PML与基因组稳定性[1]

ISSN (二N 1007-7626 中国生物化学与分子生物学报 11-3870/Q Chinese Journal of Biochemistrv and Molecular Biolo 2006年5月 22(5) :349一354 ·综述· PML与基因组稳定性 田宝磊，孙志贤 (军事医学科学院放封与辐射医学研究所，北京 100850) 摘要 基因组稳定性同肿瘤的发生、发展密切相关，维护基因组稳定性对于细胞行使正常的生理功 能是至关重要的.早幼粒细胞白血病蛋白PML(promyelocytic leukemia)主要借助分子中RBCC结构， 同近50种有重要功能的蛋白相互作用而形成PML-NBs (PML nuclear bodies). PML-NBs是与核基质 结合的、动态的、亚核多蛋白复合物，它作为区室化核结构(compartmentalized nuclear architecture)— 染色质间区室(interchromatin compartment)的功能单位，满足T真核基因高层次 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达 调控模式的时空要求.最新的研究证明:PML是基因组稳定性“守门人”— p53分子的搭档分子， 同样在基因组稳定性调控中发挥着重要的功能作用.它协同p53参与了DNA损伤反应所诱发的细 胞凋亡，还可组织多种DNA修复分子参与DNA损伤修复，在DNA损伤反应中具有重要作用;此外， PML还通过调控aurora A的活性参与中心体复制检查点调控，借助调控survivin的表达参与有丝分 裂纺锤体组装检查点调控，在染色体复制和细胞分裂中均显示了重要的调控作用.而当PML表达 缺失或不足时则与多种肿瘤的发生、发展相关联，因此PML分子在维护基因组稳定性中具有重要 功能作用，本文仅就相关的最新研究进展予以概述. 关键词 早幼粒细胞白血病蛋白;p53;基因组稳定性;凋亡;DNA损伤修复 中图分类号 Q343 Promyelocytic Leukemia (PML) Protein and Genomic Stability TIAN Bao-Lei，SUN Zhi-Xian' (Institute of Radiation Medicine，Academy of Military Medical Sciences，Beijing 100850, China) Abstract Genomic stability is frequently associated with tumor genesis and progression.Maintaining genomic stability is very important for cells exerting their physiological functions.By it's RBCC domain，promyelocytic leukemia(PML) protein can interact with nearly 50 proteins to form PML nuclear bodies(PML-NBs) which are dynamic, sub-nuclear and multi-protein complex combined with nuclear matrix.As a function unit of interchromatin compartment belon乡ng to compartmentalized nuclear architecture，PML can meet the time-space demands at high level of regulation of eukaryotic gene expression.Recent studies have shown that PML is a new partner of p53，as gatekeeper of genomic stability.It can cooperate with p53 to induce cell apoptosis in DNA damage response.And it can recruit several repair molecules to take part in DNA damage repair. Moreover, PML participates in centrosome duplication checkpoint by regulating aurora A activity and spindle- assembly checkpoint by regulating survivin expression.There fore，PML plays an important role in maintaining genomic stability by regulating cell apoptosis，DNA repair, chromosome duplication and mitosis. And loss or insufficiency of PML expression has been found in several tumors and carcinoma cells.All of those showed that PML may be a key molecule in maintaining genomic stability.Here，we review and discuss the recent development in research of the relationship between PML and genomic stability. Key words promyelocytic leukemia; p53;genomic stability;apoptosis;DNA repair 收稿日期:2005-09-14，接收日期:2006-01-24 国家自然科学基金项目(No.30572145)资助 联系人 Tel: 010-66931218, E-mail: sunm @ me. bmi. ac. en Received: September 14,2005; Accepted: January 24,2006 Supported by National Natural Science Foundation of China(No.30572145) 餐Corresponding author Tel:010-66931218, E-mail :sums@nic.bmi.ac.cn 中国生物化学与分子生物学报 22卷 基因组稳定性(genomic stability)指全部基因组 信息，包括染色体结构、染色体数目、表遗传信息等 准确的从一个母细胞传到两个子代细胞，它所强调 的是一个过程而不是一种状态.细胞基因组稳定性 是由包括细胞周期检查点(cell cycle checkpoint), DNA损伤修复和重组 (DNA damage repair and recombination)以及细胞凋亡(cell apoptosis)机制构成 的复杂网络所调控{’〕.如果这些调控机制受到损害 将会导致基因组不稳定性的发生，按照类型，基因组 不稳定性 分为染色体不稳定性 (chromosomal instability, CIN)和微卫星不稳定性(microsatellite instability, MSI)，后者是由于错配修复基因(MLH1, MSH2,PMSI等)突变或者沉默造成，而CIN又可以 具体的分为数量CIN(非整倍体)和结构CIN(染色体 缺失、易位、均匀染色区、双微体).参与DNA损伤检 查点调控的蛋白(ATM, ATR, CHK1, CHK2, p53等)及 参与非同源末端连接的蛋白(DNA-PK, Ku70等)和 同源重组的蛋白(MRE1/RAD50/NBS1)发生突变或者 缺失是造成结构性 CIN的主要原因;而细胞周期蛋 白E(cyclin E)过表达、BRCA1和BRCA2突变、aurora A扩增及p53失活是造成数量CIN的主要原因。永 久性或暂时性的基因组不稳定性是肿瘤细胞最基本 的特征，表现为有丝分裂纺锤体组装检查点调控、 DNA损伤反应信号网络分子、端粒维持功能的缺失 以及染色体拷贝数目异常.肿瘤抑制分子p53是基 因组稳定性基石— DNA损伤反应中最为核心的 转录因子，是对细胞“生与死”进行抉择、维护基因组 稳定性的“守门人川’〕.而新近的研究发现p53的搭 档分子— 早幼粒细胞白血病蛋白PM L可以协同 p53维护基因组的稳定性，更引人关注的是PML分 子本身还可以通过p53不依赖的方式参与细胞基因 组稳定性的调控〔’〕.本文就PM L蛋白与基因组稳定 性的最新研究进行了概述. 蛋白并无直接的DNA结合能力.RBCC结构是PM L 蛋白与其他蛋白相互作用以及自身寡聚化的功能结 构域[a1.而C末端的不同剪接形式使得不同PML蛋 白的功能存在差异，此外，除了PML-VIIb亚型外，其 他已经发现的PML分子都具有核定位信号(nuclear localization signal, NIS)，研究证实PML蛋白主要定位 在细胞核内的不连续的斑点体状结构中，并且PML 蛋白是形成这种结构的关键分子，因此该结构被称 为PML核体(PML-NBs). PML-NBs是一种与核基质 相连的亚核的、动态的多蛋白复合物，大小和形状随 着细胞周期或者外界的刺激而发生变化，它作为区 室化核结构— 染色质区室的功能单位，满足了高 层次真核基因表达调控模式的时空要求[[5].目前已 经证实能够长期或暂时定位在PML-NBs中的蛋白 超过50个，如p53, pRB, CBP, HDAC, Daxx, AP-1, Sp I , TIFa , Ubc-9 ,SUMO- I等，这些分子参与了细胞中 广泛的生物学事件，与此对应PML蛋白及PML-NBs 在病毒感染、复制性衰老、DNA损伤修复、细胞凋 亡、RNA转运等多种细胞生物学事件中发挥着重要 功能，众所周知，所有这些事件均同基因组稳定性密 切关联. 1 PML蛋白的结构和主要功能 PM L蛋白是早幼粒细胞白血病蛋白的简称，因 C末端剪接形式不同而形成多种PML蛋白分子，大 小介于45 kD - 96 kD之间.所有PML分子都具有相 同的N末端，既由一个环指结构、两个锌指样 B-box 和一个卷曲螺旋结构构成的RBCC结构(ring finger domain, two B-boxes and a a-helical coiled-coiled domain, RBCC)，也称为TRIM结构(TRIpartite motif) . 其中环指和B-box富含半胧氨酸，曾被认为是PML 与DNA相互作用的区域，但后来的研究却发现PML 2 DNA损伤反应中PML蛋白协同p53诱导 细胞凋亡维护基因组稳定性 细胞凋亡是维护细胞自稳平衡，即细胞增殖、分 化、死亡中最重要的细胞生物学事件之一 基因组稳 定性同凋亡的关系至少遵循以下3种模式:首先，基 因组不稳定性能够导致细胞凋亡调控分子突变或者 表达水平的改变;其次，凋亡障碍利于基因组不稳定 性的产生，事实上多种细胞机制都遵循着“宁死勿 错”(better dead than wrong)的原则，这意味着那些基 因组受到损害或者失控的细胞将通过凋亡的方式被 剔除，以避免潜在的致癌突变被复制并遗传.DNA 双链断裂、端粒功能障碍、非整倍体和非正常分裂均 可以直接诱发细胞凋亡，如果凋亡因某些原因被抑 制，则发生基因组不稳定性的几率会大大增加，那些 能够适应生存的突变细胞将获得生长优势，最终导 致肿瘤的发生;最后，凋亡和基因组稳定性的调控存 在对话，也就是说同一个蛋白往往可以同时参与这 两种调控[’;.在肿瘤生成，尤其在其生成的初级阶 段，凋亡抑制和基因组不稳定性之间的关系犹如“鸡 和蛋”的关系— 相互促进而不确定其先后顺序，但 毫无疑问的是诱导基因组发生改变的潜在的致癌性 细胞发生凋亡是维护基因组稳定性和细胞正常功能 第5期 田宝磊等:PML与基因组稳定性 的重要方式. PML蛋白得以维护基因组稳定性的重要方式就 是调控细胞凋亡!它是多个凋亡通路的“节点”，在 多个凋亡通路调控中都发挥十分重要的作用[[6] PML敲除小鼠和细胞的研究结果显示:PML缺失的 小鼠或细胞可以耐受致死剂量的电离辐射所诱发的 细胞凋亡，并且CD95/Fas、神经酞胺、TNF, IFN等诱 发的细胞凋亡也受到强烈的抑制，说明PML蛋白及 PML-NBs在p53依赖(IR)和p53不依赖(CD95/Fas ) 的凋亡调控中具有极其重要的作用!’〕.随后的研究 发现PML蛋白不仅在这些半胧氨酸蛋白酶依赖的 细胞凋亡中具有重要的作用，同时还参与了半肤氨 酸蛋白酶不依赖的细胞死亡[B].这些都表明了PML 蛋白及 PML-NBs在细胞凋亡调控中的特殊作用. Bernardi[0[对PML蛋白在细胞凋亡中的作用做出了 精辟的概括:PML蛋白及PML-NBs可以作为一种分 子接线板(molecular hubs)选择性地动态地调控凋亡 相关的转录事件，诱导或/和增强细胞凋亡的发生. 人们熟知，在 DNA损伤诱发的细胞应激反应 中，p53是最为关键的调控分子，它主要借助其转录 因子功能，诱导细胞周期阻滞、DNA损伤修复和凋 亡相关基因的转录，一方面，使得发生损伤的细胞发 生周期阻滞以便进行DNA损伤修复，另一方面诱导 那些损伤严重而不能被正确修复的细胞发生凋亡， 如前所述，它是维护基因组稳定性的“守门人”.在胸 腺细胞中，IR所诱发的细胞凋亡完全依赖于p53的 存在，在这个过程中PML蛋白同样具有关键性的作 用，表明PML在p53介导的凋亡中可能具有重要的 地位.研究证明:PML蛋白(PML-W)和p53之间存在 直接的相互作用，在DNA损伤反应中它们共同定位 在PML-NBs中，PML蛋白作为p53的转录共激活因 子诱导细胞的凋亡〔9] , Gottifredi等[1o〕称其是p53诱 导细胞凋亡的“新伙伴”. 在DNA损伤应激反应中，p53分子发生磷酸化、 乙酞化、去泛素化等共价修饰，这些修饰一方面增加 p53稳定性，使p53蛋白量增加;另一方面，增加了 p53的DNA结合能力，进而促进其转录激活或者抑 制功能，诱导下游促凋亡基因或抑制下游抗凋亡基 因的表达，从而诱发细胞凋亡.而在这些过程中PML 蛋白发挥着重要作用.首先，DNA损伤反应中p53被 募集到PML-NBs中，并且被同时募集到其中的激酶 HIPK2 (homeodomain interacting protein kinase 2)对其 Ser46磷酸化，Ser46的磷酸化对于p53的凋亡诱导 能力至关重要，HIPK2则作为p53的转录共激活因 子共同促进凋亡发生.其二，p53场s382的乙酞化也 由共定位在PML-NBs中的CBP修饰，CBP/p300也是 p53重要的共转录激活因子，Lys382的乙酞化同p53 的DNA结合活性以及转录激活能力密切相关[11.12] 其三，p53在PML-NBs中的定位也同样增加其稳定 性.本实验室[13〕以及Wei等〔141研究结果都证明， PML蛋白缺失导致p53的稳定性下降，相应的转录 激活下游凋亡相关基因的能力也下降，细胞凋亡受 到明显抑制.PML蛋白有可能通过以下几种机制调 节p53的稳定性:1)干扰p53与MDM2的相互作用: MDM2是p53的E3连接酶，介导p53通过泛素一蛋白 酶体途径进行降解，在没有外界压力的情况下使得 p53蛋白量保持在一个很低的水平，是p53最为重 要的负调控因子，PML蛋白、p53以及MDM2三者之 间存在相互的作用.因此，PML蛋白可能通过竞争结 合的方式使得p53-MDM2复合物减少，从而提高p53 的稳定性[15] .2) PML-NBs中p53的修饰增加其稳定 性:p53的磷酸化、乙酞化以及SUMO-1修饰都可以 在PML-NBs中完成，这些修饰都可以抑制p53的泛 素化修饰，从而增加p53的稳定性.3)提供p53与去 泛素化修饰的平台:p53稳定性另一个重要的调控 分子 HAUSP ( herpesvirus-associated ubiquitin-specfic protease)也定位在PML-NBs中，该分子是p53的去泛 素化酶，即使在MDM2表达很高的情况下它仍可以 保护p53不被泛素一蛋白酶体途径降解}'61, p53和 HAUSP共定位在PML-NBs中可能为它们相互作用 提供了平台. 概述这些研究结果可以知道，对p53凋亡诱导 功能至关重要的翻译后修饰，如磷酸化、乙酞化、去 泛素化等都发生在PML-NBs, PML-NBs可能作为一 个“工厂”，为p53同其他蛋白的相互作用以及修饰 提供一个平台和装配“车间”，修饰和装配完成的 p53转录复合物可以结合到下游凋亡相关基因的启 动子上，从而激活促凋亡基因或者抑制抗凋亡基因 的转录，诱导细胞凋亡的发生.因此，PML蛋白是参 与p53维护基因组稳定性的一个重要“伙伴”. 3 PML蛋白通过调控DNA损伤修复而参 与基因组稳定性维护 DNA损伤应激反应中另一个重要的事件是周 期阻滞和DNA损伤修复反应，细胞 DNA在受到损 伤后首要任务是修复损伤，只有那些损伤严重而不 能被修复的细胞才通过凋亡的方式被剔除，能够被 正确修复的细胞可以解除周期阻滞再次进人正常的 中国生物化学与分子生物学报 22卷 复制和分裂，因此保证损伤的DNA正确修复同样是 维护基因组稳定性的一种重要途径.最近的研究发 现多个同维护基因组稳定性和/或DNA修复、重组 相关的蛋白在特定的细胞周期或DNA损伤时均能 够定位到PML-NBs，表明 PML蛋白及 PML-NBs在 DNA损伤修复中可能具有重要的作用. 第一个证据就是PML蛋白和BLM蛋白之间存 在功能上的对话，BLM蛋白作为REC-Q DNA解旋 酶，执行DNA的3'-5‘解链，通过直接参与DNA的同 源重组发挥维护基因组稳定性的作用.常染色体隐 性紊乱的Bloom综合征病人伴随 BLM蛋白的突变 或者缺失，表现为姐妹染色体交换和单体断裂 (SCE)等细胞水平的基因组不稳定性.BLM蛋白表 达和定位受到细胞周期的调控，S期进人细胞核，在 S/Gz后期达到峰值，并主要定位在PML-NBs.但在 APL或者 PML-'一细胞中BLM则不能在 PML-NBs定 位，同BLM突变的病人相似，这些细胞中SCE发生 的几率也大大增加，表明PML蛋白对于BLM蛋白正 常功能的行使具有重要的调控作用.除BLM蛋白在 S/GZ后期定位到PML-NBs中外，同源重组/修复蛋 白RAD51和复制因子 RP-A也定位在 PML-NBs，并 且当细胞受到Y射线照射诱发DNA损伤后 BLM, PML, RAD51和RP-A在PML-NBs中的共定位变得更 加明显，与此同时在DNA修复位点也检测到了PML 蛋白和BLM的复合体〔”〕.这些实验说明，BLM参与 了DNA损伤造成的G2阻滞后的DNA重组修复，而 PML蛋白可能在组织BLM蛋白和RAD51到修复位 点进行修复的过程中扮演了重要角色. 另一个同 DNA损伤修复密切相关的复合物 RAD50-Mrel l-NBS1的功能也与 PML蛋白及 PML- NBs密切相关.RAD50-Mrel 1-NBS1是DNA应激反应 后识别 DNA双链断裂损伤 (DNA double strand breaks, DSBs)的关键复合物，同源重组(HR)或非同 源末端连接(NHEJ),DNA损伤后细胞周期检查点的 激活以及端粒的维持都需要该复合物的参与.研究 显示在没有DNA损伤时，NBS1和Mrel l同PML蛋 白部分共定位，当由于Y射线造成DSB时，RAD50- Mrell-NBS1复合物能则即刻定位到DNA损伤的和 修复的位点(被称做IR-induced foci), NBS 1和Well 同PML蛋白的共定位也减少;但在DNA损伤后期， 即修复开始后Well又重新和PML蛋白共定位[181 在DNA损伤后这些分子在不同复合物之间定位动 力学变化对于他们正确的行使修复功能无疑是十分 重要的，但是对于PML蛋白在这些过程中的作用还 不是十分明确，因此需要更加精确的实验来确证 PML蛋白是否是这些分子依据不同时间和细胞周期 在不同复合物之间穿梭的载体，或者是仅仅为这些 分子提供一个特定的动态的修饰和装配平台，但可 以确定的是PML蛋白及PML-NBs在这些过程中显 然发挥了重要的作用. 4 PML蛋白参与细胞有丝分裂维护基因组 稳定性 生物体发育和成长要求细胞的繁衍，以保证基 因组被忠实复制并准确平均分配到两个子代细胞 中.基因组不稳定性经常表现为染色体的缺失，非整 倍体以及重排.在肿瘤细胞中非整倍体的产生往往 同中心体复制、扩增失控以及纺锤体的形成相关.中 心体在G:期开始复制到G末期结束，有丝分裂时 中心体分离并形成两极的纺锤体，以保证染色单体 被正确的分配到两个子代细胞中.因此，中心体复制 检查点和有丝分裂纺锤体组装检查点对维护基因组 稳定性具有特别重要的作用.中心体复制检查点保 证每个细胞具有正确的中心体数目，而纺锤体组装 检查点则保证所有的染色体都正确的与有丝分裂纺 锤体结合并具有正确的分离方向，因此这两个检查 点缺陷是造成基因组染色体数目不稳定性的主要原 因.最新的研究发现PML蛋白在这两个检查点机制 中可能都有重要的调控作用. 目前对于控制中心体复制的确切机制还不完全 清楚，但是已有的研究显示Cdk2/cyclinE和aurora A 2个激酶发挥了关键作用.Cdk2/cyclinE调控中心体 复制早期的诸多事件，它的底物nucleophosmin/B32, Mps-2和CP110等的磷酸化对于起始中心体复制至 关重要[”〕.最近的研究发现PML蛋白的一种剪切体 PML- HI同中心体共定位，并且PML缺失经常伴随中 心体扩增及非整倍体细胞的产生，重新表达PML-田 而非其它的剪切体后可以明显抑制中心体的复制及 非整倍体细胞的产生.进一步的研究揭示，在不同的 细胞周期中，PML蛋白同aurora A都可以共定位，并 且仅有PML- m可以和aurora A发生直接的相互作用 从而调节其活性.aurora A是一个丝/苏氨酸激酶，它 的酶活性需要Thr288的磷酸化，PML-m同它结合能 够抑制该位点的磷酸化，进而抑制其激酶活性 aurora A同中心体结合，是调控有丝分裂微管形成和 中心体成熟的关键分子.aurora A还是调控p53稳定 性的一个重要分子，激活后的aurora A可以磷酸化 p53的Ser315，促进了p53降解[201.众所周知，p53是 第5期 田宝磊等:PML与基因组稳定性 周期检查点负调控分子p21的上游分子，而p21是 Cdk2的抑制分子，Cdk2/cyclinE又是中心体复制的 关键分子.据此，对于PML蛋白参与的中心体复制 和基因组稳定性调控可以提出如下的通路:PML- m 同aurora A结合而抑制了其激酶活性，增加了p53 的稳定性，相应的周期负调控分子p21表达升高，抑 制 了 Cdk2/cyclinE 的 活 性，其 下 游 分 子 nucleophosmin/B32, Mps-2和CP110不能被磷酸化，中 心体便不能被复制，因此PML蛋白适宜的表达量对 于维护基因组稳定具有关键的作用，事实上也发现 在多种肿瘤细胞中存在PML蛋白表达不足或者缺 失，表明PML蛋白同肿瘤的生成可能存在密切的 关系. 动粒缺少微管结合或/和来自纺锤体的张力不 足都可以激活纺锤体组装检查点，纺锤体组装检查 点激活需要有丝分裂激酶Aurora-B和与其结合的染 色体搭乘蛋白INCENP以及survivin的参与[，，〕，采用 RNAi或药物抑制其中的一个蛋白都将导致染色体 分离和胞质分裂障碍，而且抑制survivin还导致中心 体缺陷;非正常的多极纺锤体及染色质分裂错误的 发生频率在p53-‘一细胞中增加[22,231，抑制，urvivin还 可以诱发细胞凋亡[24]，这表明survivin是细胞凋亡 和纺锤体组装检查点间的界面分子，因此维持合适 的survivin的表达水平对于细胞的生死及基因组稳 定是非常重要的.研究证明p53是调控survivin表达 的重要分子，而最近发现PML蛋白的剪切体PML-IV 能够调控survivin的表达，PML-IV能够通过p53依 赖或不依赖的方式抑制survivin表达，虽然精细的调 控机制还不清楚，也没有确切的实验表明PML-IV可 以通过。urvivin调控纺锤体组装检查点，但是人们有 理由相信PML蛋白极有可能通过调控survivin表达 和参与纺锤体组装检查点的调控来维护基因组稳 定性 . 5 PML蛋白和肿瘤 细胞的自稳平衡机制是维持细胞正常功能的基 础，自稳平衡受到破坏往往导致基因组不稳定性，如 果细胞不能及时的修复或者清除这些损害，最终将 导致肿瘤的产生，因此参与维护基因组稳定性的调 控基因往往同时也是重要的肿瘤抑制基因.p53在 超过50%的人类肿瘤细胞中显示突变和缺失，表明 基因组稳定性在肿瘤发生、发展中的重要性.前面的 叙述已表明PML蛋白同样是一个重要的肿瘤抑制 分子，它不但可以在DNA损伤应激反应中协同p53 诱导细胞凋亡，参与DNA损伤的修复，还可以通过 调控aurora A的活性参与中心体复制检查点、通过 调控survivin的表达参与有丝分裂纺锤体组装检查 点的调控，对于维护基因组稳定性发挥着重要的作 用.PML分子的肿瘤抑制功能已在动物和细胞模型 中获得验证.Gurrieri等〔251研究发现，PML在淋巴、前 列腺、乳腺、直肠、中枢神经系统和生殖细胞等肿瘤 组织中表达缺失或不足，这进一步说明PML蛋白在 肿瘤发生、发展中的重要作用.然而，应该注意到对 于PML蛋白在基因组稳定性调控中的精确机制仍 然存在很多不清楚的地方:首先，PML蛋白具有多种 剪接形式.有研究发现，这些剪接体在细胞中的表达 是均衡的，但它们之间的功能存在很大差别.例如 PML- N参与DNA损伤诱发的p53凋亡通路，PML- IU 参与中心体复制，PML- II B参与TGF-p诱导的细胞 凋亡，但对于其他剪接体功能尚不清楚.因此，进一 步研究各个剪接体的不同功能是重要的.其二，虽然 对于PML蛋白在p53凋亡通路中的作用比较清楚， 但目前的研究表明，PML蛋白对p53的调控极为复 杂，无论是p53稳定性、DNA结合能力还是转录激活 或转录抑制能力都受到 PML蛋白的调控，因此对 PML蛋白及PML-NBs在这些调控中的地位和机制 仍需要更多的研究证明.其三，迄今，对于PML蛋白 参与的p53非依赖的凋亡调控机制所知甚少，而它 所调控的凋亡相关的转录事件相当复杂，许多转录 因子或转录共激活(抑制)因子也受到PML蛋白的 调控，比如Daxx (death associated protein)、 NF-icB, Sp-1 等，对此还需进一步研究.最后，虽然有实验发现在 某些肿瘤细胞中存在PML蛋白的表达缺失或不足， 但仍需检测更多的肿瘤细胞系和肿瘤组织，以便确 定这些样本中PML蛋白表达的状况，尤其是PML蛋 白总量表达正常的肿瘤中不同剪接体的表达水平， 以确定PML蛋白与肿瘤发生、发展的关系.相信随 着研究的深人，对PML蛋白参与的基因组稳定性调 控的机制会愈加清晰，也必将为肿瘤防治提供新的 指导。 参考文献(References) Zhivotovsky B, Kroemer G. 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