API谱图解析

API API 谱图解析谱图解析 提纲 z 同位素峰 z 加合物和二聚体 z 氮 规则 编码规则下载淘宝规则下载天猫规则下载麻将竞赛规则pdf麻将竞赛规则pdf z 断裂 z 多电荷 z 常见的背景离子 质子 中子 原子结构 粒子 质量, amu 电荷 电子 0.00055 -1 质子 1.0073 +1 中子 1.0087 0 e- e- e- e- e- e- 同位素 质量数 = 质子 + 中子 C126 C136 原子序数 = 质子数 具有相同的原子序数而又具有不同的质量数的原子 叫作同位素 同位素丰度 质量, amu % 天然丰度原子符号 氮 14N 14.0031 99.64 15N 15.0001 0.36 硫 32S 31.9721 95.0 33S 32.9715 0.76 34S 33.9679 4.22 氯 35Cl 34.9689 75.77 37Cl 36.9659 24.23 溴 79Br 78.9183 50.69 81Br 80.9163 49.31 原子重量 质量, amu % 天然丰度符号 碳 12C 12.0000* 98.89 13C 13.0033 1.11 * 国际 协议 离婚协议模板下载合伙人协议 下载渠道分销协议免费下载敬业协议下载授课协议下载 赋予其确切的质量为12 原子量 (C) = 0.9889(12.0000) + 0.0111(13.0033) = 12.011 一种元素的所有同位素的重量平均值叫作原子量 怎样计算质量数 z 名义质量数 ‹采用元素质量数的整数进行计算 ‹例如：C=12，H=1，O=16 z 单同位素质量数或精确质量数 ‹用丰度最大的同位素精确质量数计算 ‹例如：12C=12，1H=1.0078，16O=15.9948 z 平均质量数或化学质量数 ‹考虑到所有天然同位素丰度的该元素原子量来计算 ‹例如：C=12.001，H=1.00794，O=15.9994 z 四极杆质谱计获得的单电荷离子的m/z值，是单同位素 质量数，建议质谱峰标注到小数点后1位 分子量 利血平, C33H40N2O9,的MW的计算 使用原子量: 使用单一同位素质量: C: 33 x 12.011 = 396.363 C: 33 x 12.0000 = 396.000 H: 40 x 1.0079 = 40.316 H: 40 x 1.0078 = 40.312 N: 2 x 14.0067 = 28.013 N: 2 x 14.0031 = 28.006 O: 9 x 15.9994 = 143.995 O: 9 x 15.9949 = 143.954 608.687 608.272 分子量计算器 元素分类法 z A ‹仅有一种稳定同位素 ‹F, P, I, Na z A + 1 ‹同位素峰位于 m/z = A + 1 ‹C, N z A + 2 ‹同位素峰位于 m/z = A + 2 ‹O, S, Cl, Br, Si 同位素峰模型（A+1型） C1 C10 C100 m/z R.I. A 100 A+1 1.1 m/z R.I. A 100 A+1 11.0 m/z R.I. A 100 A+1 110 A+2 60 A+3 22 R.I. m/z 同位素峰模型(A+2型) Cl1 Cl2 Cl3 m/z R.I. A 100 A+2 32.5 m/z R.I. A 100 A+2 65 A+4 10.6 m/z R.I. A 100 A+2 97.5 A+4 31.7 A+6 3.4 R.I. m/z A+2型同位素峰相对强度的计算 采用下述二项式计算同位素峰的相对强度： (a + b)n = an + nan-1b + n(n-1)an-2b2/2! + n(n-1)(n-2)an-3b3/3! + … 其中：a和b是同位素的相对丰度(对于 Cl, a = 1, b = 0.325) n 是分子中同位素原子的数目 计算实例： n=3，即分子中含三个 Cl： (a + b)3 = 13 + 3(12)(0.325) + [3(3-1)(13-2)(0.325)2]/2 + [3(3-1)(3-2)(13-3)(0.325)3]/6 = 1 + 0.975 + 0.317 + 0.034 则：四个同位素峰的相对强度为：33：33：10：1 同位素峰模型(A+2型续) Br1 Br2 Br3 m/z R.I. A 100 A+2 98 m/z R.I. A 51 A+2 100 A+4 49 m/z R.I. A 34 A+2 100 A+4 98 A+6 32 R.I. m/z 质谱实例： 溴吡二氮卓,CC1414HH1010BrNBrN33O, MW = 315.0O, MW = 315.0 280 290 300 310 320 330 m/z0 100 % Bromazepam01 13 (0.270) Scan ES+ 1.64e7316.2 318.2 319.2 Br N N N H O 加合物: 极性分子能与样品或溶剂生成加合物,通常是通过离子或氢键 作用生成. 常见的是与 Na+, K+, NH4+, H2O, MeOH, 和 ACN 生成的加合物. C O C O H NH3 Na+ δ -δ - δ + δ + + 质谱实例: 溴吡二氮卓,CC1414HH1010BrNBrN33O, MW = 315.0O, MW = 315.0 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 m/z0 100 % Bromazepam01 15 (0.307) Cm (4:22) Scan ES+ 1.53e7 338.1 316.2318.2 332.2 319.2 354.2340.2 356.3 381.1379.2 Br N N N H O 二聚体 R R X-H+ m/z = R2H + R+R+ m/z = (R+2X -)+ M+ R- R- m/z = (M+R-2) - 质谱实例：苯丙氨酸(Phe), C9H11NO2, MW = 165.1 m/z = 331 是其二聚体 (Phe)2H+. 100 200 300 400 500 m/z0 100 % PHE04 33 (0.630) Scan ES+ 2.16e6166.0 105.1 331.1 167.0 328.1 238.1 332.1 379.0 496.1 HOOC H C NH2 CH2 氮规则 z 如果AH+ 含有奇数(odd)个氮原子, 则AH+ 的 m/z 为偶数( even). z 如果AH+ 含有 0 或偶数个( even) 氮原子,则 AH+ 的m/z 为奇数(odd). z 例如: ‹咖啡因, C8H10N4O2, m/z AH+ = 195 ‹扑热息痛, C8H9NO2, m/z AH+ = 152 断裂机理 z 增大样品锥孔电压可产生源内CID(断裂) z 源内CID 是一个低能量过程 z 发生断裂的离子具有: ‹ 弱的化学键 ‹ 可产生稳定的产物 质谱实例: 抗敏安, C17H22N2O, MW = 270.3 (单同位素 MW = 270.2). drug mix test 100 150 200 250 300 350 400 m/z0 100 % Terry1 96 (0.985) 1: Scan ES+ 3.40e5182.1 102.2 115.1 271.2183.1 272.3 N C CH3 C6H5 OCH2CH2N(CH3)2 质谱实例: 地塞米松,C22H29FO5, MW = 392.5 (单同位素MW = 392.2). drug mix test 150 200 250 300 350 400 450 500 m/z0 100 % TERRY1F 267 (2.696) Scan ES+ 7.17e4 319.3 355.3 337.3 373.4 237.1 434.4 393.4 O HO CH3 F CH3 C CH2OH O OH CH3 质谱实例: 曙红, C20H8Br4O5, MW = 647.9 (单同位素 MW = 643.7). C o n e R B = -7 3 4 0 0 4 5 0 5 0 0 5 5 0 6 0 0 6 5 0 7 0 0 m /z0 1 0 0 % E O S IN Y 0 3 1 (0 .5 1 5 ) S c a n E S - 7 .5 7 e 75 2 1 4 4 3 4 4 1 4 3 4 5 1 9 4 4 5 4 9 4 4 4 6 4 9 2 5 2 3 5 2 5 6 4 7 6 4 55 2 6 6 0 3 6 4 3 6 4 9 6 5 1 Br OH Br O COOH Br Br O 520 525 m/z0 100 % EOSINY03 1 (0.515) Scan ES- 7.57e7521 519 523 525 526 645 650 m/z0 100 % EOSINY03 1 (0.515) Scan ES- 1.41e7647 645 643 649 651 440 445 m/z0 100 % EOSINY03 1 (0.515) Scan ES- 4.02e7443 441 445 446 锥孔电压的影响锥孔电压的影响 Cone RB = -7 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 m/z0 100 % EOSINY02 1 (0.515) Scan ES- 2.54e7x4 325 647 323 322 321 265 645 324 643 649 651 Cone RB = -42 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 m/z0 100 % EOSINY01 1 (0.515) Scan ES- 6.03e7x4 647 645 643 523265 519311 649 651 多电荷多电荷 与与 聚合分布聚合分布 4 0 0 5 0 0 6 0 0 7 0 0 8 0 0 9 0 0 1 0 0 0 m /z0 1 0 0 % T R IT O N X 1 (1 .0 0 5 ) S c a n E S + 1 .5 0 e 86 2 5 .3 5 8 1 .3 5 3 7 .3 4 7 1 .3 6 6 9 .2 7 1 3 .3 7 5 7 .2 8 0 1 .3 8 4 5 .3 8 8 9 .3 9 7 7 .3 6 0 0 8 0 0 1 0 0 0 1 2 0 0 1 4 0 0 m /z0 1 0 0 % H O R S E 1 (0 .4 4 3 ) S c a n E S + 3 .0 1 e 78 4 8 .4 8 0 8 .2 6 1 6 .1 6 9 3 .9 8 9 3 .2 9 9 8 .2 1 0 6 0 .4 1 1 3 1 .3 1 2 1 1 .7 1 3 0 5 .4 多电荷离子的解析多电荷离子的解析 (M + nH)n+ [M + (n+1)H](n+1)+ [M + (n-1)H] (n-1)+ [M + (n-2)H](n-2)+ m/z a b c d M/z轴上,b处离子所带电荷数n(整数)为n =c/(c-b) 分子量可以通过以下公式计算: a x (n + 1) - (n + 1) b x n - n c x (n - 1) - (n - 1) d x (n - 2) - (n - 2) 专用软件可用 (Transform and MaxEnt) 常见的流动相离子常见的流动相离子 来源 离子 m/z 乙腈 CH3CN+H+, (CH3CN)2+H+ 42, 83 甲醇 CH3OH+H+, (CH3OH)2+H+ 33, 65 三乙胺 (CH3CH2)3N+H+ 102 甲酸/甲酸盐 HCOO- 45 乙酸/乙酸盐 CH3COO- 59 三氟醋酸 CF3-, CF3COO-, ((CF3COO)2H)- 69, 113, 227 常见的杂质(污染物)离子 来源 鉴定 m/z (ESI+) 溶剂 邻苯二甲酸二辛酯 149, 167, 279, 391, 413 未知物 N-丁基苯磺酰胺 214, 236 未知物 未知 242 甲酸 (high %) 未知 454 乙酸 (high %) 未知 538 解析API质谱时有用的质量差 --正离子方式 (M + H)+ 1７ (M + NH4)+ 16 (M + Na)+ (M + K)+ 522 38 (M + MeCN + H)+ 41 --负离子方式 解析API质谱时有用的质量差 (M - H)- 36 & 38 (M + HCOO)- (M + CH3COO)- (M + CF3COO)- 46 60 114 (M + Cl)- Questions?Questions? API 谱图解析 提纲 原子结构 同位素 同位素丰度 原子重量 怎样计算质量数 分子量 分子量计算器 元素分类法 同位素峰模型（A+1型） 同位素峰模型(A+2型) A+2型同位素峰相对强度的计算 同位素峰模型(A+2型续) 质谱实例： 溴吡二氮卓,C14H10BrN3O, MW = 315.0 加合物:极性分子能与样品或溶剂生成加合物,通常是通过离子或氢键作用生成. 常见的是与 Na+, K+, NH4+, H2O, MeOH, 和 ACN 生成的加合物. 质谱实例: 溴吡二氮卓,C14H10BrN3O, MW = 315.0 二聚体 质谱实例：苯丙氨酸(Phe), C9H11NO2, MW = 165.1 m/z = 331 是其二聚体 (Phe)2H+. 氮规则 断裂机理 质谱实例: 抗敏安, C17H22N2O, MW = 270.3 (单同位素 MW = 270.2). 质谱实例: 地塞米松,C22H29FO5, MW = 392.5 (单同位素MW = 392.2). 质谱实例: 曙红, C20H8Br4O5, MW = 647.9 (单同位素 MW = 643.7). 锥孔电压的影响 多电荷 与 聚合分布 多电荷离子的解析 常见的流动相离子 常见的杂质(污染物)离子 解析API质谱时有用的质量差 解析API质谱时有用的质量差 Questions?