8种中草药对耐药金葡菌的最小抑菌浓度检测

［3］江苏新医学院编. 中药大辞典（ 下册 数学七年级下册拔高题下载二年级下册除法运算下载七年级下册数学试卷免费下载二年级下册语文生字表部编三年级下册语文教材分析 ）［M］. 上海科学技 术出版社，1986. 2001. ［4］张克锦.薢总皂甙对实验性鹌鹑动脉粥样硬化的预防作 用［J］.中草药，1990，21（11）：25. ［5］消淑杰，许健鹏，等.疗脊髓损伤尿路感染方剂———连萆 知柏汤的体外抑菌实验研究［ J］. 国康复理论与实践， 1996，12（4）：25. ［6］龚海洋，王 红，许 哲，等 . 二十一种中药对小鼠免疫 药理作用的初步研究［J］.中药药理与临床，1995（2）：30 - 31. ［7］陈秀菊.自拟萆薢苍龙汤治疗乳糜尿 34 例［ J］. 山西中 医，1994，10（1）：29. ［8］翁维良，房 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 亭. 临床中药学［M］. 河南科学技术出版 社，1998，5：611 - 612. ［9］史正芳，王繁宏.中西医结合治疗痛风性关节炎 36 例临 床体会［J］.中医药研究，1999，5（4）：30 - 31. ［10］毕雅安.萆薢分清钦治疗多寐症一则［J］.吉林中医药， 2000，（2）：54. ［11］刘 静，杨立新.化瘀渗湿汤治疗静脉曲张性小腿溃疡 22 例［J］.吉林中医药，1999，（5）：32 - 33. ［12］王艳文.萆薢渗湿汤加减合外敷治疗婴幼儿湿疹 20 例 ［J］.内蒙古中医药，2000，19（SI）：42. （收稿：2004 - 09 - 06；修回：2005 - 02 - 05） ! 种中草药对耐药金葡菌的最小抑菌浓度检测 陈文伟，肖丽英 （佛山市第一人民医院，广东 佛山 528000） 摘要：目的 检测对耐药金葡菌敏感的部分中草药的最小抑菌浓度，为临床配制治疗耐药金葡菌感染的中药制剂提供药物与 剂量的依据。 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 将经实验证明对MRSA有效的 8 种中草药，采用肉汤稀释法测定其对耐药金葡菌的最小抑菌浓度。结果 8 种中草药对耐药金葡菌的最小抑菌浓度分别为：九节茶、白芍、黄芩：62. 5 mg / ml，丹皮、黄连、厚朴：15. 6 mg / ml，夏枯草： 7. 8 mg / ml，诃子：1. 0 mg / ml。结论 8 种中草药中对MRSA最敏感是诃子，使用剂量最小，其次是夏枯草、丹皮、黄连、厚朴，最 次为九节茶、白芍、黄岑。对制备治疗 MRSA感染的中药制剂，可供药物与剂量的参考。 关键词：中草药；耐药金葡菌（MRSA）；最小抑菌浓度（MIC） 中图分类号：R285. 6 文献标识码：A 文章编号：1007 - 9939（2005）03 - 0072 - 02 作者简介：陈文伟（1958 -），男，中专，主管药师，从事医院药学工作。 目前治疗 MRSA 感染最有效的药物为万古霉 素，该药仅能静脉给药，具有耳、肾毒性和低 pH 值 所致静脉炎等不良反应，且有可能出现 MRSA 的耐 药菌株。因此，开发研究其他抗 MRSA 有效的药物 势在必行。药物 MIC 的测定对指导临床用药和设 计最佳给药 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 具有重要意义。本文将经实验证明 对MRSA有效的 8 种中草药对临床分离的MRSA进 行 MIC检测，为临床配制治疗 MRSA 感染的中药制 剂提供药物与剂量的实验依据。 "# 实验材料 MRSA菌种（临床标本分离菌株，由佛山市第一 人民医院临床检验中心提供）， 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 金葡菌（CMCC （B）26003）、MH培养基（北京陆桥商检新技术公司 010213）；MH 肉汤（北京陆桥商检新技术公司 020117）；注射用苯唑西林钠（石家庄制药集团有限 公司 030508）；8 种中草药（佛山市中草药购销批发 部提供）。 $# 实验方法 $. "# 实验液的准备 8 种中草药各加水浸过药面，煎煮 3 次，第 1 次 1. 5 h，第 2 次 1. 0 h，第 3 次 0. 5 h，合并 3 次滤液， 浓缩为每 1 ml含原药 0. 5 g 的药液，沸水浴灭菌 45 min，备用。 $. $# 试验菌种培养 用接种环挑取由临床检验中心提供的 MRSA 琼脂斜面上部菌落，用平板划线法接种含 4%氯化 钠的 MH培养基中，置 37 C培养 24 h，用接种环挑 取强壮菌落 2 - 3 个，移至 50 mlMH 肉汤（含 4% NaCl）培养液中，置 37 C培养 24 h，待检前调节菌液 浓度至 0. 5 麦氏比浊管浊度。 ·27· 广 东 药 学 2005 年第 15 卷第 3 期 2. 3 确认实验菌种对甲氧苯唑西林耐药试验 取 MH培养基加入 4%氯化钠和每 1 ml含 6 !g 苯唑青霉素制成平板，用消毒棉签醮取 0. 5 麦氏比 浊管浓度的待检菌液（于管壁去除过剩菌液）涂布 于 1 / 4 平板，以同浓度的标准金葡菌作对照，37 C 培养 24 h，结果涂布过待检菌的 1 / 4 平板有菌生 长，其余 3 / 4 平板没有菌生长。而用标准金葡菌作 对照的平板没有菌生长。 2. 4 系列药液的配制（试管稀释法）［1］ 取 98 支试管排成 8 排，每排 12 支（另 2 支分别 为空白与空白 +菌），分别标记，在标号 2 - 12 管中 各加入含 4%氯化钠的（下同）MH 肉汤 5 ml，在每 排的第 1、2 管各加入 5 ml 药液（0. 5 g / ml），依次对 倍稀释至 12 管，各管中药液浓度依次为：500、250、 125、62. 5、31. 3、15. 6、7. 8、3. 9、2. 0、1. 0、0. 5、0. 25 mg / ml，灭菌备用。 2. 5 测试菌准备 增菌培养生长后的菌液用适量 MH肉汤培养液 校正浓度至 0. 5 麦氏比浊管浊度，再用 MH肉汤 1 I 10 稀释，使含菌量达 107 CFU / ml，作试验菌液。 2. 6 接种 用微量加样器取 250 !l MISA 试液菌液，依次 加入各试管中（空白除外），最终接种量为 5 > 105 CFU / ml，37 C培养 24 h，从各带菌药液中分别醮取 少量涂于 MH培养基，37 C培养 24 h，用肉眼观察， 抑制细菌生长的最低药物浓度为 MIC。 3 实验结果 8 种中药测得的 MIC值（! = 17） 药 物 名 称 诃子 夏枯草 丹皮 黄连 九节茶 厚朴 白芍 黄芩 MIC（mg / ml） 1. 0 7. 8 15. 6 15. 6 62. 5 15. 6 62. 5 62. 5 4 结论 通过 8 种中草药对 MRSA 的 MIC 检测，为进一 步进行动物试验，制备治疗 MRSA 的中药制剂，提 供药物与剂量的实验依据。 5 讨论 5. 1 影响结果重现性的重要因素是接种菌量。比 浊法本身存在较大的主观误差，且本实验以 MH 肉 汤培养 MRSA，菌管与比浊管底色不一致，比浊时易 造成主观误差。可用平板数菌法验证接种菌量。 5. 2 本实验药液颜色较深，难以用肉眼观察加菌培 养后的药液混浊情况，故醮取少量加菌药液涂于平 板上培养 24 h，才能清楚显示药液的抑菌效果。 5. 3 文献介绍［2］ Mic的实验方法有 3 种，分别为纸片扩散法，琼 脂稀释法和肉汤试管稀释法。其他方法还有平皿打 洞法、挖沟灌药法、杯管法、滤纸条法等。而琼脂稀 释法和肉汤试管稀释法均可作为体外抗菌作用研究 方法，而后者较前者结果敏感，精确性、重现性好，且 操作简便，故本实验选用后者作为实验方法。 5. 4 由于目前无论是患者服用中药或是抑菌实验， 多以水煎剂型为主。所以本实验也采用水煎剂进行 抑菌实验，但如何计算实验结果是一个值得讨论的 问题。据文献报道［3］，中药样品的计量“最好能对 所含主要成分进行定量，或以提取物含量作指标，那 种以原生药相当量作为质量指标较粗，所得结果重 复性差。”本实验从 17 次结果中选取重现次数多者 为结果。 5. 5 本次实验不仅为抗感染中药填补了一些抑菌 数据，而且在由 MRSA 所致病菌引起的感染或耐药 日益增多的情况下，增加了一条新的治疗途径。 参考文献： ［1］倪语星. 微生物学和微生物学检验实验指导［M］. 北 京：人民卫生出版社，1999.（7）：40 - 43. ［2］李义奎. 中药药理实验［M］. 上海：上海科技出版社， 1991. 260 - 262. ［3］陈奇.中药药理研究方法学［M］. 北京：人民卫生出版 社，1991. 259 - 262. （收稿：2004 - 10 - 09；修回：2004 - 11 - 30） ·37·广 东 药 学 2005 年第 15 卷第 3 期 8种中草药对耐药金葡菌的最小抑菌浓度检测 作者： 陈文伟， 肖丽英 作者单位： 佛山市第一人民医院,广东,佛山,528000 刊名： 广东药学 英文刊名： GUANGDONG PHARMACEUTICAL JOURNAL 年，卷(期)： 2005,15(3) 被引用次数： 11次 参考文献(3条) 1.李义奎 中药药理实验 1991 2.倪语星 微生物学和微生物学检验实验指导 1999 3.陈奇 中药药理研究方法学 1991 引证文献(11条) 1.刘颍.曹敏.谢为天.徐春厚 鼠李糖乳杆菌LT22培养物主要活性物质的研究[期刊论文]-中国乳品工业 2010(3) 2.翟凤艳.郭东峰.刘英杰 我国植物源杀菌剂研究现状及展望[期刊论文]-广东农业科学 2010(8) 3.郑全喜.苏显中.王河清.于敏.李明 中草药体外抑菌作用的研究进展[期刊论文]-中国医药生物技术 2009(4) 4.刘亚丽.剡根强.王静梅 新疆地区黄花蒿粗提物的体外抑菌效果观察[期刊论文]-石河子大学学报（自然科学版） 2009(4) 5.宋德平.谢勇飞.朱斌 四种兽用抗生素的体外抑菌效果评价[期刊论文]-广东畜牧兽医科技 2009(6) 6.郑法新.程璐.李侠.刘群 云南红豆杉内生放线菌TAR11活性代谢产物的初步研究[期刊论文]-生物技术通讯 2009(4) 7.伍小松.罗振福.李俊波.杨丹丹.贺建华.范志勇 天蚕素类抗菌肽的抗菌性能测定及其性质研究[期刊论文]-中国 畜牧兽医 2009(2) 8.金建玲.赵平.李复伟 pH值对诃子体外抑菌活性(MIC)测定的影响作用[期刊论文]-内蒙古中医药 2008(8) 9.董燕.李斌.罗平.龙宇鹏.李军.王仙园.周红 以可溶性PBP2a为靶点筛选拮抗MRSA中药的实验研究[期刊论文]-中 华医院感染学杂志 2008(4) 10.楼乔明.杨文鸽.竺巧玲.孙爱飞 海洋放线菌XS904活性代谢产物的初步研究[期刊论文]-宁波大学学报（理工版 ） 2007(4) 11.郭新春 38种中药提取物对4种植物病原菌抑制活性的初步研究[学位论文]硕士 2006 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_guangdyx200503038.aspx