ABI Veriti 梯度 PCR仪使用说明
基因有限公司
Gene Company Limited
操作步骤：
1、打开 PCR仪的热盖，插入 0.2ml的样品管。盖好热盖。
2、打开 PCR仪的电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟。
3、初始化完成后，显示主菜单：
4、点“Browse/New Methods”，进入 PCR程序列
表
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：
5、可以直接点一个 PCR程序，选择“Start Run”运行；点右边的 符号，可以选
择不同的文件夹。如要新建一个 PCR程序，点“New”，出现 PCR程序：
6、添加一段程序：点中上方的“Stage”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将
加入一段新的程序。
7、修改循环数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。
依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定。
8、增加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新
的步骤。
9、删除一个步骤：点“Step”位置，在点“Delete”，软件将该步骤删除。
10、建立梯度模式：
1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下
2）点“VeriFlex step”，出现梯度创建窗口：
输入 6个梯度温度，温度下方的“1－2”是指对应的 1、2两行加热孔，全部输好后，
点“Done”确定。注意：相邻的两个梯度温度之差最大不能超过 5℃！
11、建立渐变模式：
1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下
2）点“Auto Delta”，出现渐变模式创建窗口。
点“Staring Cycle”，输入起始循环数；点“Delta Temperature”，输入温度变化值；
点“Delta Time”，输入时间变化值。渐变模式适用于 touchdown PCR，可以提高 PCR
反应的特异性。例：输入起始循环数为 2，温度变化值为＋0.5℃，时间变化值为＋
5s，则表示从第 2个循环开始，每循环一次升温 0.5℃，时间增加 5s。
12、增加暂停步骤：
1）点中一个步骤，再点“Option”键，出现选项如下
3）点“Pause”，出现如下窗口。
输入暂停的起始位置，暂停间隔和暂停时间，点“Done”确定。上图表示每隔 10个
循环暂停 10s，在 10个循环的第 1个循环之前暂停。
13、编辑 PCR程序完成后，点“Save”保存。
点“Run Method”，输入 PCR程序名称；点 ，选择保存 PCR程序的文件夹（如
果要保存在 USB文件夹中，需要先插 U 盘）。再输入反应体积和热盖温度（这两项
在运行程序时可以修改）。点“SaveδExit”确定。
14、回到 PCR程序列表界面，选择新建的 PCR程序。
15、点“Start Run”，出现运行参数设置窗口
输入反应体积和热盖温度，点“Start Run Now”开始运行 PCR程序。
16、仪器运行选中的 PCR程序，显示运行监视窗口。
A- 运行状态栏，显示运行温度和剩余时间
B- 加热警示标记 C- 阶段指示
D- 步骤温度 E- 步骤时间 F- 步骤指示
C- 状态
报告
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，显示日期、时间和仪器状态
D- 延伸箭头，点箭头可以显示更多的步骤
16、暂停运行：
点“Pause Run”，仪器暂停，出现暂停选项栏
“Remaining Time”显示暂停剩余时间，“Elapse Time”显示已暂停时间。
如果需要修改暂停时间，点 ，输入时间值，点“Done”确定；点“Resume Run”，
结束暂停，继续运行 PCR程序。
17、终止运行：点“Stop”可以终止整个 PCR程序。
18、反应报告：
PCR 程序结束后，仪器会自动生成反应报告，显示当次反应的各项指数。该报告可
以保存和打印。
19、PCR 反应结束后，打开热盖，取出样品，关闭仪器电源。并开盖放置，使热盖
和加热模块正常降温。
应用软件使用
一、使用 9700模式运行 PCR程序
Veriti和 9700具有不同的升降温控制模式，但是在 Veriti中可以通过模式转换，使仪
器运行 9700的升降温模式。对于已在 9700上摸索好的 PCR程序，可以直接在 Veriti
上运行，不用再修改反应条件。
1、在主菜单，点“Tools Manu”，
2、点“Convert a Method”，
3、选中“9700 Max Mode”，点 箭头
输入 9700上的 PCR反应条件，设定 PCR程序，点 箭头
4、在保存程序窗口，输入名称，选择文件夹保存程序。
5、回到 PCR程序列表界面，选择新建的 9700模式 PCR程序，运行程序。
二、Tm值计算
1、在主菜单，点“Tools Manu”，
2、点“Calculate Tm”
3、输入盐浓度和引物浓度，在“Primer 1 Sequence”和“Primer 2 Sequence”分别输
入引物的序列，再点“Calculate”，软件计算显示 Primer 1和 Primer 2的 Tm值。
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