HPLC法测定银杏叶征剂中决黄酮甙的含量

植物资源与环境学报 2001，10(4)：57—58 Journal ofPlata Resources and Environment HPLC法测定银杏叶片剂中总黄酮甙的含量 杨如 ，韩福贵，潘福生 ( 围薯学 植物研究所，江苏南京2l0014 Dcte~ lion 0f 曲v帆枷 由 in晰 t龇 眦 YANGRu-tong．H Fu-gvi，P 一 sheng(Institute 0f 蚍v，Jiangsu Provinoe and t ( nese Academy 0f Sciences，№ i嘏 210014，C m)．J Plaza盹 D ． ＆ Environ．2∞1，加{4)：57—58 Al~lr,aet：Totalflavenoid glycosidewasisolatedf1％~l rl咖 b／／oba Linn．1eattablet anddeternfitmd bv RP_H眦 using querc~etin a吕删e standaM．4 6l砌 ×100l砌 Sphedso~0Ds column，mobile phase：V(C OH)：V(0．3％ P0,)=4o：60，flow iate：1 m]Jmin，detection： =370 rI_I．． smi le extractedwithCH30H ul[1~onic extraction and hydrolyzed w】d】25％ HC1，then sample solution 豁diluted accurately to 50 mL This rI|ent showed that this is a mp1e，accurate and precise method ththe result 0f lineafi．ty．average recoveryi8 101 1％ for querce4in．and RSD j8 2．44％ ． 关键词：银杏；银杏叶片剂；槲皮素；总黄酮甙；删 Jc Key w0rds：a咄 b／2oba Linn．；ar b／／oba leattablet；quemetin；total fl~'onoid glycoside；H眦 中图分类号：$664．3；s567．1 9；Q蚪6 83 文献标识码：A 文章螭号：1O 0978(2∞1)04-(1057—02 银杏(c-~go bgoba Lir~1．)叶提取物(GBE)是银杏叶经提 取 、分离而得的干浸膏，是银杏叶制剂的主要原料。药理及 临床 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明，它能增加冠状动脉血流量，可用于动脉硬化及高 血压所致的冠状动脉供血不全、心绞痛、心肌梗塞、脑血栓 、 脑血管痉挛等症 。其活性成分主要是黄酮类和萜内酯 ： 银杏叶黄酮类成分的测定方法，有紫外分光光度法和高 教液相色谱法，困前者专属性较差，现多数厂家均采用后者。 高教液相色谱法测定总黄酮甙的含量时．在对照品的使用 上，既有单用槲皮素(que~cefin)为对照品的测定方法 J，也有 槲皮索、山柰酚(b衄 )和异鼠李素(isothan~eth1)为对 照品的测定方法 。甙元换算成总黄酮甙的系数各有不同， 因而质量控制 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 不一。作者采用反相高效液相色谱法，用 槲皮索作对照品外标法测定银杏叶片剂中黄酮甙元的古量． 然后按一定的系数计算总黄酮甙含量，旨在为银杏叶制剂的 质量控制提供参考。 材料与方法 1．1 材料 3种不同厂家生产的银杏叶片剂购 自南京市药品商店， 坩照品槲皮素由中国生物制品检定所提供。 1．2 仪器与试剂 Waters高教液相色谱仪(配备486型紫外检测器、680型 微处理机、717型自动进样器)，超声波清洗仪(上海超声波仪 器厂)。 甲醇(色谱纯)，HC1(分析纯)，飓PO4【分析纯)，重燕承 (自制 )= 1．3 样品溶液的制备 准确称取 3厂家生产的银杏叶片刺样品(相当于 GBE 160 nag)，研细，置于 1{30 r n1_三角瓶中，加 4o mL甲醇溶解．超 声波振荡30 rain，过滤，滤液置于50 mL容量瓶中，甲醇定容． 准确吸取 25 r n1l提取液置于 250 mL茄形瓶中，另加甲醇 ∞ mL和 25％ HCI 5 mL，水浴回流水解 1 h，取出速冷至室温，转 移至50mL容量瓶中，甲醇定容 ，供分析用： 1．4 对照品溶液的制备 精密称取槲皮索28 mg，置于 1{30 mL昝量瓶中，甲醇溶解 并定容，供分析用。 1．5 色谱条件 色谱柱：Sphefisorb (10Omm x 4．6flllll，5 f删)．检测波 长：370 rim，流动相：V(甲醇)：V‘0 3％H，PO4溶液)=49：60． 流速 ：1 mlJmin，柱温 ：4o℃ 在上述色谱条件下，对照品溶液和样品溶液分别进样分 析(前者进样 5 ，后者进样 10 1，结果见色谱图 1和圈2 1．6 样品测定 配制的 3种银杏叶片剂样品分析溶漓，在上述色谱条件 下，自动进样 1O皿 分别进行分析，测定峰面积，同时进行校 正因子测定 ，求出槲皮素的含量，计算出llJ柰酚和异鼠李素 的含量，再按一定的系数计算总黄酮甙的含量 2 实验结果 2．1 槲皮毒浓度与峰面积相关性 对照品槲皮素制备液 1、3、5、7和9 ．依次进样分析，测 定峰面积。求得峰面积与进样量的回归方程 A：3 959 323C一750 955 8 r=0 995 9 收稿日期 ：20014)6-25 作者简介：杨如同(1975一)，男，黑龙江尚志^ ．^ 专，主要M事 热 产物化学研究 维普资讯 http://www.cqvip.com 植 物 资 源 与 环 境 学 报 第 10卷 槲皮 ： 巍 图 1 对照晶 田，IC圈谴 ． 1 m ￡ dIr0m of H咄 rd gIb 呻e 围2 样品肌 ￡图谱 ． 2 m ￡ 曲Ia∞ toI m me∞ 蜂面积与进样量的线性范围为0．28—2 52 ，在此范围 内线性关系良好．相关性显著： 2．2 样品总黄酮甙含量 以槲皮素作对照外标法，3种银杏叶片剂中总黄酮甙含 量的分析计算结果见表 1。 表 1 银杳叶片荆样品中总黄胃甙含量 IbIe1 c衄幢皿t 0f岫 J皿咖岫 幽唧 de-m the曩I k 0f ％ l∞f lal~et 1、2．3为取样重复 1、20黜 for repeliri~ the哪 e 由表 1可看出：不同厂家生产的银杏叶片剂总黄酮甙含 量差别较大 ；同一厂家生产的同批号产品的总黄酮甙含量基 本稳定 Ⅱ号样品总黄酮甙含量与其标示量 9．6咀 片相近 (各厂家生产的片剂标示量 皆为 GBE 40 片、黄酮甙 9 6 片)，I和 Ⅲ号样品总 黄酮甙 含量分别高出其标示量 15．1％和 31．4％。实验结果还显示，银杏叶片剂的 3甙元含 量顺序是槲皮素最高，山柰酚其次，异鼠李素最低，这与银杏 叶中各成分含量比例相一致：表明以槲皮素作对照品，报据 各甙元的峰面积及分子量比进一步计算总黄酮甙含量的方 法，能够反应银杏叶片剂的总黄酮甙含量，可用作银杏叶制 剂总黄酮甙含量的测定： 2．3 精密度 对照品槲皮素制备液进样 5止，连续5敬平行测定。测 定结果RSD=2．44％，表明该方法重复性较好。 2 4 回收宰 准确吸取已知含量的 3号样品溶液各 2 mL，分别置于 3 只5mL容量瓶中，再分别准确加人 1mL对照品溶液，甲醇定 容，进样 10皿 ，测定蜂面积，计算回收率，结果见表2。由表 2 可以看出，本方法的回收率为 101 1％，表明回收率较好： 衰 2 槲皮素的回收率测定结果 T挑 2 R∞ qvmt'ee(~t 参考文献 ： 1] 罗顺德，周率宏，吴克嫒．锂杏叶的药理作用研究进展 [ ．中 医药学报，1995，23(6)：鹅一49 [2] 刘桂霞，孙玉玮 ．盘兆祥．银杏叶的研究进展[J]．国外医药植 物学分册．1994，9(1)：l0一l4． [3] 陶巧凤，黄宗玉．范弄# 高教液相色谱法耐定银吉叶制剂中 黄酮含量[ ．中成药，1993．15(12)：14—15 4] 王新宏，王智华．范广平，等 l-a't,C法蔼定银杏制剂成分 J]． 中成药，1996，l8(9)：36—37 (责任编辑：宗世贤) 维普资讯 http://www.cqvip.com