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枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响.pdf

枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响

guoyinglizhen
2012-04-13 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响pdf》,可适用于高等教育领域

第卷第期Vol,No年月Feb生殖与避孕ReproductionContraceptionhttp:wwwRandCcnrandcsipprstcshcn枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响潘正军张晓蕾周建武王建成(淮阴师范学院生物学系,淮安,)【摘要】目的:检测枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响。方法:提取宁夏枸杞多糖冷刺激诱导建立孕小鼠高血压模型。将小鼠分为组:正常妊娠对照组(A组)、冷刺激妊娠组(模型组,B组)、冷刺激不同浓度多糖组(实验组,CE组)。C、D、E组分别灌胃给予枸杞多糖mgkg、mgkg、mgkg,qd×dA组、B组相应地给予等量生理盐水,连续饲养d。妊娠小鼠颈动脉插管记录血压,剖宫检测胎盘、胎鼠重,全长、体长。结果:B组血压显著高于A组(P<),实验组血压与A组比无统计学差异(P>)。B组胎盘、胎鼠重,全长、体长显著低于A组(P<)实验组与A组比差异无统计学意义(P>)。结论:枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠有降低血压、保护胎儿发育的作用。关键词:枸杞多糖妊娠血压胚胎发育中图分类号:R文献标识码:A文章编号:X()通讯作者:潘正军Tel:Fax:Email:zhengjunpancom枸杞子为宁夏枸杞(LyciumbarbarumL)的干燥成熟果实,在我国主要产于河北和宁夏,日本、朝鲜、欧洲及北美也有分布。它在祖国传统医学中具有重要的地位,其药用价值备受历代医家的推崇。《本草纲目》记载:“枸杞,补肾生精,养肝,明目,坚精骨,去疲劳,易颜色,变白,明目安神,令人长寿”。《神农本草经》中就指出:久服坚筋骨《食疗本草》也记载枸杞“能益人,去虚劳”。现在医学研究表明,枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫调节、降血糖、降血脂、抗肿瘤等作用。我们的研究也表明,枸杞具有降低血压和调节血脂的功能。药理学研究证明,枸杞的这些作用与枸杞多糖(lyciumbarbarumpolysaccharides,LBP)有着密切的关系,枸杞多糖是枸杞中的主要功能活性成分。将实验动物反复置于低温(±℃)条件下进行寒冷刺激可诱发实验性高血压,对孕鼠进行寒冷刺激能使其产生妊娠期高血压疾病样改变。枸杞多糖能否降低孕鼠血压、保护胎儿发育目前尚未见报道,我们拟选择小鼠建立冷刺激诱导的孕鼠高血压模型,检验枸杞多糖对实验性高血压妊娠小鼠血压和胎鼠发育的影响。材料和方法实验动物清洁级ICR小白鼠,雌性只、雄性只,购于南京医科大学实验动物中心,合格证号:SCXK(苏),℃适应性饲养周后开始实验。实验仪器BLF生物机能实验系统、PT生物血压传感器为成都泰盟科技有限公司产品,D数显光照培养箱为上海佳胜实验设备有限公司产品,Sartorius电子天平(g)由北京赛多利斯仪器系统有限公司生产。小鼠灌胃器为张家港市生物医学仪器厂产品。主要试剂宁夏枸杞购于淮阴医药公司(特级,产地:宁夏中宁县)。氨基甲酸乙酯(乌来糖),NaCl,柠檬酸三钠。实验方法枸杞多糖的制备按文献资料进行:称取g枸杞子,℃烘干,放置于干燥器h。粉碎,称取g干燥枸杞粉,每次用氯仿甲醇(∶)ml,用索氏回流装置于℃回流脱脂次,每次h。残渣风干后,再用乙醇ml,回流次,每次h。残渣加适量水于℃,h×次。×g,离心min,合并上清液,浓缩成ml。在磁力搅拌下,将浓缩液滴入倍体积的乙醇中,静置h。抽滤,固形物分别用乙醇,无水乙醇,丙酮洗涤,真空干燥,得LBP粗品。Sevag法脱蛋白:按枸杞多糖水溶液体积加入氯仿,随之加入氯仿体积的正丁醇,混合物剧烈震荡min,离心,倾出上清液,除去中间层变性蛋白和下层氯仿。重复操作到中间层无变性蛋白为止。收集上清液,浓缩,透析,冷冻干燥得LBP。用所得LBP分别配制成浓度为mgml、mgml、mgml的水溶液,℃保存备用。实验分组及处理小鼠按雌雄∶合笼,每日上午∶检查雌鼠,将有阴栓者挑出,记作怀孕d。将孕鼠随机分成组:正常妊娠对照组(A组)、冷刺激妊娠组(模型组,B组)、冷刺激不同浓度多糖组(实验组,CE组)。实验组:分别于每天下午∶灌胃给予枸杞多糖mgkg、mgkg、mgkg,qd×d,正常喂食饮水A组、B组相应地给予等量生理盐水实验组和B组同时每日上午∶∶置于±℃环境下冷刺激处理,其余时间同A组,℃饲养,连续饲养d。于d按mlkg体重腹腔注射氨基甲酸乙酯将小鼠麻醉,颈动脉插管法测量并记录血压。解剖小鼠并剖宫,测量胎盘重量,仔鼠的全长(含尾长)、体长、体重。数据处理用SPSS统计分析软件对各组数据进行t检验,以x±s表示,P<为差异有统计学意义。结果各组小鼠血压值从表中可以看出,孕鼠经间歇性寒冷刺激,血压升高(与A组比,差异非常显著,P<),冷刺激孕鼠用枸杞多糖灌胃处理后,各组血压下降,其中D组、E组血压已经接近正常值(与A组比,无统计学差异,P>),即随着用药剂量的增加降压效应增强。胎鼠发育状况从表中可以看出,B组的胎盘重、体重、全长、体长全部显著低于A组(P<),实验组的上述指标与A组比,无统计学差异(P>),也即喂服枸杞多糖后胚胎的发育状况得到了显著改善,实验组间相比,差异无统计学意义(P>)。讨论妊娠期高血压疾病样改变以前也称妊娠高血压综合征,是妊娠期影响母婴健康的严重疾病,也是影响孕产妇和围产儿患病率和死亡率的重要因素,以妊娠周后高血压、蛋白尿、水肿为特征并伴全身多脏器的损害,发病率为,是严重威胁母婴安全、导致孕妇及围生儿发病及死亡的主要原因之一,但其病因学因素仍未彻底阐明,治疗也无根本性进展。流行病学调查资料表明寒冷是诱发妊娠期表对照组与实验组小鼠血压值比较(单位:mmHg,mmHg=kPa,x±s)TableBloodpressurescomparisonofcontrolgroupandexperimentalgroups(unit:mmHg,mmHg=kPa,x±s)组别Groupn最大收缩压Maxsystolic最小舒张压Mindiastolic平均动脉压MeanarterialA±±±B±**±**±**C±*±*±*D±±±E±±±*:P<,**:P<,与A组比comparedwithgroupA表对照组与实验组胎鼠发育状况比较(x±s)TableFetusdevelopmentstatusofcontrolgroupandexperimentalgroups(x±s)组别Group胎鼠数NoofFetus胎盘Placenta(mg)体重Bodyweight(mg)全长Fulllength(mm)体长Bodylength(mm)A±±±±B±**±*±*±**C±±±±D±±±±E±±±±*:P<,**:P<,与A组比comparedwithgroupA高血压疾病样改变的高危因素之一,子痫发作与气温突变密切相关。动物实验也表明,寒冷刺激不仅能诱发孕鼠妊娠期高血压疾病样改变,而且对胎盘形态、细胞滋养细胞的浸润、血管内皮损伤的影响都与人类临床表现类似,说明寒冷刺激可能是诱发妊娠高血压疾病样改变的因素之一,由此可以建立研究妊娠期高血压疾病样改变的动物模型。我们的实验也表明,冷刺激妊娠组胎鼠发育状况明显不及对照组,与临床妊娠高血压疾病样改变并发症状IUGR(intrauterinegrowthrestriction)吻合。枸杞子是我国传统的药食兼用名贵中药材,是我国重要出口药材之一,也是卫生部首批公布的食药兼用品种之一,具有补肾养肝、润肺明目等功能,是一种重要的食品配料。近年来,对枸杞子生物活性作用的研究表明,枸杞子具有增强机体免疫功能、减肥、细胞凋亡诱导、抗肿瘤和抗衰老等作用,我们以前的研究也表明枸杞能降低实验性高血压。这些活性作用被认为与LBP有关,LBP是从枸杞子中分离提取得到的一种小分子水溶性的多糖化合物,由阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、甘露糖、木糖、半乳糖种单糖组成,呈白色纤维状。本研究表明,枸杞多糖确有降血压的效应,LBP不仅能降低寒冷刺激诱发的妊娠高血压状态,还能有效改善胎鼠的发育状况,使胎盘发育、胎鼠生长趋于正常。从而为枸杞产品的进一步开发利用积累实验依据,也为临床治疗妊娠期高血压疾病提供理论数据。至于LBP降低血压的生理机制还有待继续探讨。参考文献:霍超,徐桂花枸杞生理功效和活性成分的研究进展中国食物与营养,,():何兰杰,刘萍枸杞多糖对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响中国医院药学杂志,,():李晶,欧芹,孙洁枸杞多糖对衰老大鼠蛋白质氧化损伤影响的实验研究中国老年学杂志,,():曹淑彦,王宇枸杞多糖对外周血单核细胞激活作用中国医院药学杂志,,():王玲,董坚,蒋绿芝,等LBPD单用及与降糖药联合应用对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖和免疫功能的影响云南大学学报(自然科学版),,():甘璐,张声华枸杞多糖的抗肿瘤活性和对免疫功能的影响营养学报,,():潘正军,王新风,杨占军宁夏枸杞水煎剂对实验性高血压小鼠血压和血脂含量的影响淮阴师范学院学报(自然科学版),,():KanayamaN,TsujimuraR,SheL,etalColdinducedstressstimulatesthesympatheticnervoussystem,causinghypertensionandproteinuriainratsJHypertens,,():俞丽丽,李力,陈鸣,等寒冷刺激诱发孕鼠妊娠高血压综合征动物模型研究第三军医大学学报,,():田丽梅,王旻枸杞多糖的提取分离和其组成研究中国中药杂志,,():翁侨,陈汉平妊娠期高血压疾病病因学研究现状中国优生与遗传杂志,,():乐杰妇产科学北京:人民卫生出版社,:俞丽丽,李力,陈鸣,等寒冷刺激致妊高征孕鼠的胎盘形态学观察重庆医学,,():俞丽丽,李力,陈鸣寒冷刺激对细胞滋养细胞浸润的影响中华医学杂志,,():ZhuZ,ZhuS,ZhuJ,etalEndothelialdysfunctionincoldinducedhypertensionratsAmJHypertens,,():张民,张声华枸杞多糖的制备及其结构研究食品研究与开发,,():(年月日收稿)(英文摘要见第页)InfluenceofOvarianResponsetoPregnancyOutcomeinIVFETJueMA,LuLI,XiaohongGAO,YuWU,XiangLU,DanniCHEN,XiaoxiSUN(InternationalPeaceMaternityandChildHealthHospitalofShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai,)【ABSTRACT】Objective:Toexplorethepredictiveabilityofovarianresponsetopregnancyoutcomeincontrolledovarianhyperstimulation(COH)cyclesinIVFETMethods:AtotalofcycleswithlongprotocolinCOHwereincluded,whichgroupedasthedifferentspecificratioofrecombinantfolliclestimulatinghormoneandthematureoocytenumber(rFSHn),andtherelationshipbetweenrFSHnandpregnancyoutcomewasretrospectivelyanalyzedResults:WiththeraiseofrFSHn,basicantralfolliclecount(AFC)wasdecreased,totaldoseofrFSHwasincreased,numberofacquiredoocytesreducedandmeanscoreoftransferredembryoswasalsodecreased(P<)WhenrFSHn>,theclinicalpregnancyratewasobviouslydecreased(P<)Conclusion:OvarianresponseissignificantlycorrelatedwiththeIVFEToutcomeThecutofpointthatpregnancyratedecreasesfollowedwiththeraiseofrFSHnis>Keywords:IVFETcontrolledovarianhyperstimulation(COH)ovarianresponsepregnancyrateEffectsofLyciumBarbarumPolysaccharidesonBloodPressuresandFetusDevelopmentofHypertensivePregnantMiceZhengjunPAN,XiaoleiZHANG,JianwuZHOU,JianchengWANG(DepartmentofBiology,HuaiyinTeachersCollege,Huai’an,)【ABSTRACT】Objective:TostudytheeffectsoflyciumbarbarrumpolysacharidesonbloodpressuresandfetusdevelopmentofhypertensivepregnantmiceMethods:LyciumbarbarumpolysaccharideswereextractedHypertensivemicewereinducedbycoldstressMiceweredividedintocontrolpregnancygroup(thecontrol,gruopA),coldstresspregnancygroup(model,groupB),coldstresspolysaccharidestreatedgroup(experimentalgroups,groupsCE)Thecontrolgroupandmodelgroupweregivenphysiologicalsalineasthecontrol,andexperimentalgroupswerefedwithpolysaccharidesbyirrigatinggastric(mgkg,mgkg,mgkg,respectively)Afterd,thebloodpressures,weightofplacenta,lengthandweightoffetuswereallmeasuredResults:ThebloodpressuresofgroupBincreasedsignificantlycomparedwithgroupA(P<),andexperimentalgroupshadnostatisticalsignificancecomparedwithgroupA(P>)Theweightofplacenta,lengthandweightoffetusingroupBweresignificantlylowerthatingroupA(P<),butnosignificantdifferencewasfoundbetweenexperimentalgroupsandgroupA(P>)Conclusion:ThelyciumbarbarrumpolysacharideshasthefunctionsofdepressingbloodpressureandprotectingfetaldevelopmentKeywords:lyciumbarbarrumpolysacharides(LBP)pregnancybloodpressurefetaldevelopment$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$(正文见第页refertop)

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