 差异。 3 结果 3. 1 4 种茶叶水提物中嘌呤生物碱和 Na +、K + 含量测定 测定 4 种茶叶水提物中嘌呤生物碱(咖啡 因、可可碱和茶碱)和 Na +、K +含量，结果如表 1 所示。 Table 1 The contents of purine alkaloid，sodium and potassium in four tea water extracts Sample w /% Caffeine Theobromine Theophylline Na + K + Green tea extract 1. 729 0. 370 ＜ 0. 010 ＜ 1. 725 15. 000 Oolong tea extract 0. 806 0. 170 ＜ 0. 010 ＜ 1. 725 15. 990 Black tea extract 2. 326 1. 770 ＜ 0. 010 ＜ 1. 725 16. 020 Pu'er tea extract 2. 141 1. 080 ＜ 0. 010 ＜ 1. 725 16. 380 Theophylline(＜ limit of detection) ，Na +(＜ minimum of the linear range) 4 种茶叶水提物在总嘌呤生物碱含量上，红 茶水提物含量相对较高，普洱茶和绿茶水提物次 之，乌龙茶水提物含量较低。另外，Na +含量质量 分数均小于 1. 725%，K +含量比较接近。 3. 2 4 种茶叶水提物对大鼠排尿量的影响 考察 4 种茶叶水提物对生理盐水负荷大鼠 4 h排尿量的影响，结果如表 2 所示。 Table 2 Effect of four tea water extracts on urinary volume in rats(珔x ± s，n =8) Sample Dose /(g·kg －1) V(urine)/mL 0-1. 0 h 1. 0-2. 0 h 2. 0-3. 0 h 3. 0-4. 0 h Total Saline 0 2. 41 ± 0. 68 1. 52 ± 0. 52 0. 78 ± 0. 22 0. 82 ± 0. 34 5. 53 ± 0. 53 Green tea extract 0. 50 3. 45 ± 0. 85 2. 12 ± 0. 84 0. 95 ± 0. 47 0. 90 ± 0. 34 7. 42 ± 1. 08bc 1. 00 2. 89 ± 1. 25 2. 26 ± 0. 54 1. 24 ± 0. 33 0. 99 ± 0. 20 7. 38 ± 1. 21bc Oolong tea extract 0. 50 4. 47 ± 0. 78a 2. 89 ± 1. 10a 0. 84 ± 0. 32 0. 95 ± 0. 31 9. 15 ± 1. 92a 1. 00 4. 26 ± 1. 10a 2. 27 ± 0. 48 1. 12 ± 0. 47 0. 85 ± 0. 34 8. 50 ± 1. 55a Black tea extract 0. 50 3. 91 ± 0. 75a 2. 11 ± 0. 45 0. 99 ± 0. 26 0. 76 ± 0. 43 7. 77 ± 1. 03ac 1. 00 3. 65 ± 0. 88b 1. 78 ± 0. 60 1. 40 ± 0. 63 1. 17 ± 0. 47 8. 00 ± 1. 45ac Pu'er tea extract 0. 50 4. 27 ± 0. 65a 2. 17 ± 1. 09 0. 75 ± 0. 43 0. 64 ± 0. 64 7. 83 ± 1. 79ac 1. 00 3. 18 ± 1. 28 2. 54 ± 0. 64b 1. 72 ± 0. 95a 1. 14 ± 0. 60 8. 58 ± 1. 20a Hydrochlorothiazide 0. 02 4. 31 ± 0. 23a 2. 94 ± 0. 57a 1. 76 ± 0. 51a 1. 23 ± 0. 39 10. 24 ± 0. 38a a—P ＜ 0. 01，b—P ＜ 0. 05 compared with model group，c—P ＜ 0. 05 compared with hydrochlorothiazide group 大 鼠 灌 胃 阳 性 对 照 药 氢 氯 噻 嗪 (0. 02 g·kg －1)后，与模型对照组比较，4 h 尿量显 著增加了 85%，其中 0 ～ 3 h 间尿量均有显著增 加。给予 0. 50 g·kg －1和 1. 00 g·kg －1剂量的绿 茶、乌龙茶、红茶和普洱茶水提物后，与模型对照 组比较，4 h 尿量分别显著增加了 34%和 33%、 65%和 54%、40%和 45%、42%和 55%，其中，低、 高剂量乌龙茶及高剂量普洱茶水提物所致的 4 h 排尿量与氢氯噻嗪组比较，均无显著性差异。 同时，分析不同时间段的利尿作用可见，与模 型对照组比较，灌胃乌龙茶、红茶和低剂量普洱茶 水提物所致的 1 h 内尿量有显著性增加，低剂量 479 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 28 卷 乌龙茶水提物所致的 1. 0 ～ 2. 0 h 尿量和高剂量 普洱茶水提物所致的 1. 0 ～ 2. 0 h 和 2. 0 ～ 3. 0 h 内尿量也有显著性增加，且上述作用与氢氯噻嗪 组比较，均无显著性差异。而绿茶水提取物不同 时间段利尿作用均较弱。因此，低剂量乌龙茶水 提物和高剂量普洱茶水提物的利尿作用时间较持 久。 3. 3 4 种茶叶水提物对大鼠尿液中 Na +、K +排 泄量的影响 考察 4 种茶叶水提物对生理盐水负荷大鼠 4 h尿液中 Na +、K +排泄量的影响，结果如表 3 所 示。 Table 3 Effect of four tea water extracts on electrolyte excretion in urine in rats(珔x ± s，n =8) Sample Dose(g·kg －1) m(Na +)/mg m(K +)/mg m(Na +)∶m(K +) Saline 0 2. 87 ± 1. 24 6. 88 ± 2. 24 0. 49 ± 0. 27 Green tea extract 0. 5 11. 56 ± 2. 65a 11. 71 ± 3. 27 1. 04 ± 0. 32 1. 0 10. 91 ± 2. 78a 12. 17 ± 3. 37 0. 96 ± 0. 36 Oolong tea extract 0. 5 11. 96 ± 5. 46a 14. 59 ± 3. 41a 0. 80 ± 0. 30 1. 0 11. 20 ± 3. 79a 14. 93 ± 3. 66a 0. 78 ± 0. 31 Black tea extract 0. 5 9. 91 ± 3. 46ac 14. 20 ± 4. 44a 0. 76 ± 0. 39 1. 0 9. 57 ± 5. 27ac 17. 08 ± 3. 84a 0. 60 ± 0. 33 Pu'er tea extract 0. 5 10. 46 ± 5. 99a 8. 16 ± 4. 42cc 1. 53 ± 1. 02a 1. 0 10. 52 ± 2. 49a 9. 54 ± 4. 39c 1. 27 ± 0. 58a Hydrochlorothiazide 0. 02 15. 82 ± 3. 42a 15. 72 ± 4. 79a 1. 07 ± 0. 30 a—P ＜ 0. 01，b—P ＜ 0. 05 compared with model group，c—P ＜ 0. 05 compared with hydrochlorothiazide group 与模型对照组比较，氢氯噻嗪组大鼠尿液中 Na +、K +排泄量分别显著增加了 451%和 128%。 给予 0. 5 g·kg －1和 1. 0 g·kg －1的绿茶、乌龙茶、红 茶和普洱茶水提物后，与模型对照组比较，大鼠尿 液中 Na +排泄量分别显著增加了 303%和 280%、 317%和 290%、245%和 233%、264%和 267%，其 中绿茶、乌龙茶和普洱茶水提物所致尿液中 Na + 排泄量与氢氯噻嗪组比较，均无显著性差异，而红 茶对 Na +排泄量的作用明显低于氢氯噻嗪。对尿 液中 K +排泄量影响则有所不同，乌龙茶和红茶 水提物所致的 K +排泄量分别显著增加了 112% 和 117%、106%和 148%，且与氢氯噻嗪组比较， 均无显著性差异。而绿茶和普洱茶水提物对尿液 中 K +排泄量无显著性影响。4 种茶叶水提物中， 仅有普洱茶水提物给药组可致大鼠尿液中 Na + / K +质量比值显著升高。 4 讨论 a. 本文作者采用大鼠生理盐水负荷模型，比 较研究了绿茶、乌龙茶、红茶及普洱茶水提物的利 尿作用，实验结果表明，4 种茶叶水提物均有明显 的利尿作用，其中乌龙茶和普洱茶水提物利尿作 用较强，且作用时间较持久。 b. 氢氯噻嗪为中效利尿药，主要通过抑制 Na +、Cl －重吸收，而起到排盐利尿作用，但该类利 尿药可导致低血钾等副作用［7］。本研究中，与其 他种类茶叶水提物不同，普洱茶水提物利尿作用 与氢氯噻嗪相当，但对尿液中 K +排泄量无显著 性影响。由此提示，普洱茶的利尿作用特点或机 制与氢氯噻嗪明显不同，它在一定程度上可能避 免噻嗪类利尿药常见副作用—低钾血症的发生， 是一种具有较好利尿功能的健康茶饮。 c. 关于茶的利尿活性成分，有文献报道茶叶 所含嘌呤生物碱(如咖啡因、可可碱和茶碱等)可 通过提高肾小球滤过率而发挥利尿作用［8］，另有 文献指出伞形科植物 Astydamia latifolia、荨麻科 植物 Forsskaolea angustifolia 和铁角蕨科植物 Ceterach aureum 的利尿活性与其中 K + 含量有 关［9］。本文作者测定了 4 种茶叶水提物中上述 3 种嘌呤生物碱、Na +和 K +的含量，结果表明，在 总嘌呤生物碱含量上，红茶 ＞普洱茶 ＞绿茶 ＞乌 龙茶。在 K +含量上，4 种茶叶水提物含量接近。 而药理实验表明，在利尿作用方面，普洱茶≈乌龙 茶 ＞红茶 ＞绿茶，上述茶叶水提物的利尿作用与 总嘌呤生物碱及 K + 的含量未显示明显的相关 性。因此，茶的利尿活性成分及其机制有待于进 一步研究。 (下转至第 1004 页) 579第 12 期 孙 艳等:4 种茶叶水提物的利尿作用 Abstract:Objective To evaluate the pharmacokinetics and relative bioavailability of telmisartan tablets im- ported(test)versus locally manufactured(reference)． Methods Eighteen healthy male volunteers were ran- domly administered a single crossover dose of 80 mg test and reference tablets． Plasma telmisartan concentra- tion was determined by HPLC-Fluorescent． The relative bioavailability and bioequivalence of the tablets were analyzed using the 3p97 program． Results The pharmacokinetic parameters of test and reference tablets were as follows:tmax(1. 25 ± 0. 48)vs． (1. 17 ± 0. 49)h，ρmax(3. 38 ± 1. 92)vs． (3. 27 ± 1. 80)mg·L －1，t1 /2 (29. 0 ± 8. 64)vs． (27. 0 ± 7. 93)h，AUC0-t(21. 27 ± 14. 82)vs． (21. 13 ± 12. 59)mg·h·L －1，AUC0-∞ (23. 43 ± 17. 74)vs． (22. 93 ± 14. 67)mg·h·L －1 ． The relative bioavailability of the test formulation was (99. 1 ± 16. 9)% ． Conclusions The test tablets are bioequivalent to the reference tablets． Key words:telmisartan;HPLC-fluorescence;  bioavailability (上接第 975 页) 参考文献: ［1］国家药典委员会． 中华人民共和国药典:一部［M］． 北京:中国医药科技出版社，2010:附录 25． ［2］苏敬．唐·新修本草［M］． 合肥:安徽科学技术出版 社，1981:334． ［3］钱椿年．茶谱［M］．北京:中国纺织出版社，2006:94． ［4］林乾良，何立峰．泌尿系疾病的茶疗［J］．茶叶，1998， 24(2) :101 － 102． ［5］徐叔云，卞如濂，陈修． 药理实验方法学［M］． 北京: 人民卫生出版社，2001:1223 － 1226． ［6］王蕾，姚东云，马红梅，等．中药利尿药理实验动物筛 选方法探讨［J］． 中国比较医学杂志，2006，16(11) : 694 － 696． ［7］吴逢波，徐珽，李健，等． 利尿药的评价及合理应用 ［J］．华西医学，2008，23(2) :423 － 424． ［8］刘雅，刘志平，刘思雨，等．探究茶叶的主要功用［J］． 中国民族民间医药，2009，14:76． ［9］严忠红，陆阳．植物药中钾、钠离子对利尿活性的影 响［J］．国外医药·植物药分册，2000，15(2) :51 － 52． Diuretic effect of four tea water extracts SUN Yan，ZHANG Lin，WANG Qi-long，YU Zi-yun，KANO Yoshihiro，YUAN Dan (School of Traditional Chinese Materia Medica，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016， China) Abstract:Objective To comparatively study the diuretic effect of the water extracts of green tea，oolong tea，black tea and Pu'er tea．Methods Four teas water extracts at the doses of 0. 5 g·kg －1 and 1. 0 g·kg －1 were orally administered to saline-loaded rats，the urinary volume during four hours and the excretion of so- dium and potassium in the urine were measured． Results Four tea water extracts resulted in a significant in- crease in urine volume of four hours and urinary sodium excretion． And they were different in urinary potas- sium excretion，the water extracts of oolong and black tea resulted in a significant increase in urinary potassi- um excretion，but the water extracts of green tea and pu'er tea had no significant influence on urinary potas- sium excretion compared with model group． Conclusions Four tea water extracts show significant diuretic effects． Among them，the diuretic effect of pu'er tea is equivalent to that of hydrochlorothiazide，but without significant influence on the urinary potassium excretion． Thus，drinking of pu'er tea could avoid the occur- rence of low postassemia that is a common side effect of thiazide diuretic agents． As a result，pu'er tea is a healthy tea drink with a prefect diuretic effect． Key words:tea;water extract;sodiumion;potassiumion;diuretic;excretion;rat 4001 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 28 卷