心肌营养素_1基因与神经干细胞移植治疗脑创伤的实验研究

�� 川 ! ��∀#∃ % 。、一� ∀、, 、� & ∋∋( ) ∗ �&+ ) ,, 一 ,− ) 令 一 今 卜杏 今 「一令 今 论七 著司卜 月卜 月卜 月卜 司卜 杏 ) 心肌营养素 一 基因与神经干细胞移植治疗脑创伤的 实验研究 杨云华 , 廖维宏& , 张艺梅. �’解放军昆明总医院神经外科 / 0∋�+ 犯 1 &第三军医大学大坪医院野战外科研究所第三研究室 ,∋ ∋∋,& , 解放军 /∋ 医院医务处 /∗ ∋∋ .+ 关键词 创伤性脑损伤 , 神经功能障碍 , 神经干细胞 , 心肌营养素 ) , 基因治疗 , 细胞移植 , 大鼠 摘要 目的 � 观察重组腺病毒介导的心肌营养素 一 ∀�2 34 一5 6 7+及 5 6 一 基因转染的神经干细胞�% 85 一5 67 +对创伤性脑损 伤�6 9 ∀+ 大鼠模型脑功能障碍的作用。 方法 � 以 2 34 一:6 7转染 % ;: 8 1 2 34 一5 67 以及 % 85 一5 67 移植于大鼠 6 97 模型 , 应用水迷宫实验和穿梭箱实验观察6 97 迷宫潜伏期 、 主动回避次数和回避失败次数等记忆功能指标的变化。 结果 � 大 鼠 6 9 7后 0 一 , 3 的迷宫潜伏期减少 、 主动回避次数增加和回避失败次数减少 1 相比 2 34 一:67 治疗组 , % ;: 一:6 7移植 治疗后大鼠的迷宫潜伏期减少 、 主动回避次数增加和失败次数减少。 结论 � 6 97 后 0 一 , 3 创伤大鼠迷宫潜伏期延长、 主动回避次数减少和回避失败次数增加 , 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明 697 后大鼠学习记忆功能障碍1 2 3 4 一:67 或% ;: 一:67 移植治疗697 大鼠 , 大鼠迷宫潜伏期减少 、 主动回避次数增加和回避失败次数减少 , 表明移植治疗可改善大鼠学习记忆功能 1 % ;: 一:6 7移 植治疗后大鼠学习记忆功能恢复较 23 4 一:6 7转染治疗组好 , 表明 :6 一 ∀修饰的 %;: 8移植治疗697 记忆功能障碍疗效优 干 2 34 一:67 转染治疗 。 < ==> 5 ?8 ≅ = :6 · Α > ∃ > Β ∃ 3 Α > ∃ > ?#5 Β ∀∀4 Χ ≅ 3 #=# >3 % ;: 8 6 Δ Β ∃ 8Ε∀Β ∃ ?Β ?#≅ ∃ ≅ ∃ 6 ΔΒ Φ Γ Β ?#5 9 Δ Β #∃ #∃ Η Β ?8 以% Α 翔 ∃ 一万Φ Β ∀ , 乙从。肠#一脚∃ Ι ϑ , ϑ月Δ2 % Α Κ 一油 . 7Λ > ΜΒ Δ?Γ >∃ ? ≅ =% > Φ Δ ≅ 8Φ Δ Ι > Δ4, Ν Φ ∃ Γ #∃ Ι Α > ∃ > Δ Β ∀ Ο ≅ 8Μ#?Β ∀ ≅ => Κ> ∃ Ι 3 Φ > ≅ Γ Γ Β ∃ 3 , Ν Φ ∃ Γ #∃ Ι , /0∋ ∋.& � ϑΗ > 8> ΒΔ > Κ 7∃ 8?#?Φ ?> ≅ = 8Φ ΔΙ >Δ4, 6 Κ#Δ3 Χ#∀#?Β Δ4 Χ > 3#5 Β ∀ Π ∃ #Θ >Δ8#?4 , :Κ≅ ∃ Ι Ρ#∃ Ι , , ∋∋∋,& � .Λ > ΜΒΔ? Γ > ∃ ? ≅ = ;Φ ΔΙ >刁 , /≅ ?Κ Ο ≅ 8Μ#?Β∀ ≅ =:Κ> ∃ Ι 3 Φ : ≅ Γ Γ Β ∃ 3 , Σ Φ ∃ ∃ Β ∃ Λ Β∀#, /∗ ∋∋ . , :Κ#∃ Β Ν < Σ Τ Υ Η Λ ; ?ΔΒ Φ Γ Β ?#5 ς ΔΒ #∃ #∃Ω Φ Δ41 ∃ > ΔΘ > 3 48=Φ ∃ 5?#≅ ∃ 1 ∃ > Φ Δ Β ∀ 8?> Γ 5 > ∀∀1 > Β Δ 3 #≅ ?Δ ≅ ΕΚ #∃ ·∀ 1 Ι > ∃ > ?Κ >Δ ΒΕ4 1 5 > ∀∀ ?ΔΒ ∃ 8Ε∀Β ∃ ?Β ?#≅ ∃ 1 Δ Β ? 29 ;6 Η 2: 6 2 #Γ � 6 ≅ ≅ ς8> ΔΘ > ?Κ > >==> > ?8 ≅ = 2 3 > ∃ ≅ Θ #ΔΦ 8 �2 3 4 +一:6 7 ≅ ∃ ?Κ> Δ> > ≅ Θ > Δ4 ≅ = ςΔ Β #∃ 348=Φ ∃ > ?#≅ ∃ Ε≅ 8?一?Δ ΒΦ Γ Β ?#> ςΔΒ #∃ #∃Ω Φ Δ4 �6 9 7+, Β∃ 3 ?≅ Β∃ Β∀4Ξ > ?Κ> ?Κ> ΔΒ Ε4 Γ >5 ΚΒ∃ #8Γ 8 ≅ =2 3 4 一:6 7 Γ ≅ 3 #=# > 3 % ;: 8 �% ;: Ψ :6 7+≅ ∃ 6 9 7) Χ >?Κ≅ 3 8 � 6 Κ > 6 9 7 Γ ≅ 3 > ∀Ζ Β 8 > 8?Βς ∀#8Κ > 3 #∃ Δ Β?8 , Β =? > Δ ?Δ Β∃ 8Ε∀Β∃ ?Β ?#≅ ∃ ≅ =2 3 4 一: 6 7 Β ∃ 3 % ;: Ψ : 6 7 #∃ ?≅ ?Κ> #∃Ω Φ Δ > 3 ς Δ Β #∃ #∃ 6 9 7 ΔΒ ? 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Γ Γ , Η ι ⊥ . ) ∋ 7∃ ∀∀ ∀ , ϕ ι 一. ) / Γ Γ 1 . � 2 ι 一& ) − Γ Γ , Η ι ⊥ & ) 0 Γ Γ , ϕ ι 一 . ) / Γ Γ 。 对照组大鼠伤后立即注射 2 3 4 病毒液�∀ ) . κ ∋ ’两 ·ΓβΨ ,+ , 2 3 4 一> 6 7组注射 2 3 4 一> 6 一病毒液�. ) . φ ∋ ” Μ=Φ ·毗一 ’+ , % 8> 一> 6 7组注射制备好的 % 8> 一> 6 7�∀ φ ∋ − 个细胞 φ Γ β+。 每只动物 / 个注射点 , 每个注射点注射液体 & 林β 。 学习记忆功能行为学检测实验 ∀ ) Χ ≅Δ Δ# ; 水迷宫实验 � 于动物 6 97 处置前 . 3 进行 训练和检测 , 并于伤后 0 、 ∗ 、 ∋ 及 , 3 分别检测 。 计 数大鼠寻找安全岛的搜寻潜伏期 , 超过 −∋ 0 者以 −∋ ; 计算 。 水迷宫专用圆形池子�直径 0 ∋ 5 Γ , 高 0 ∋ 5 Γ + 注入清水 , 约 .∋ 5 Γ 深 , 加入 λ 奶粉使水变得不透明 , 呈乳白色 , 水温 && 一&0 ‘: 。 将直径 ∋ 5 Γ 的有机玻璃平 台固定位于水面下 5 Γ , 其位置在每次实验中固定 。 预 先 =大鼠头部标记黑色染发剂 , 将大鼠置 于水迷宫中 , 让其适应水迷宫环境 。 学习过程中 , 大鼠随机在 . 个不 同象限头朝池壁下水 。 任其游泳 , 直到找到平台 。 大鼠 找到平台的时间和轨迹由水池上方的摄像机 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 。 −∋ ; 内到达平台的时间即潜伏期被记录下来 , 并允许大鼠 在平台上停留 ∋ 0 以达到强化记忆的效果 , 如果大鼠 在 − ∋ 0 内未达到平台 , 潜伏期以 − ∋ 0 记录 , 并由实 中国χμ市床神经科学&�+ ∋( 年第价 卷第& 期 验者将其放在平台上停留 ∋ 0 。 每次实验后将大鼠毛吹 干 , 放人笼子 , 训练间断 &∋ Γ #∃ 。 然后大鼠被连续训练 直至达到稳定 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 , 即能够连续在 &∋ 0 内到达平台 , 根 据分组其实验结果记录为各组正常数据 , 并可进行下一 步实验。 & )穿梭箱实验 � 于大鼠 697 前 . 3 进行训练和检测 , 其实验结果根据分组记录为各组的正常数据 , 并于伤后 0 、 ∗ 、 ∋ 和 , 3再分别予以检测 。 每只实验大鼠的每 次检测进行 &∋ 次训练 , 计数大鼠的主动回避反应�Β5 ?#Θ> Β Θ ≅ #3 Β ∃ > > Δ > 8Ε≅ ∃ 8> +次数 、 被动回避反应�ΕΒ 88#Θ > Β Θ ≅ #3 Ψ Β ∃ > > Δ > 8Ε≅ ∃ 8> +次数及回避反应失败�Β Θ ≅ #3 Β ∃ > > Δ> 8Μ ≅ ∃ 8> =Β #∀+次数。 穿梭箱结构 � 箱体为深蓝色有机玻璃制成 , 大小为 ,− > Γ ε & > Γ ε &0 > Γ , 箱内垂直隔板将箱体分为 2 、 9 室 , 两室间有小门相通 。 两室底部为不锈钢栅 , 栅间 距 ) 0 > Γ , 加非条件刺激�Φ ∃ >≅ ∃ 3 #?#≅ ∃ > 3 ;?#Γ Φ ∀Φ ; , Φ 8+ 有电流通过 , 电击动物足底部。 两室的顶盖上配置有灯 泡�光刺激+ , 用来产生条件刺激�>≅ ∃ 3#?#≅ ∃ 8?#Γ Φ ∀Φ 8 , > 8+。 计算机通过控制电路可自动控制各种刺激信号的开启和 关闭 , 检测电路可测出动物在穿梭箱的位置 , 并将信号 传送给计算机 。 电流刺激器由计算机控制可产生电流 , 电流强度可程控。 采用恒流刺激 , 可避免动物皮肤接触 阻抗不同而造成的影响 , 优于电压刺激。 穿梭箱实验参数设置 � 条件刺激类型为光刺激 , :; 进程 0 0 , Π ; 时程 0 0 , 非条件刺激强度为 0 Γ 2 , 适应 时间& 而 ∃ , 训练间隔为随机�∀一.∋ 0+ , 训练次数均为 &∋ 次。 实验前训练大鼠 , 主动回避反应在∗0 λ 以上 , 无回 避反应失败者为合格。 随机分组制作创伤模型并分组注 射药物 , 于各时相点经穿梭箱实验测定大鼠主动回避反 应 、 被动回避反应及回避反应失败的次数 。 统计学方法 对各组水迷宫潜伏期 、 主动回避反应 、 被动回避反应和回避反应失败次数等数据以了士 、表示 , 用 Υ==# 5> ϑ∋ ∋∋ 一< ⎯ 5> ∀统计程序进行 ?检验分析组间差别!, 以 尸ν ∋ ) ∋ 0 、 ∋ ) ∋ 为差异显著统计学意义 。 结 果 水迷宫实验 通过对水迷宫潜伏期检测统计 , 发现 相对于创伤前的正常水平 , 各组于伤后 0一 , 3 潜伏期明 显延长�Ε ν ∋) ∋ +。 2 34 一:6 7或% ;: 一:6 7移植治疗后 , 其 潜伏期未完全恢复至正常水平 , 但已较对照组明显缩短 �Ε ν ∋ ) ∋ +。 比较 2 3 4 一:6 7和 % ;: 一:6 7联合移植治疗组 结果 , %;: 一:6 7治疗组潜伏期在 0一 , 3 比 2 3 4 一:6 7转 染组减少�Ε ν ∋ ) ∋ +�表 ∀+。 表 创伤性脑损伤后的水迷宫潜伏期吓士8+ 6 Β ς 6 Κ > ∀Β ?> ∃ >4 ≅ = Γ ≅ Δ Δ #8 Ζ Β ?> Δ Γ Β Ξ Ξ Ε≅ 8?一6 9 7 �了士8+ 分 组 Α Δ≅ Φ Ε 创伤性脑损伤后的水迷宫潜伏期�8 +“万 6Κ > ∀Β?> ∃ >4 ≅ = Γ ≅ ΔΔ#8 Ζ Β ?> Δ Γ Β Ξ Ξ Ε≅ 8 ?一 69 7�8+ ∗ 3 】∋ 3 , 3 ,<常�% ≅ ΔΓ Β∀+ 对照组 ∋ −名士( , 0 ∗& ) (士 − ) , 00 ) ,士∗ &( . ) 0士0 ) ∋& − , 士& ) ∗/ : ≅ ∃ ?Δ≅ ∀Ι Δ≅ ΦΕ 2 3 4 一:6 7 治疗组 ( 0 &士− , ∋ ’ /& ) /士∗刀’ , 0 ∗ 士0 0 , , & , ) Δ士0刀& ’ − ) , 士. ) ∋∋ 2 3 4 一:6 7 ?Δ> Β ?Γ > ∃ ? Ι Δ≅ Φ Ε % ;〔, 一> 6 7治疗组 −0 ∗ 士8刀& & 00 , 士∗刀& ., ) ,士 0, & . −. 士 0名( & (一士& , & % ;: 一:6 7 ?Δ>Β? Γ > ∃ ? Ι Δ≅ Φ Ε 注 � ’尸ν ∋ ) ∋ 与对照组比 1 &尸ν ∋ ) ∋ 0 , ’尸ν ∋ , ∋ 与 2 3 4 一 5 6 7 治疗组比 1 ‘ 为各组分别在脑创伤后 0 、 ∗ 、 ∋ 及 , 3 的实验检测数据 1 ’正常数据 为。。 ∃ ?Δ。 ∴ 、 2 3 4 一5 6 7 、 % 85 一5 6 7 各组损伤前的实验检测数据 % ≅ ?> 8 � ∴尸ν ≅ , ≅ 一 Θ8 > ≅ ∃ ?Δ≅ ∀ Ι Δ ≅ Φ Μ 1 &尸ν ≅刀0 , 〕尸ν ≅力 Θ 8 2 3 4 一> 6 一?Δ>Β ?Γ > ∃ ? Ι Δ ≅ Φ Μ 1 , 0 ∗ , ∋ , , 3 Β=? > Δ ?Δ Β Φ Γ Β ?#> ς Δ Β#∃ #∃Ω Φ Δ4 #∃ ?Κ > Μ #∀≅ ? ?> 8?#∃ Ι 3 Β?Β 1 ; % ≅ ΔΓ Β∀ ≅ = > ≅ ∃ ? Δ ≅ ∀ 、 2 3 4 一 5 6 7 、 % 8 > 一> 6 7 Ι Δ ≅ Φ Μ 8 #∃Ω Φ Δ4 ς > =≅ Δ > ?Κ > ?> 8? 3 Β ?Β 穿梭箱实验 穿梭箱实验结果表明 � 与正常组比较 , 创伤各组于伤后0一 , 3大鼠主动回避反应次数显著下降 沪ν ∋ ) ∋ + 1 被动回避反应无显著差别 1 反应失败次数显 著增加�Μ ν ∋ )∋ +。 2 3 4 一: 6 7或 % ;: 一: 6 7移植治疗后主动 回避反应次数未恢复至正常水平 , 但较对照组明显增加 沪ν ∋ ) ∋ 0+ , 反应失败次数减少沪ν ∋ ) ∋ 0+ 。 比较 2 3 4 一:67 转染和 % ;: 一:6 7移植治疗结果 , % ;: 一: 6 7治疗组主动 回避反应次数在 0 一 , 3 时比 2 3 4 一: 6 7转染组增加沪ν ∋ ) ∋ 0+ , 反应失败次数减少�Εν ∋ ) ∋ 0 +�表 & , .+。 中国临床神经科学 & ∋ ∋ (年第 ∗ 卷第& 期 表 & 创伤性脑损伤后穿梭箱实验主动回避反应次数的变化吓士8+ 6 Βς & 6 Κ > >==> 5 ?8 ≅ = Β > ?#Θ> Β Θ ≅ #3 Β ∃ 5 > Δ > 8Ε≅ ∃ 8> Ε≅ 8?·69 7 #∃ 8Κ Φ ??∀> ς ≅ ⎯ �了士8+ 分 组 Α Δ≅ Φ Ε 穿梭箱实验主动冲γ避反应次数 , , 0 6Κ> ∃ Φ Γ ς> Δ ≅ = Β > ?#Θ> Β Θ ≅ #3 Β ∃ > > Δ> 8Μ≅ ∃ 8 > #∃ 8Κ Φ Δ?∀> ς≅ ⎯ 斗, ‘ ∋ 3 , 3 正‘#χ亏�% ≅ ΔΓ Β∀+ 对照组 / ) − 士 ) , ( ) ∗士 ) − . ) −土 ) − ,士 ) − ( − , ∗士∋月0 : ≅ ∃ ?Δ≅ ∀ Ι Δ≅ ΦΕ 23 4 一:6 7治疗组 − , 士 ) 0 − ’ & ) 士& & . ’ . 0 士 ) ∗& ’ 0 ) ∗士 ) ∗ ’ ( . 士 ) ∋ / 2 3 4 一:6 7 ?Δ>Β? Γ > ∃ ? Ι Δ≅ Φ Ε % ;: 一:6 7治疗组 ∋刀士 ) ( ∗ . , , 士 ) ,. & 0乃士 ) .0 & ∗ ) 士 ) & (士 ) ∋0 % ;:一:6 7 ?Δ> Β ?Γ > ∃ ? Ι Δ≅ Φ Ε 注 � ’尸ν ∋ ) ∋0 与对照组比 1 &尸ν ≅ , ∋0 , ’尸ν ∋ , ∋ 与 2 3 4 一 5 6 7 治疗组比 1 ‘ 为各组分别在脑创伤后 0 、 ∗ 、 ∋ 及 , 3 的实验检测数据 1 ’正常数据 为 5 。∃ ?Δ。∀、 2 3 4 一> 6 7 、 % 8> 一> 6 7 各组损伤前的实验检测数据 % ≅ ?> 8 � 尸ν ≅刀0 、0 > ≅ ∃ ?Δ≅ ∀ Ι Δ ≅ Φ Μ 1 &尸ν ∋ ) ∋ 0 , .尸ν ≅刀 Θ 8 2 3 4 一> 6 7 ?Δ >Β ?Γ > ∃ ? Ι Δ ≅ Φ Μ 1 , 0 , ∗ , ∋ , , 3 Β =?> Δ ?ΔΒ Φ Γ Β ?#> ς ΔΒ #∃ #∃Ω Φ Δ4 #∃ ?Κ> Μ#∀≅ ? ?> 8?#∃ Ι 3 Β ?Β 1 ;% ≅ Δ Γ Β ∀ ≅ = > ≅ ∃ ?Δ ≅ ∀, 2 3 4 一: 6 7) % ;: 一:6 7 只Δ ≅ Φ Μ 8 #∃ 一Φ ΔΘ ς > =≅ Δ> ?Κ> ?> 8 ? 3 Β?Β 表 . 创伤性脑损伤后穿梭箱实验反应失败次数的变化�了士8+ 6 Βς . 6 Κ > > ==> > ?8 ≅ = Β Θ ≅ #3 Β ∃ 5 > Δ > 8Ε≅ ∃ 8> =Β #∀ ≅ = :6 · Ε≅ 8?一6 9 7 #∃ 8Κ Φ ??∀> ς ≅ ⎯ �了士8+ 分 组 Α Δ≅ ΦΕ 穿梭箱实验反应失败次数, , 0 Η > 8Ε≅ ∃ 8> ?≅ ?Κ> =Β #∀Φ Δ> ≅ =?Κ > ∃ Φ Γ ς > Δ #∃ 8Κ Φ ??∀> ς ≅ ⎯ , , 0 , 3 正常�% ≅ ΔΓ Β ∀+ 一 �。一一对照组� ! ∀# ∃ % # &∋ ( )∗ 一�+, 治疗组 ( ) ∗ 一�+ , ∀#− .∀ / − ! ∀ % # &∋ 0 1� 一�+ , 治疗组 0 1� 一�+ , ∀#−.∀ / − ! ∀ % # &∋ 23 4 5士 2 4 6 7 8 4 9 士 : 4 ;< < 4 7士6 4 55 7 4 6士 24 29 = 4 ;士 = 4 8 7 2= 4 8士 2 4 ;8 > ; , 8 士 2 4 ;8 > 5 4 8 士 24 5 7 6 7 <士= ; 8 2 6刀士 2 4 53 > = 4 7士= 4 < 7 <刀士 24 3 7 = 4 5士 = 4 ;,一注 ? ’尸≅ = 4 = 7 与对照组比 Α 3尸≅ = 4 =7 , ’尸≅ = 4 =2 与 ( ) ∗ 一 Β + , 治疗组比 Α ‘ 为各组分别在脑创伤后 7 、 ; 、 2= 及 25 ) 的实验检测数据 Α ’正常数据为 Β 。! ∀# 。 ∃ 、 ( ) ∗ 一 Β + , 、 0 Χ Β 一 Β + , 各组损伤前的实验检测数据0 ∀ − Χ ? >尸≅ = 4= 7 、·7 Β ! ∀ # ∃ % # & Δ Α 3尸≅ 乃7 , 6尸≅ 刀 ∃ 飞, 7 ( ) ∗ 一 − + , ∀# − . ∀ / − ! ∀ % # & Δ Α 5 7 , ; , 2 = , 一5 ) . Ε∀ − # ∀ # .& / . #Φ − Γ # . Φ! Φ !Η & #∗ Φ ! ∀Ι − Δ Φ∃ ∀ ∀− Χ# Φ ! % ) . ∀ . ?1 0 # / . ∃ Ε − ! ∀ # ∃, ( ) ∗ 一 − + , , 0 Χ− 一 − + , % # & Δ Χ Φ!Η & #∗ Γ − Ε # − ∀Ι − ∀− Χ∀ ) . ∀ . 讨 论 本研究在大鼠+ϑ , 模型基础上 , 进行Κ ##Φ Χ水迷宫 实验和穿梭箱实验训练和测试 , 建立大鼠的学习记忆功 能障碍模型 。 根据水迷宫 、 穿梭箱实验的检测指标 , 观 察大鼠在 + ϑ, 后其Κ ## ΦΧ 水迷宫搜寻安全岛的潜伏期 、 穿梭箱的主动回避反应和 回避反应失败次数等指标明显 改变 Λ∋ ≅ = 4 =7 Μ , 随 + ϑ , 后时间的变化而形成一定规律 。 动物的学习记忆功能主要依赖海马功能 , 以海马为 主在大脑内构成学习记忆环路 , 是动物空间学习记忆的 基础 。 + ϑ , 后海马神经元损伤 , 导致学习记忆通路信咨急 传递障碍 , 是动物学习记忆功能障碍的主要原因。 有实 验表明 , 体外对细胞进行基因修饰 , 利用转染神经生长 因子的海马源性的神经前体细胞移植到 +ϑ, 脑中, 观察 到有明显的神经保护作用和对动物行为障碍有显著的改 善 Ν72 。 将 0 ΧΒΧ 移植至衰老大鼠模型脑内 , 0 Χ Β Χ 移植对 大鼠的学习记忆功能有显著的修复作用‘9 , 。 对脑缺血的 大鼠脑内进行 01� Χ 移植 , 也发现可明显改善大鼠学习 记忆功能 ,;> 。 0 ΧΒΧ 移植至损伤的脊髓内 , 可在体内存活 并可促进神经功能的恢复‘<> 。 0 ΧΒ Χ 可作为外源基因的载 体进行基因治疗 , 有实验将脑源性神经营养因子基因转 导人 0 1 � Χ 中 , 建立能表达脑源性神经营养因子的神经 干细胞系 , 此细胞移植入大脑纹状体后 , 脑源性神经营 养因子在宿主内能较好表达 , 并促进该部位神经元的生 存,8> , 移植的0 Χ Β 1在损伤局部还可通过旁分泌的作用促 进宿主脑组织的修复 Ο; , 。 Κ ## ΦΧ 水迷宫实验是研究动物对空间进行分辨主动 回避学习的一种检测方法 , 能较准确反应动物的学习记 忆功能‘’。: 。 搜寻潜伏期的变化是反映动物空间学习记忆 功能障碍以及恢复程度的重要指标之一 。 本实验通过 ,− 中国临床神经科学 &∋∋( 年第 ∗ 卷第& 期 进神经再生作用 , 以及% ;5 ;对脑损伤后的修复作用‘” , 可能是促进脑功能恢复的机制。 %;: 一:67 组中:6 一 ∀不 仅对治疗局部损伤神经元有保护作用 , 对 % ;: 8 在宿主 中的生长存活也具有促进作用 , % ;: 8在宿主中增殖 , 分 化为具有功能的神经元‘, , , 与宿主神经元建立新的突触 联系 , 有助于损伤的大脑神经功能恢复 , 因而对 69 7后 神经功能障碍有较好治疗效果。 Χ ≅ ?Δ# 8水迷宫实验观察到6 97 后 0一 , 3 , 创伤各组大鼠 潜伏期明显高于正常组沪ν ∋ ) ∋ + , 表明 6 97 后的脑损伤 导致神经功能障碍 , 表现为空间学习记忆功能下降。 697 后的大鼠脑中进行2 3 4 一:6 7或% ;: 一:6 7移植治疗 , 两 治疗组大鼠搜寻潜伏期比对照组降低�Ε ν ∋ ) ∋ + , 表明 69 7后 234 一:6 7或 % ;: 一:6 7移植治疗可改善大鼠空间 学习记忆功能障碍 , 加强神经功能恢复。 比较234 一5 67 或 %;: 一:6 7移植治疗后潜伏期的变化 , %;: 一:6 7组在 伤后 0一 , 3 均低于 2 34 一:6 7组沪ν Υ、∋0 + , 表明 % ;: 联 合 :6 一 移植治疗 697 疗效优于 2 3 4 一:6 7转染治疗。 穿梭箱实验通过检测动物双向回避反应 , 根据量化 数据评定动物认知和学习记忆功能‘川 。 主动回避反应表 示动物在条件刺激�本实验为光照+和非条件刺激�本实验 为电击+之间建立条件反射 , 反复训练使动物学习如何主 动回避伤害性刺激 , 并在伤害性刺激之前及时逃避 1 逃 避失败是动物在受到伤害性的非条件刺激后仍不能出现 逃避反应 , 往往处于惊恐状态 、 原地惊跳 , 不能从有电 击刺激的光亮小室逃避到无光亮 、 无电击的小室中 , 说 明动物对先前训练得到的学习记忆基本丧失 , 并且对 环境的变化缺乏正确的处理 。 本研究通过穿梭箱实验观察到 , 6 97 后 0一 , 3 创伤 各组大鼠主动回避反应次数明显低于正常组�Ε ν ∋ ) ∋ 0+ , 反应失败次数高于正常组�Ε ν ∋ ) ∋0 +。 创伤组大鼠主动回 避反应次数减少 , 反应失败次数增加 , 说明 697 后大鼠 记忆能力减弱 , 无法根据以前的训练经验作出正确的反 应 。 以 2 3 4 一:6 7或 % ;: 一:6 7移植治疗 69 7大鼠 , 观察 到治疗组大鼠主动回避反应次数比对照组有所回升沪ν ∋) ∋ 0+ , 反应失败次数下降�Ε ν ∋) ∋0 + , 表明6 9 7后2 3 4 一:6 7 转染或 % ;: 一:6 7移植治疗可改善大鼠学习记忆功能障 碍 。 比较 6 9 7后 2 3 4 一: 6 7转染或 % ;: 一:6 7移植治疗后 主动回避反应次数和反应失败次数的变化 , % ;: 一:6 7组 主动回避反应次数在伤后 0 一 , 3 高于 2 34 一5 6 7组�Ε ν ∋ ) ∋0 + , 而反应失败次数则低于 2 34 一:6 7组�Ε ν ∋) ∋0 + , 表 明% 85 8一:6 7移植治疗697 疗效优于234 一:67 转染治疗。 :6 一 是一种促神经生长细胞因子 , 现已证明在中枢 神经系统中起保护细胞作用 。 : 6 一 ∀对神经元的保护和促 参考文献 【&」 【.」 【, 0 〔/」 [∗ ∴ [− ∴ [( ∴ 【 ∋∴ 即Ε> ∃ Κ> #Γ Η Τ Τ #> 8> ; , ΕΔ > Θ > ??> Λ ) > ? Β ∀) :Β Δ3 #≅ ? Δ ≅ ΕΚ#∃ 一 ∀ , Β Γ Φ 8> ∀> 一 3 >Δ#Θ> 3 > 4? ≅ α#∃ > ) 0 Δ> Ρ Φ #Δ> 3 =≅ Δ ?Κ > 8Φ ΔΘ ∀Θ Β ∀ ≅ = 8 Φς Ε≅ ΕΦ ∀Β Ψ ?#≅ ∃ 8 ≅ = 3 > Θ > ∀≅ Ε#∃ Ι Γ ≅ ?≅ ∃ > Φ Δ ≅ ∃ 8【!∀) ! % > Φ Δ ≅ ∃ 8 > # & ∋ ∋ , & � & − . Ψ & ( ϑΚ Β∃ Ι ϑ δ , β#Β≅ Τ Ο ) ΣΒ ∃ Ι ]δ , > ? Β ∀) ΕΔ≅ ?>> ?#Θ > > ==> >?8 ≅ = Β3 > ∃ ≅ Θ #ΔΒ∀ > ΒΔ3 #≅ ?Δ≅ ΕΚ #∃ 一 Ι > ∃ > ?ΔΒ∃ 8 => Δ ≅ ∃ ΔΦ ς Δ ≅ 8Ε#∃ Β∀ ∃ >Φ Δ≅ ∃ 8 Β =? > Δ 8 Ε#∃ Β∀ >≅ Δ3 #勺Φ Δ4 #∃ Β 3 Φ ∀? ΔΒ?8【!」% > Φ Δ≅ ?≅ ⎯ # Η > 8 , & ∋ ∋ . ) 0 � 0 . ( 一 0 , − 杨石华 、廖维宏、 张正丰 、 等 ) 腺病毒介导的心肌营养素 ? 基因 修饰大鼠神经十细胞∀月 ) 中国临床康复, & ∋ ∋ 0 , ( � ( 一 杨石华 , 廖维宏 , 李栋平 、等, 大鼠脑创伤后移植神经干细胞的 存活 与分化【月 ) ‘ ‘华器官移植杂志 , & ∋ ∋ ∗ , & −� ∗ 一 & ∋ ΜΚ #∀一Μ 8 Χδ , Χ Β Δ?#Β 8≅ ∃ Α , Τ #> ∀≅ > Κ 6 , > Δ Β ∀ % > Φ Δ≅ Μ Δ ≅ ?> > ?#Θ > Β∃ 3 ς> ΚΒ Θ #≅ Δ#Β ∀> ==# >Β 54 ≅ = ∃ >Δϕ > Ι Δ ≅ Ζ ?Κ =Β >? ≅ Δ一 ?ΔΒ ∃ 8=> 5 ?> 3 Κ#ΕΕ≅ 5 Β Γ ΕΒ ∀ ΕΔ≅ Ι >∃ #?≅ Δ 5 >∀∀ ?ΔΒ ∃ 8Ε∀Β ∃ ?8 Β =? >Δ > ⎯ Ε> Δ#Γ > ∃ ?Β ∀?ΔΒΦ Γ Β?#5 ς Δ Β#∃ #∃Ω Φ Δ4 【! ) ! % > Φ Δ≅ 8Φ ΔΙ , & ∋ ∋ , ( , �∗ / 0 一∗ ∗ , ]Φ 6 , 9 ΔΒ∃ ∃ >∃ :β , Ν #Γ Ο Χ , > ? Β ∀) Ο Φ Γ Β∃ ∃ >Φ Δ Β∀ 8?> Γ >> ∀∀8 #Γ ΜΔ≅ Θ > > ≅ Ι∃ #?#Θ > =Φ ∃ >?#≅ ∃ ≅ = Β Ι> 3 ςΔΒ #∃ [!∴) % > ΦΔ ≅ Δ> Ε≅ Δ? , &∋χ+ , & � & ∗ 一 .& 6 ≅ 3 Β Ο , 6 α ΒΚΒ 8 Κ#! , 7Ζ Β αΒ Γ # % , > ? Β ∀) Α ΔΒ=? #∃ Ι ∃ > Φ ΔΒ ∀ 8?> Γ > > ∀∀8 #∃ ΕΔ ≅ Θ > 3 ?Κ > Δ> ΕΒ #Δ> 3 8ΕΒ ?#Β ∀ Δ>> ≅ Ι ∃ #?#≅ ∃ #∃ #8 5 Κ> Γ #Β Δ Β ?8【!」) % > Φ Δ ≅ 8> # β >?? , & ∋ ∋ , , �( 一 & Υ Ι Β Ζ Β Σ , ;Β Ζ ΒΓ ≅ ?≅ Ν , Χ #4Β ?Β 6 , > ? 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