基因工程模板nullnull专题一：null基因工程的应用：2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿,我国约6000万。
治疗糖尿病特效药——胰岛素。
每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~~5g。1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内，
实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。思考：基因的表达与基因的什么过程有关？密码子在生物界是 的！通用null基因工程的产物：null基因工程的概念：基因工程，又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照
人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加
以修饰改造，然后放到另一种生...
nullnull专题一：null基因工程的应用：2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿,我国约6000万。
治疗糖尿病特效药——胰岛素。
每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~~5g。1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内，
实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。思考：基因的表达与基因的什么过程有关？密码子在生物界是 的！通用null基因工程的产物：null基因工程的概念：基因工程，又叫DNA重组技术。通俗的说，就是按照
人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加
以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向
地改造生物的遗传特性。DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→ 拼接→ 导入→ 表达null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论达尔文提出生物进化论null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论孟德尔提出基因的分离定律和自由组合定律null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论摩尔根证明基因在染色体上， 并提出基因的连锁互换定律。null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论艾弗里证明DNA是主要遗传物质，DNA可
从一种生物个体转移到另一种生物个体。null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论 沃森、克里克提出DNA的双螺旋结构模型。null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论克里克等提出中心法则null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程早期基础理论1963年尼伦伯格和马太破译编码氨基酸的
遗传密码，1966年霍拉纳用实验加以证明。null科技探索之路：基础理论和技术发展催生了基因工程1)基因转移载体的发现
2)工具酶的发现
3)DNA合成和测序技术的发明
4)DNA体外重组的实现
5)重组DNA表达实验的成功
6)第一例转基因动物问世
7)PCR技术的发明nullnull问题探讨：苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。
让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。想一想：完成抗虫棉的培育，需要哪些关键工作？null基因工程培育抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫特性)提取抗虫基因通过运载体导入转基因棉花含抗虫基因转基因棉花有抗虫特性苏云金芽孢杆菌转基因棉花产生伴胞晶体思考：在以上过程中关键步骤或难点是什么？null基因工程培育抗虫棉的关键步骤：关键步骤一：抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来关键步骤二：抗虫基因与棉花DNA“缝合”关键步骤三：抗虫基因进入棉花细胞“分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶“分子缝合针”—— DNA连接酶“分子运输车”——载体null一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”3作用结果：识产生黏性末端或平末端。
思考：限制酶在于原核生物中的作用？null1. 种类与命名 现在已经从约300种微生物中分离出了约4000
种限制性内切酶(限制酶)。粘质沙雷氏杆菌
（Serratia marcesens）SmaⅠ大肠杆菌
（Escherichia coli R）EcoRⅠ练习：流感嗜血杆菌的d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分离到3种限制酶，则分别命名为:HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ命名方法null1. 作用特点——断开磷酸二酯键磷酸二酯键H2O +null1. 作用特点——断开磷酸二酯键限制性内切酶与DNA解旋酶的区别切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键将DNA两条链的氢键打开形成两条单链限制性内切酶与DNA水解酶的区别切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键，形成片段的DNA.切割磷酸二酯键，形成单个的脱氧核苷酸。null1. 作用特点——断开磷酸二酯键限制酶的识别序列——回文序列回文序列：
在切割部位，一条链
正向读的碱基顺序与
另一条链反向读的顺
序完全一致。null1. 作用特点——断开磷酸二酯键 EcoRⅠ黏性末端 黏性末端null1. 作用特点——断开磷酸二酯键SmaⅠ平末端 平末端null二、“分子缝合针” —— DNA连接酶3作用原理：催化磷酸二酯键形成null1.E·coli DNA连接酶或T4DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键null2.T4DNA连接酶 T4 DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低T4DNA连接酶null3.连接酶类型总结E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源功能大肠杆菌T4噬菌体恢复
磷酸
二酯键只能连接黏性末端能连接黏性末端和平末端(效率较低)相同点差别null4.比较：DNA连接酶与DNA聚合酶1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键1)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键2)以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键连接成一条互补的DNA链2)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板null三、“分子运输车” ——载体null常用的载体：质粒能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在，可用含氨苄青霉素的培养基鉴别null课堂练习：在基因工程中，切割运载体和含有
目的基因的DNA片段，需使用（ ）
A. 同种限制酶 B. 两种限制酶
C. 同种连接酶 D. 两种连接酶
Anull课堂练习：2.不属于质粒被选为基因运载体的
理由是 （ ）
A、能复制
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNADnull课堂练习：3.以下说法正确的是 （ ）
A、所有的限制酶只能识别一种特定的
核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个
限制酶切点，以便与外源基因连接
D、基因控制的性状都能在后代表现出来Cnull谢谢观赏WPS OfficeMake Presentation much more fun@WPS官方微博
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