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DNA琼脂糖凝胶电泳.ppt

DNA琼脂糖凝胶电泳.ppt

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46次下载 0人收藏 暂无简介 简介 2012-05-13 举报

简介:希望有用

nullDNA琼脂糖凝胶电泳DNA琼脂糖凝胶电泳实验原理实验原理琼脂糖为链状多糖绳状琼脂糖束大网孔型凝胶——分离、鉴定、纯化DNA影响DNA迁移率的因素:DNA分子的大小、构象,凝胶浓度,电压,电泳缓冲液的组成缓冲液pH>DNAPi,DNA带负电荷,迁移率与分子量对数成反比DNA分子构象影响迁移率:共价闭环DNA>线状DNA>开环DNA不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围不同浓度琼脂糖分离DNA分子的范围琼脂糖浓度(%)分离范围(kb)0.35-600.61-200.70.8-100.90.5-71.20.4-61.50.2-42.00.1-3琼脂糖凝胶中DNA的观察琼脂糖凝胶中DNA的观察溴化乙锭(EB)—DNA:紫外光下红色荧光主要实验器材主要实验器材电泳槽结构电泳槽结构操作步骤操作步骤琼脂糖凝胶的制备:溶化,冷却,EB凝胶板的制备:加梳子,倒胶样品的制备:样品+1/5体积溴酚蓝加样:加样端为负极(黑)电泳:5V/cm观察:紫外灯下观察,照相溶胶溶胶准备胶槽准备胶槽凝胶冷却至50C,加EB至终浓度0.5μg/ml凝胶冷却至50C,加EB至终浓度0.5μg/ml铺胶铺胶凝胶凝固后取出梳子凝胶凝固后取出梳子加缓冲液加缓冲液准备样品准备样品点样点样电泳电泳注意观察溴酚蓝染液的迁移注意观察溴酚蓝染液的迁移紫外灯下观察电泳结果紫外灯下观察电泳结果照相照相

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