炖制时间对女贞子中红景天苷含量的影响

2009年 4月 � 第 11卷 � 第 4期 中国现代中药 Modern ChineseM ed ic ine Apr�2009� Vo l�11� No� 4 饮片炮制 [通讯作者 ] � * 张学兰, E-m a i:l zhang8832440@ sina� com 炖制时间对女贞子中红景天苷含量的影响 张学兰 1* , 侯杰1, 李慧芬 1, 王瑞芳 2 ( 1�山东中医药大学, 山东 � 济南 � 250014; 2�山东省济南市妇幼保健院, 山东 � 济南 � 250001) [摘要 ] � 目的: 研究炖制时间对女贞子中红景天苷含量的影响。方法: 以红景天苷含量为指标, 对女贞子生 品及加黄酒炖制不同时间 ( 4, 8, 12, 16, 20, 24h) 的炮制品进行比较。用 H PLC测定红景天苷含量。结果: 6种 酒炖品中红景天苷含量较生品增加 1�19~ 11� 88倍; 且随着炖制时间的延长 , 炮制品中红景天苷含量逐渐升高。结 论: 炖制时间对女贞子中红景天苷含量有较大的影响, 女贞子炮制后可产生红景天苷。 [关键词 ] � 女贞子; 酒制; 炖制时间; 红景天苷 女贞子为木犀科植物女贞 L igustrum Lucidum A it�的干燥成熟果实, 具有滋补肝肾、明目乌发的 功能 [ 1]。 �中国药典 � 2005年版载有女贞子和酒女 贞子两种炮制规格, 其酒女贞子的炮制方法为酒炖 法或酒蒸法 [ 1] , 但尚缺乏客观的工艺技术参数和科 学的饮片质量标准。目前对酒女贞子的炮制工艺研 究, 多以齐墩果酸和熊果酸含量为指标 [ 2] , 缺乏水 溶性特征成分指标, 尚不能客观确切地反映女贞子 酒制后的本质变化。本研究以红景天苷含量为指标, 对女贞子生品及加黄酒炖制不同时间炮制品进行比 较, 为探讨女贞子炮制机理, 优化女贞子炮制工艺, 制定女贞子饮片质量标准, 提供实验依据。 1� 仪器与试药 1�1仪器与材料 Ag ilent1100高效液相色谱仪 (含 DAD二极管阵 列检测器,美国 Ag ilent公司 ); HP色谱工作站 (美国 Ag ilent公司 ) ; JA2003N型电子天平 (感量 0�001g, 上海科技仪器公司 ) ; FA1604N型电子天平 (感量 0�000 1g, 上海精密科学仪器有限公司 ); KQ-250E 型医用超声波清洗器 (功率 250W, 频率 40kH z, 江 苏昆山市超声仪器有限公司 )。 女贞子药材购自济南市建联药店, 经本校周凤 琴教授鉴定为木犀科植物女贞 L igustrum Lucidum A it�的干燥成熟果实。红景天苷对照品 (中国药品 生物制品检定所, 供含量测定用, 批号为 110818- 200404); 高效液相用乙腈 (色谱纯 ); 其余试剂均 为 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯。即墨老酒 (山东即墨黄酒厂 )。 1�2样品的制备 女贞子生品: 取原药材, 拣去杂质, 残留的果 梗。作为 1号样品。 女贞子酒炖品: 取净女贞子 100g, 置不锈钢饭 盒中, 加黄酒 20g拌匀, 闷润 6h, 密封, 放入锅屉 上, 用蒸汽加热, 依次炖制 4, 8, 12, 16, 20, 24h, 取出, 摊于瓷盘中, 烘箱中 50� 烘干, 取出, 放凉, 塑料袋密封。作为 2~ 7号样品。 2� 方法与结果 2�1含水量测定 取各样品粉末 (过 2号筛 ) 2�0g, 按 �中国药典 � 2005年版一部附录 � H 水分测定法 (烘干法 )测定 ( n= 3) , 结果 1~ 7号样品的含水量依次为 7�39%, 7�21%, 5�59%, 6�76% , 6�34%, 6�74%, 7�61%。 2�2红景天苷含量测定 2�2�1对照品溶液的制备 � 精密称取红景天苷对照 品 2�51mg置 5mL容量瓶中, 加入 30%乙醇溶解并 稀释至刻度, 摇匀, 即得。 2�2�2色谱条件 � 色谱柱: K romasil C18柱 ( 5�m, 4�6mm � 200mm ); 检测波长为 224nm; 柱温为 30� ; 流动相: 乙腈-水 ( 7�93) ; 流速为 1�0mL�m in-1。 2�2�3线性关系考察 � 精密吸取红景天苷对照品溶 液 0�01, 0�02, 0�05, 0�1, 0�2, 1mL, 置 1mL棕 色容量瓶中, 分别加 30%乙醇定容至刻度, 摇匀。 各取 20�L注入液相色谱仪, 测定峰面积。以进样 量为横坐标, 峰面积为纵坐标绘制标准曲线, 结果 红景天苷的线性范围为 0�104~ 10�04�g, 回归方程 �35� 2009年 4月 � 第 11卷 � 第 4期 中国现代中药 Modern ChineseM ed ic ine Apr�2009� Vo l�11� No� 4 为 Y= 2 397�9X - 82�639, r= 0�999 9。 2�2�4供试品溶液的制备 � 取各样品粉末 (过 3号筛 ) 约 0�2g, 精密称定, 置锥形瓶中, 精密加入 30%乙 醇 20mL, 密塞, 摇匀, 称定重量, 超声 30m in, 取 出, 放冷, 再称定重量, 用 30%乙醇补足减失的重 量, 摇匀, 滤过, 即得。 2�2�5精密度试验 � 取女贞子酒炖 8h的供试品溶 液, 连续进样 6次, 测定红景天苷的峰面积, 结果 6次测得红景天苷峰面积的 RSD = 1�83% , 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明仪 器精密度良好。 2�2�6稳定性试验 � 取女贞子酒炖 8h的供试品溶 液, 在室温下自然放置, 分别在 0, 2, 4, 6, 8, 12h进行测定, 结果 6次测得红景天苷峰面积的 RSD= 1�75% , 表明供试品溶液在 12h内稳定。 2�2�7重复性试验 � 取女贞子酒炖 8h的供试品溶 液, 平行 6份, 按供试品溶液的制备方法制备并测 定, 结果 6次测得红景天苷含量的 RSD = 1�55%, 表明测定方法重复性良好。 2�2�8加样回收率试验 � 取女贞子酒炖 8h的样品, 共 6份, 各约 0�2g, 精密称定, 精密加入红景天苷 对照品溶液 ( 0�494mg�mL- 1 ) 0�4mL, 再精密加入 30%乙醇至 20mL, 按供试品溶液的制备方法制备并 测定, 结果见表 1。 表 1� 红景天苷加样回收率试验 序号 取样量 / g 样品中含 量 /m g 测得量 /mg 回收率 /% 平均回 收率 /% RSD /% 1 2 3 4 5 6 0�201 2 0�200 3 0�202 5 0�200 1 0�199 8 0�200 4 0�221 3 0�220 3 0�222 8 0�220 1 0�219 8 0�220 4 0�414 8 0�412 2 0�420 1 0�416 7 0�412 5 0�414 4 97�93 97�12 99�85 99�49 97�52 98�18 98�35 1�11 � 注: 红景天苷加入量均为 0�197 6m g 2�2�9样品含量测定 � 取各供试品溶液, 用 0�45�m 滤膜滤过, 各取滤液 20�L注入液相色谱仪, 测定 峰面积, 色谱图见图 1~ 2。按干燥品计算样品中红 景天苷的含量, 结果见表 1。 表 2� 红景天苷含量测定结果 序号 样品 �x /% RSD /% 增加倍数 1 生品 0�043 1�81 2 酒炖 4h 0�094 1�80 1�19 3 酒炖 8h 0�110 0�85 1�56 4 酒炖 12h 0�156 1�00 2�63 5 酒炖 16h 0�263 0�71 5�12 6 酒炖 20h 0�379 0�42 7�81 7 酒炖 24h 0�553 0�32 11�86 � 注: n= 3 3� 小结与讨论 测定了女贞子生品及加黄酒炖制不同时间 ( 4, 8, 12, 16, 20, 24h ) 的炮制品中红景天苷含量, 结果 6种酒炖品中红景天苷的含量均明显高于生品; 且随着炖制时间的延长, 炮制品中红景天苷含量逐 渐升高; 酒炖 12h以后, 炮制品中红景天苷含量的 增加幅度明显加快。本研究说明, 炖制时间对女贞 子中红景天苷含量有显著的影响。 女贞子生品中红景天苷含量较低, 仅有 0�043%, 而 6种酒炖品中红景天苷含量较生品增 加 1�19~ 11�86倍, 说明女贞子酒炖后可产生红 景天苷。女贞子中的环烯醚萜苷类如女贞苷、特 女贞苷、异女贞子苷、新女贞苷、 10-羟基女贞苷 都含有红景天苷的结构母核。女贞子加酒炖制后 红景天苷含量增加, 分析是由于女贞子中的环烯 醚萜苷类性质不稳定, 炖制后水解生成次级苷红 景天苷所致。 传统认为, 生女贞子长于清肝明目, 滋阴润 燥。酒制女贞子寒滑之性减弱, 补肝肾作用增 强 [ 3]。现代研究表明, 女贞子中的红景天苷具有 抗疲劳 [ 4]、抗衰老 [ 5]、抗肝纤维化 [ 6 ]、抗肾间质 纤维化 [ 7]等作用。女贞子酒炖后红景天苷含量增 加, 与女贞子酒制后补肝肾作用增强有何关系, 有待深入探讨。 �36� 2009年 4月 � 第 11卷 � 第 4期 中国现代中药 Modern ChineseM ed ic ine Apr�2009� Vo l�11� No� 4 参考文献 [ 1] 国家药典委员会 �中国药典 (一部 ) [ S] �北京: 化学工业 出版社, 2005: 31� [ 2] 宋磊, 丁安伟 ,黄海燕 � 女贞子炮制工艺的研究 [ J] �中 药新药与临床药理, 2007, 18( 1): 64-65, 77� [ 3] 叶定江, 张世臣 �中药炮制学 [ M ] � 北京: 人民卫生出版 社, 1999: 502� [ 4] 陈亚东, 曹秀兰,田长有, 等 �高山红景天对小鼠耐缺氧、 抗疲劳及耐低温作用的影响 [ J] � 中国中医药科技, 2002, 9( 3) : 157-158� [ 5] 孙立群, 王宗贵, 朱洪权 ,等 �红景天甙抗二倍体细胞衰 老的实验研究 [ J] � 中国老年学杂志, 200,l 2 l( 3 ): 225-226� [ 6] 曾维政, 吴晓玲, 蒋明德 ,等 �红景天甙对肝纤维化大鼠 肝组织 CBP、Sm ad基因表达的影响 [ J] �世界华人消化杂 志, 2005, 13( 3) : 341-345� [ 7] 王亚平, 李伯祥 ��-平滑肌肌动蛋白在大鼠肾间质损伤时 的表达及红景天甙的保护作用 [ J] � 中华肾脏病杂志, 2000, 16( 2): 118� (收稿日期 � 2008-10-31) Effec t of Stew ing Tim e on the Content of Salidroside in L igustrum luc idum Ait� Zhang Xuelan 1 , Hou Jie 1 , L iHu ifen 1 , W ang Ru ifang 2 (1�Shandong University of TCM, J inan� Shandong� 250014, China; 2�J inanM aternity and Child CareH osp ital, J inan� Shandong � 250001, Ch ina) [Abstract] � Objective: To study the effect of stew ing t im e on the content of sa lid roside in L igu strum lu ci- dum A it�M ethods: L igustrum lucidum A it� and its processed produc ts o f different stew ing time ( 4, 8, 12, 16, 20, 24h) w ith yellow w inew ere com pared w ith the contents of sa lidroside taken as the index� And the con- ten ts of salidroside w ere determ ined byHPLC� Results: The contents o f sa lid roside in 6 k inds of processed prod- uc ts w are h ig er obv iously than ones ofL igustrum lucidum A it� A nd w ith the pro long ing o f stew ing t ime, the con- ten ts o f sa lidro side in the pro cessed productsw ere increased g radually� Conc lusion: The stew ing tim e has a great effec t on the content o f sa lidroside in L igu strum lucidum A it� , sa lidroside o f L igustrum lucidum A it�was pro- duced by stew ing� [Keywords] � L igustrum lucidum A it�; P rocessing w ith w ine; Stew ing time; Salidroside (上接第 26页 ) Content Determ ination of Arctiin and Arctigenin in Fructus Arctii from Different Cultivation P laces and the D ifferent Parts ofArctium Lappa L � and F ingerprintAnalysis of Fructus Arctii K ang Ka i 1 , Dou Deq iang 1 , Kang T ingguo 1 , Xu Liang 1 , L� Zh i1, Chang Yu2, L iuM iao2 (1�L iaoning University of Trad itional ChineseM ed icine, Dalian� L iaon ing � 116600, China; 2�Institute of App lied E cology, Chinese Academy of Sciences, Shenyang� L iaoning� 110016, China) [Abstract] � Objective: To estab lish a HPLC method to determ ine the contents of arctiin and arctigenin in Fructus Arctii from different cu ltivation p laces and the d ifferent parts o fArctium Lappa L� and fingerprint o f Fructus A rct ii�M ethods: TheHPLC method w as employed by taking Ag ilent TC-C18 column ( 4�6mm � 250mm, 5�m ) and methano-lw ater ( 45�55 to 70�30 linear g rad ien t) as mob ile phasew ith detection w aveleng th at 280 nm� Results: The average recoveries of arctiin and arct igen in are 97�86% and 98�33% respectively� The linear equations w ere Y = 540�83X - 937�02( r= 0�999 9) and Y= 38�257X - 24�926 ( r= 0�999 8) � The sim ilarity ofHPLC fingerprintw as betw een 0�90 and 1�00� Conclusion: TheHPLC m ethod is simp le, accurate and sensitive� It can be used for deter- m inat ion o fA rct iin andA rctigen in ofFructus Arctii� The results indicate that the contents of v illus、pericarp、 invo lu- cre、 bud ofArctium lappa L� are higher than the other parts� The HPLC fingerprint method can be used for qua lity contro l o f FructusA rct ii� [Keywords] � HPLC; Fructus A rcti;i A rctiin; A rctigenin; F inger print �37�