黄芪化学成分的研究

黑龙江医药 HeiLon酣iangMedicineJournalV01．17NO．22004 ·97· 黄芪化学成分的研究 李继红 李永吉李秋红关艳彬 辽宁农业职业技术学院(115214)黑龙江中医药大学 摘要 目的：对蒙古黄芪的化学成分进行研究。方法：采用D101大孔树脂精制法、溶剂法、色 谱法提取分离，用波谱法鉴定其化学结构。结果：从蒙古黄芪的乙醇提取物中分得3个化舍物，并鉴 定为芒柄花苷，9，10一二甲氧基紫檀烷一3一O—pD葡萄糖苷，黄芪甲苷。结论：该方法简便易行，是 2．2 MATCH_ word word文档格式规范word作业纸小票打印word模板word简历模板免费word简历 _1714189864879_0溶液的配制 精密称取盐酸克伦特罗对照 品5mg，置于50ml量瓶中，用流动相溶解超声并稀 释至刻度，配成100pg／ml的溶液，即得，备用。 2．3 供试品溶液的配制 取供试品25片，精密称 定，研细，精密称取适量(约相当于盐酸克伦特罗 1mg)，置50ml的量瓶中，加流动相溶解超声并稀释 至刻度，摇匀，用o．45弘m滤膜过滤，取续滤液，即得， 备取。 2．4 标准曲线的制备 精密吸取上述对照品溶液 1．O、2．0、3．O、4．O、5．0m1分别置于25ml容量瓶中， 用流动相稀释至刻度。在上述色谱 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 条件下分别进 样20肛l进行分析，以对照品浓度X为纵坐标，峰面积 Y为横坐标线性回归，得回归方程式为y一9．64× 10_9x+O．O00303相关系数r一0．9997，线性范围为5 ～25pg／m1。 2．5 精密度与重现性试验 取同一份供试品溶液连 续进样5次(n=5)，每次进样品20pl，按样品含量测 定项下方法分别进行测定，结果RSD=o．28％。 2．6 稳定性试验 取同一批供试品溶液，按样品含 量测定项下方法每隔1h进样测定1次，共测定7次 (n一7)。结果RSD=1．22％， 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明供试品溶液在6h 内稳定。 表1加样回收率试验结果(n=5) 加入量 实测值 回收率 平均回收率 RSD 序号 (mg) (mg) (％) (％) (％) l 0．060 O．058 96．67 2 O．080 0．078 97．50 3 0．100 0．096 96．00 96．65 O．56 4 O．120 O．116 96．67 5 0．140 0．135 96．42 2．7加样回收试验精密吸取已知盐酸克伦特罗含 量的供试品溶液5份，每份2n11，分别置于10ml量瓶 中，然后分别精密加入盐酸克伦罗对照品溶液 (100弘g／m)0．6、0．8、1．0、1．2、1．4ml，加流动相适量， 超声处理10min，冷却，用流动相稀释至刻度，摇匀， 依法进行测定，计算回收率，结果如表1。 2．7样品含量测定精密称取不同厂家的3个不同 批号的样品，按供试品溶液配制项下方法制备溶液， 在上述色谱条件下，进样20扯l进行测定，并计算含 量。结果如表2 表2样品含量测定结果(n=3) 批 号 HPLC法 UV法 标示量(％)RsD(％)标示量(％) RsD(％) 唐山风山制药厂 96．22 O．36 95．86 o．58 00302 江苏省金坛市制药厂 101．6l o．87 O102201 南宁第五制药厂 105．17 0．10 012062 100．58 0．75 102．36 O．43 3讨论 盐酸克伦特罗含量测定方法，有永停滴定法，紫 外分光光度法，其中以高效液相法较简单，取样量少。 本实验流动相选择通过改变甲醇与水的比例进行考 察，适当加入离子对缓冲溶液，其中以甲醇一水一磷酸一 三乙胺(50：50：o．2：o．4)分离度效果最好，干扰最 小。对盐酸克伦特罗对照品溶液在200nnl～500nm 扫描，结果在243nm处有最大吸收，选用243nm为 检测波长灵敏度高，干扰小。 本文采用高效液相色谱法代替紫外分光光度法 进行含量测定，操作简便，结果准确。因此，可用于该 制剂的质量控制及试用于血药浓度控制，也可试用于 肉类食品的检测方法。 参考文献 [1]ISBN7—5025—2736—2／R·60，中国药典2000年版二部[S]． [2]广西壮族自治区药品标准汇编．1993年版[S]． 救毽日舷t200s—u一17 万方数据 ·98· 黑龙江医药 HeiLongJiangMedicineJournalVoI．17No．22∞4 一种较好的分离纯化方法。 关键词 黄芪；芒柄花苷；9，10一二甲氧基紫檀烷一3一O—pD葡萄糖苷 StudiesonChemicalConstituentsofRadixAstragali LiJihong，eta1． L妇伽i刀gAg—f“，觑地y蚴z渤2以Z7k^i∞ZC优如g已(115214) Abstract0bjective：TostudythechemicalconstituentsobtainedfromAstragalusmem— branaceus(Fisch．)Bge．varmongholicus(Bge．)Hsiao．Methods：Thecompoundswereseparated byD101macroporeabsorbedresionmethod，liquid—liqiudextractionandchromatography，their structureswereidentifiedbyspectralanalyses．Results：Threecompoundswereabtained9，10一 dimethoxy—pterocarpan一3—0一pD—gIucoside；ononinandAGSⅣ．Conclusion：Themethodissimple andconvenient． KeywordsRadixAstragali；9，10—dimethoxy—pterocarpan·3一O—pp—glucosideononin 黄芪为上品补药，有补气固表，脱毒生肌的功 能，蒙古黄芪是黄芪的正品之一。本课题组开展了蒙 古黄芪指纹图谱的研究工作，由于蒙古黄芪化学成 分众多，仅用一种成分不能全面反映中药的质量，而 目前仅可买到黄芪甲苷一种对照品，故对蒙古黄芪 的化学成分进行分离，最终得到一种较好的分离制 备芒柄花苷，9，10一二甲氧基紫檀烷一3一O一8一D葡萄糖 苷的方法。 1仪器与试药 ． 1．1 仪器： XJⅡ型离心沉淀机为上海医用分析仪器厂生 产，INOVA一500型核磁共振仪为美国Rariran公 司生产。 1．2 试药：柱层析硅胶、薄层层析硅胶为青岛海洋 化工厂生产；D101型大孔树脂为天津制胶厂生产； 氯仿(色谱纯)；甲醇(色谱纯)；黄芪来源于内蒙古包 头药材基地，经黑龙江中医药大学生药教研室王振 月老师鉴定为蒙古黄芪Astragalusmembnanaceus (Fish．)Bge．varmongholicus(Bge．)Hciao干燥根； 黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品检定所)。 2提取与分离 将干燥黄芪根5蛞，加70％乙醇回流提取三次， 合并回馏液，减压回收至5L，水沉，D101大孔树脂 精制，收集70％洗脱液并进行浓缩，得浓缩液(1：1 =药液：生药)，用饱和正丁醇溶液萃取，水层(弃 去)，正丁醇层1％NaOH溶液萃取，得正丁醇层用 正丁醇饱和水洗至中性，减压回收得粗提物I(黄色 粉末，109)。上硅胶柱(6．5×100cm，湿法上柱)进行 CHCl。一MeOH梯度洗脱，依次得到3个结晶物，用 甲醇重结晶。 3结果鉴定 化合物I：无色针晶，无荧光，对浓硫酸呈棕色， 对MoIish试剂呈阳性反应。盐酸镁粉反应阴性，酸 水解后检出葡萄糖。由质谱裂解碎片证明化合物I 为紫檀烷类化合物，m／z462(M+)，300(M—glucose unit)，285(M—glucose—CH3)，269(M—OCH3)与文 献。3报道一致。另外1H—NMR谱84．28(1H，dd，J= 10，6．5Hz，H一6)，艿3．69(1H，m，H一6)，3．44(1H， m，H一6a)，艿5．63(1H，d，J一6．5Hz，H～11a)形成AB— MX系统的特征峰，另外苯环H一1为87．42(1H， d，J一8Hz)，H一2为86．72(1H，dd，J一2．5，8．5Hz)， H一4为86．55(1H，d，J=2．5Hz)，H一7为占7．00 (1H，d，J一8Hz)，H一8为占6．54(1H，d，J一8Hz)，6 3．70(3H，s，OCH3)，艿3．74(3H，s，OCH3)与文 献n‘23报道一致。13C—NMR(500MHz)苷元部分： 131．96(C一1)，110．43(C一2)，158．50(C一3)，103．97 (C一4)，156．13(C一4a)，65．71(C一6)，39．89(C一 6a)，121．56(C一6b)，118．70(C一7)，105．09(C一8)， 152．67(C一9)，133．34(C一10)，150．96(C—lOa)， 78．17(C一11a)，114．0l(C—llb)，56．06(OCH3)， 59．85(0CH3)；糖部分：100．27(C一1)，73．13(C一2)， 76．49(C一3)，69．63(C一4)，77．02(C一5)，60．62(C一 6)，与文献对照。3，确定化合物的结构为9，10一二甲 基紫檀烷一3一O—p—D葡萄糖苷。 化合物Ⅱ：白色粉末状结晶，Molish试剂呈阳 性，盐酸镁粉反应不显色，酸水解后检出葡萄糖。1H～ NMR谱显示，低场区有3个峰艿8．06(1H，d，J= 9Hz)，艿7．15(1H，dd，J一2，9Hz)，87．25(1H，d，J=2 万方数据 黑龙江医药 HeiLongJiangMedicineJ0urnalV01．17No．22004 ·99· Hz)，推断为三取代苯环结构的ABX系统信号， 8．44(1H，s，H一2)，7．54(1H，d，J一8．5Hz，H一2’，H一 67)，7．OO(1H，d，J=8．5，H一37，H一57)，3．79(3H，s， OCH。)将该化合物的氢谱、碳谱与文献报道的芒柄 花素的氢谱、碳谱数据比较发现氢谱中多出65．11 的糖上端基质子信号和63．18～3．74处的糖上质子 信号，与文献n“3报道一致13C—NMR谱显示结构中 含有“>C=0”，碳谱给出22个碳信号。13C—NMR (500MHz)苷元部分：153．68(C一2)，124．05(C一3)， H oMe CompoundI：9，10一二甲氧基紫檀烷一3一。一p—D葡萄糖苷 (9，1o—dimethoxy—pterocarpan一3一O—pD—glucoside) 化合物Ⅲ：无色针晶，经薄层层析和HPLC鉴 定为黄芪甲苷。 4薄层层析检识 化合物I：硅胶薄层层析以CHCl3一MeOH(8 ：1)展开，正丁醇一冰醋酸一水(4：1：5)展开，均以 10％的硫酸乙醇溶液显色为单一斑点。 化合物Ⅱ：硅胶薄层层析：展开剂同上时，呈现 单一的黄绿色荧光(254nm)。聚酰胺薄层层析： CHCl3一MeOH(4：1)展开，呈现荧光斑点(254nm)。 化合物Ⅲ：硅胶薄层层析：CHCl3一MeOH—H。O (13：7：2)10‘C以下放置下层液展开，以10％的硫 174．69(C一4)，126．99(C一5)，115．67(C一6)，161．49 (C一7)，103．45(C一8)，157．08(C一9)，118．50(C一10)， 123．41(C一17)，130．12(C一27)，113．67(C一37)， 159．07(C一4’)，113．67(C一57)，130．12(C一67)。糖部 分：100．03(C—1)，73．17(C一2)，76．52(C一3)，69．67 (C一4)，77．25(C一5)，60．68(C一6)，与文献。“3对照， 结构鉴定为芒柄花素一7一O—pD葡萄糖苷。结构式如 下： H 0 CompoundⅡ：芒柄花苷 (ononin) 酸乙醇溶液显色呈现红棕色斑点。 致谢：核磁共振谱由中国医学科学院核磁室测定，质谱由军事医 学科学院仪器测试中心代测。 参考文献 [1]吕归宝．黄芪中黄酮类似物的分离鉴定[J]．中草药，1984，15 (10)：20一22． [2]宋纯清．膜甲黄芪中的紫檀烷和异黄烷化合物[J]．植物学 报．1997，39(12)：1169—1171． [3]刘勤．”C—NMR在黄酮雷化物结构鉴定中的应用[J]．中国医 学科学院学报．1990，12(5)：359—364． [4]王伟．红化岩黄芪黄酮类成分研究[J]．药学学报．2002，37 (3)：196—198． 收稿日期：2003—08一05 反相离子对色谱法测定头孢三嗪的含量 祁江李艳枫 哈药集团制药总厂(150086) 摘要 目的：以反相离子对色谱法(IPC)测定头孢三嗪的含量。方法：色谱柱为Waters600泵 C85弘m(3．9mm×150mm)，流动相为乙腈一复合缓冲液(28：72)；反离子为四丁基溴化铵；检测波 长为270nm。结果：在浓度34．1～79．6pm／ml的范围内，浓度与峰面积呈良好的线性关系。本法回 收率为99．4％。结论：此方法简便、快速、准确、可作为测定头孢三嗪的含量的方法。 关键词 头孢三嗪；高效液相色谱；离子对色谱 万方数据 黄芪化学成分的研究 作者： 李继红， 李永吉， 李秋红， 关艳彬 作者单位： 李继红(辽宁农业职业技术学院,115214)， 李永吉,李秋红,关艳彬(黑龙江中医药大学) 刊名： 黑龙江医药 英文刊名： HEILONGJIANG MEDICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2004,17(2) 被引用次数： 2次 参考文献(4条) 1.王伟 红化岩黄芪黄酮类成分研究[期刊 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 ]-药学学报 2002(03) 2.刘勤 13C-NMR在黄酮雷化物结构鉴定中的应用[期刊论文]-中国医学科学院学报 1990(05) 3.宋纯清 膜甲黄芪中的紫檀烷和异黄烷化合物 1997(12) 4.吕归宝 黄芪中黄酮类似物的分离鉴定 1984(10) 引证文献(2条) 1.温燕梅 黄芪的化学成分研究进展[期刊论文]-中成药 2006(6) 2.关延彬.李永吉.管庆霞.李秋红 复方黄芪注射剂中黄酮部分指纹图谱的研究[期刊论文]-中药材 2006(2) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hljyy200402010.aspx