夹心法 ELISA 结果处理实例
夹心法 ELISA 因为是正曲线,处理起来说是简单,但也有一点点的技巧。现以以下一组数据为例,仔细的用
EXCEL 来处理结果。
样本号
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 0
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 5
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 10
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 25
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 50
样本 样本 样本 样本 样本 样本 标准品 100
样本 样本 样本 样本 样本 样本
样本 样本 样本 样本 样本 样本
OD 值
0.273 0.265 0.167 0.274 0.805 0.631 0.025
0.210 0.238 0.328 0.269 0.338 0.261 0.111
0.223 0.147 0.141 0.289 0.590 0.256 0.205
0.513 0.184 0.204 0.443 0.284 0.118 0.610
0.152 0.249 0.155 0.732 1.712 0.270 1.338
0.355 0.268 0.903 0.295 0.483 0.299 2.176
0.416 1.108 0.197 0.442 0.144 0.412
0.337 0.252 0.250 0.544 1.804 0.628
再用这个 OD 为 X 轴,标准品浓度为 Y 轴,作一曲线。如下图,OD 放左排,标准品浓度放右排,全部选中,
再点插入(I),下拉菜单中点图
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
(H),出来图表向导,在标准类型的左边,选 XY 散点图:
www.bioyou.com
再点完成,如下图
0.000
20.000
40.000
60.000
80.000
100.000
120.000
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500
系列1
接下来,用鼠标放在任一点上,点右键,再点击添加趋势线(R)。如果点右键出现的是另一些按键,请重新点
击(鼠标放在任一点上是必需的)
www.bioyou.com
弹出如下图
www.bioyou.com
一共有六个曲线,可选四个,可以先选线性(L),再点选项。
如下图:
选中显示公式(E)和显示 R 平方值(R),默认是没选中的。选中后点确定。
于是图表及方程如下:
www.bioyou.com
y = 44.348x - 1.3353
R2 = 0.9869
-20.000
0.000
20.000
40.000
60.000
80.000
100.000
120.000
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500
系列1
线性 (系列1)
我们看 R 平方值并不理想。大多数点并没落在线上。所以处理成直线并不合适。
先将直线删掉。再回到添加趋势线(R)那一步。
选中多项式。当然,也可以用对数试一下。接下来点左上的选项,选中显示公式(E)和显示 R 平方值(R),
选中后点确定。
出现如下图
www.bioyou.com
y = 7.577x2 + 28.144x + 1.9433
R2 = 0.9957
0.000
20.000
40.000
60.000
80.000
100.000
120.000
0.000 0.500 1.000 1.500 2.000 2.500
系列1
多项式 (系列1)
如果没出选方程和 R 平方值,肯定是忘了选中显示公式(E)和显示 R 平方值(R)可以重做。我们再看这个
表,R 平方值高一点。
得到方程:y =7.577x2 + 28.144x + 1.9433。X就是OD值。
再代入公式就可以直接算出结果。(以 A1 处的数据记算到 A11 处)
弹出如图:
www.bioyou.com
选中 SUM,确定
出现如下,将公式放入下筐,点确定就可以(那意思是用 A1 处的 OD 值算出浓度放到 A11 处)
计算出一个后,再往下拉八往,停一下,往总体往右拉七排。所有的值就算出来了。
如果想保留小数点后两位。可以全部选中,
再点格式(O)下拉中选单元格(E),也可以直接按 Ctrl+1(记得一定要选中目录数据。)
www.bioyou.com
选中数值,小数位数为 2。
www.bioyou.com
最终结果如下。
10.19 9.93 6.85 10.22 29.51 22.72 2.65
8.19 9.07 11.99 10.06 12.32 9.81 5.16
8.60 6.24 6.06 10.71 21.19 9.64 8.03
18.38 7.38 8.00 15.90 10.55 5.37 21.93
6.40 9.42 6.49 26.60 72.33 10.09 53.16
12.89 10.03 33.54 10.91 17.30 11.04 99.06
14.96 42.43 7.78 15.86 6.15 14.82 1.94
12.29 9.52 9.45 19.50 77.37 22.61 1.94
比较标准品计算值与实际值
2.65 0.000
5.16 5.000
8.03 10.000
21.93 25.000
53.16 50.000
99.06 100.000
有差别,但大体还是合上了。所以认为最终的计算是没有问题的。
www.bioyou.com