指纹图谱在中药复方研究中的应用

I H1HEN ME1)1(：lNE AN1)MA1一ER]A MEDICA RESEARCH 2002 VOL．1 3 NO．11 时珍哩垦里翌 !!!兰!!兰竺 指纹图谱在中药复方研究中的应用 宋 坤 (1．南京 中医药大学药学院．江苏 南京 ． 毛颐 晴。 210029； 2．江苏省南京市药检所 210015) 关键 词 ：中药复方； 指纹图谱； 质量标；隹； 有效成分 中图分类号 ：R284．1；R284．2 文献标识码 ：C 中药复方的最大特 征是 整体性和复杂性 。复方是一个 有机的 相互 紧密联 系的结构 ，每味药 问的相互作用建立在成分 结构及其 数量基础上 。同一味 中药 在不同的处方 中有 不同的作用 ，作用的 强度不能仅仅用量来控制 ，复方中各药不是机械的混合，研究过 程中要保持原处方的结构的整体性、完整性和有机性。。 。复方也 是一 个复杂 体 系，起疗 效 作用 的物 质基础 不 一定是 一种 化学 成 分．而是许 多化学成分的 总体作用 。当然 ，对于某一 化学 成分可能 是某一 特定药效 作用的成 分 ，但 不可 能是某一 “证 ”的治疗 成分 。 中药复方 依赖这些 化学成分起到有 主次轻重的多靶点 ，多环节的 有机整体协 同治疗效 果 j。正是 由于中药复方具有整体性 和复杂 性 的特点 ，对 中药复方 的研究 面临着巨大的挑 战。随着 近年来新 技术 、新方法的运用 ，中药复方研究 出现 了许 多新 思路 ，用 指纹 图 谱研究 中药 复方就 为其中之一 。 通过选 择适 当的提取 分离程序 可获取植 物 中药 特征性化 学 成分 总提取物 ，这种总提 取物 的化学 成分既是具 体 的，又是特 征 的和含量相对固定 的 ，因此 采用各种手段表征其组 成与结 构均有 高度 的重现性 和特 征性 。我们将这 种总提取物称 为植物 中药特征 总提物或称 为植物 中药特征性 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 提取 物。植物 中药特 征性标准 提 取物 的组成 与结 构 可用 多种检 测 手段予 以表 达 ，如红 外光 谱 (IR)、紫外光谱 (UV)、高效液 相(HPLC)等。在 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 的提取分 离 程 序下 ，植物 中药特征 性标准提 取物都 有其特征 的 图谱 ，如 人的 指纹一样 ，与植物品种问存在严格 的对应关系 ，没有 混淆的余地 。 我 们将这种 图谱称 为植 物中药指纹 图 。建立指纹 图谱要 在原药 材有种植物基地的基础 上开展 ，否 则将 无法进 行和开展 。 中药材特 征性总成 分指纹 鉴定对植 物 中药 的品种鉴 定和 品 质评价具有 重要意义 ，并 已做 出了成功 的探 索 ，同时也 为中药复 方研究提供 了新的思路 。其 主要 表现在以下几个方面 ： I 复方质量标 准方面 的应用 由于 中成药 是经一 系列提取 、制 剂等 工艺 后形成 的药 品 ，它 已完全而彻底地 改变 了中药 材或 中药饮 片的原有形 态可谓 面 目 全非 。若仍欲依赖传统 的方法作 中药鉴定 显然是 片面的 ，药典所 列 的化学反应和 常规薄层 色谱 (TI C)技术 及其它 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 技 术也 是 不完整 的。而对 中成药所含 之药味作正确无误 的鉴定要 求 ，已提 到议事 日程表上 ，并 已成无法 回避之事 实 ，既然指纹 图谱在 中药 材鉴定方面已获成功，从实验 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 、数据处理等方面再作些努力， 将 其用 于 中药 复方 所 含药 味 的鉴 定 应该 是 可行 的 。 目前气 相 (GC)、高效液 相 (HPLC)、高 效 毛细 管 电泳 (HPCE)技术 在 中药 指纹图谱中均有应用，其中以 HPI C应用得最为广泛。洪筱坤等 以麝香保心丸为例展开一系列的研究．已获初步成功．利用气相 色谱 指纹谱 GC—FPS鉴定 了冰片 、麝 香 、苏 合香和桂 皮；利用 高效 液相 色谱指 纹谱 HPI C—FPS鉴定 了蟾酥 ；同时还 实现 了麝香 酮、 龙脑 、异 龙脑等 1 0个成分 的含量测定 。 由于中药复方本身就有多种药理活性．在中医用药原则上， 收稿 日期 2002—04—22： 修订 日期 ：2002—06一l3 文 章编 号 ：1008—0805(2002)11—0699一Ol 一 个中药复方也有多种治疗功能，因而指纹图谱的确立应考虑中 医特色 ，研 究多张指纹谱 选择适 当的几种 活性成分 怍 为标准峰 ． 经过实验摸索，确立不 同色谱条件下的色谱峰 ，建立全面评价该 药质量又符合中医用药原则的中药复方指纹图谱，从而建立起相 应 的质量标准 。 2 寻找 中药 复方有效成 分方面 的应用 在建立 复方 指纹 图谱前 ，要 明 确指 纹 图谱 的性 质 (由哪些 成 分组 成 ，这些成 分是 否为有 效 成分或 与 临床疗 效具 有相 关性 ，或 是 否为有毒成分需要 限量控 制 ，成分 问 比例的 变化是否影 响成品 疗效或 作用方 向等 等) 。由于 中药经 配伍 后 ，复方的有效 成分不 一 定是单 味药材 中的有效成 分 ，而有可 能的是 多味药合煎后 产生 的新 物质 ，因此要 建 立真正 意义 上 的 中药复方 质量 标准 还需 找 到复方中的有效成分及其药效、作用机制 ，这也可以借助指纹图 谱来完成 。 将 中药复 方 的化学成 分研 究 ，从 君 臣佐 使药 味 、君 臣佐 使有 效部 分、君 臣佐使有效成 分 3个 层次上 ，将化学 成分和药 效、怍用 机制结合 进行 ，应能很好解 决 中药复方 的复杂性 和整体性两个难 点 。对 于各有效部分 可采用 HPI C或 CE等 ，分离得 到该有效 部 分 中十几种 化学 成分的色谱 图 (或 电泳 图)，用 HP1 C／MS等对各 成分进行 鉴定后 ，即可作 为指纹 图谱 作定性 鉴别用 。从指纹 图谱 中选择一些 化学成分进 行鉴 定后 ，即可作 为指纹 图谱 作定性鉴别 用。从指纹图谱中选择一些化学成分作为指标成分。如这些成分 经药效试验起 药效作用 的即 为有 效成分 。如此成分仅 为某味 中药 中含量较大、有代表性的化合物 ，则为特征成分。当然有些指标成 分既是有效成分又是特征成分，而有些有效成分(指标成分)则可 能 是各单 味药 中均没 有 ，只在 中药 复方 配伍 后新 产生 的化合物 每个有效部分取四五种指标成分进行定量 一。 以此种思 路 制定 出的 中药复 方质 量控 制 的方法 ，更 为客观 、 科学 ，由于其工 作量太大 ，在近期 内不 易实现 。但 已有学者做 出了 有意义 的探 索 ：戴 德舜等用 HPLC／MS／MS对桂枝 汤有效部分 A 进行分 离分析 ，建 立指纹 图谱 提 供定性 鉴别 ．并对一 个单 向升温 样品及一个 双向调温样 品指纹 图谱 进行 比较 。从结果 可以看出双 向调节与单 向样品差别来 源主要 是煎煮 、提取 过程 中不 同物质溶 解率、萃取率的不同，使得各个物质在最终样品中含量的不同，导 致了药效的不同。这提示了桂枝汤 A部分的提取工艺的研究应 作进一步的考察·建立切实有效的质量控制方法以保证最终质量 的稳定。实验同时分析了MS总离子流图和 HPI C色谱图主峰对 应的可能分子量·再根据药典和五种单味药有效成分相关资料． 推测 了桂 枝汤 A 部分 双向调节 作用样 品物 质基础 可能对应 的单 味药物质来 源I^ 。 由于 中药复方 中成分 复杂 ．给建立指 纹 图谱带 来了相 当的难 度。近年来有 许多研究者 对复 ．h-N剂指纹 图谱的 建立方法进行 了 多种尝试。如吴吴等采用聚类分析及马氏距离判别的多元统计学 方法 对参 麦注 射液 HPLC指纹 图 谱 中采集 的数据 进 行分 忻 ．结 果表明利用 聚类分析对 】8个 样本分类 结 果准确 。倪力 军等则 ·699· 维普资讯 http://www.cqvip.com 时珍 国医 国药 2002年第 l 3卷第 1 1期 LISHIZHEN MEDICINE AND MA I'ER1A MED1CA RESEARCH 2002 V()I ·13 N()·11 提出了简便易行的对指纹图谱间相似程度进行量化评价的方法， 并开发了相应的应用软件。其具体方法是直接从中药指纹图谱的 L3 检测、数据出发，采用相关系数与距离系数对任意两张图谱间的 相似度进行 量化评价和 比较 。结果表 明该方 法可 良好地反映红外 。。。 图谱 之间的相似 程 度 ，进 一步 完善 后可 用 于其它 类型 的 图谱分 ⋯ Lb一 析 。 从 目前的发展状态看 ，指纹 图谱技术应 用于中药复方研究是 r ] 必然的，但其研究方法和思路还有待完善。随着指纹图谱技术的 逐渐成熟，相信它与复方研究的结合将更为紧密，从而推动中药 r7] 现代化的进程。 rR 参考文献 ： 一 l： 陈 英，陈 奇．刘荣华．中药复方药理研究方法进疑[J：．中国实验 E93 方剂学 杂志．1 995．5(4)：57-57． [2j 李澎涛，乔延玎．王永炎，等．对中药复方研究的思考[Jj．北京中医 药大学 学报 ，1 999，22(5)：1 5一l 5． 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间(45．5±3．8)d。 两组 年龄、妊娠时 间无显著 性差异 (￡：1．8，P>0．08)。 2 治疗方法 2．1 西 药组 空 腹或 进食 后 2 h，口服 米非 司酮 (仙居制 药 厂 ) 25 mg，首次 口服 25 mg米非 司酮 2片，当晚再 服 1片，以后每 隔 l2 h服 l片 ，和第 3天晨服 l片 25 mg米非 司酮后 l h，口服米 索 前列腺片 600 mg，门诊观察 6～8 h，注意和药后妊娠物排出与否 的副反应 。 2．2 结合组 西药组服米非司酮当天起加服通经化瘀汤：急性子 2O g，蜈蚣 2条 ，水 蛭 10 g，南 瓜 子 (连 壳 捣 碎人 药 )50 g，牛 膝 20 g，天花粉 30 g，元 胡 15 g，苏木 10 g，姜黄 10 g，枳实 30 g，川1 芎 10 g，红花 10 g。1剂／d，分 2次服 ，连服 3剂 。 3 治疗效果 收稿 日期 ：2002 04—09； 修订 日期 ：2002—06—18 · 7O0· 3．1 效果标 准 用药后 自行 排 出完 整 绒毛球 或宫 颈钳夹取 出完 整绒 毛球 ，未见 绒毛 球排 出 ，但 B超 检查 正 常 ，不 需清 官者 为正 常 ；服 药后 8 h，未见妊 娠物排 出，仅有 少量 阴道 出血 ，B超检查仍 见胎囊 ，子 宫不见缩小最 终 以手术终 止妊 娠者为失败 ； 3．2 治疗结果 两组药物流产全部成功 。但在绒毛球排出后，两 组阴道出血时间尿 HCG 8 d转阴率及清官对比．有显著的差异 (P< 0．05～0．01)。详见表 l。 表 1 两组尿 HCG 8 d转阴率及清 宫率比较 (r± ) 注 ：与对照组 比较 P< 0．05，P< 0．01 4 体会 米非 司酮 是一种 新型抗 孕酮 药物 ，它能 与孕酮竞 争 ，并与子 宫孕体 结合 而抑制孕 酮 的活性 ，使 蜕膜 和绒 毛变性 ，卵巢 黄体溶 解 ，内 源性前 列 腺素 释放 导致 子 宫 收缩 ，宫 颈 软化 扩张 ，引起流 产 ，但同时存在着 另一弊端 ，即绒 毛排 出后 ．蜕膜呈 碎片排 出时 间 较长，出血时间较久 ，容易造成不全流产、大出血与宫内感染等不 良后果，甚至不得不采取清官手术。本文西药组 1 8例 1例残留、 2例 大出血 、3例 出血不止 ，清宫率达 14．6 。 自拟通经化瘀 汤正是 为了上述 问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 而设 ，其 目的 是进 一步杀 灭胚胎，迅速降低 HCG，加强子宫收缩，促使蜕膜迅速排出．减少 和缩 短出血 ，防止感染 从而 达到完全 流产 。 方 中姜黄 、天 花粉有 下死 胎之 功 ，其性 又通经 逐瘀 ；急 性子 、 水蛭、蜈蚣、南瓜子破坏胚牙，降低 HCG水平，促使子宫收缩 为 主药。苏木、川芎、红花破瘀活血；枳实、元胡兴奋子宫，加强收缩 力；牛膝引血下行，通利滑胎为辅佐。中西药联合应用，可补单纯 西药之不足，促使经脉通畅。 维普资讯 http://www.cqvip.com