精制甲型肝炎灭活疫苗Vero细胞维罗信TM的安全性和免疫原性随机对照研究

精制甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)维罗信Ⅷ的 安全性和免疫原性随机对照研究 李艳萍1 农艺1 单继宽2马波3欧远荣4万宗举5李荣成1 杨进业1 (1．广西壮族自治区疾病预防控制中心，南宁530021；2．上海惠生生物 工程 路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理 有限公司， 上海201203；3．云南沃森生物技术有限公司，昆明650106；4．恭城-R-Y-生防疫站， 广西壮族自治区恭城 545200；5冲国药品生物制品检定所，北京100050) 【摘要】目的评价精制甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)的安全性和免疫原性 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 于2005年1—8 月在广西恭城县选择1507名健康人群，以随机、双盲、平行对照方法，观察该疫苗的不良反应，抗体阳 转率和抗体水平，应用EIA竞争抑制法检测血清抗甲型肝炎抗体(抗一HAVIgGo结果成人组试验疫 苗全身、局部反应发生率(分别为8．80％、2．67％)，与对照疫苗(分别为12．41％、4．41％)相比，差异 无显著的统计学意义；儿童组试验疫苗全身、局部反应发生率(分别为10．60％、2．28％)与对照疫苗 (分别为10．71％、2．86％)相比，亦无显著的统计学意义。维罗信首针免疫后一个月，儿童组和成人组 的阳转率分别为88．2％、93．8％，全程免疫一个月后两组抗体阳转率均达到100％，抗体滴度分别为 16447mIU、8555mlU，对照疫苗分别为1946mlU、5881mlU，儿童组抗体滴度与对照组相比差异有显著 的统计学意义。 结论精制甲型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)在儿童和成人中应用具有良好的安全性，采 用0，6个月免疫程序免疫后抗体阳转率达100％，并有高的抗体滴度。 我国系甲型肝炎高流行区，人群中有广泛的甲肝病毒(HAV)感染”1。甲型病毒性肝炎(甲肝)已经成为 严重危害人民身体健康的重要传染病之一。接种甲型肝炎疫苗是当前预防甲型肝炎的主要措施口1。目前 已上市的甲肝灭活疫苗主要采用人二倍体细胞培养生产，甲肝灭活疫苗(Vero细胞)维罗信删是采用 Vero细胞为培养体系生产的新型甲肝灭活疫苗，为评价其在不同人群中的安全性和免疫原性，于2005 年1．8月在广西恭城县应用该疫苗对儿童和成人进行了观察，现将结果报告如下。 1材料与方法 1．1研究疫苗上海惠生生物工程有限公司和云南沃森生物技术有限公司联合研制、生产的精制甲 型肝炎灭活疫苗(Vero细胞)，商品名为维罗信1”，(下称研究疫苗)。该疫苗为水针剂型，成人剂量为 1600EU／1ml／支，批号：20030701—1，有效期至2005年7月；儿童剂量为800EU／O．5roll支，批号：20030701—2， 有效期至2005年7月。 1．2对照疫苗葛兰素史克生物制品公司生产的甲型肝炎灭活疫苗，商品名为贺福立适@(下称对照 疫苗)。该疫苗为水针剂型，成人剂量为1440EL．U．／ml／支，批号：XHAV028BB，有效期至：2006年9月； 儿童剂量为720EL．U．10．5ml／支，批号：XHAVA002A1，有效期至2006年2月。 1．3研究对象本次研究 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 经伦理委员会审核批准，研究对象以自愿参加为原则，试验前由本人 或监护人签署知情同意书。 儿童剂量疫苗观察对象为年龄5—15岁健康人群，成人剂量疫苗的观察对象为16岁以上成年人。所 有观察对象均无甲型肝炎感染史、无甲型肝炎疫苗接种史及近期无其他疫苗接种史，近2周内未接受过 免疫球蛋白制剂，元疫苗接种禁忌症。经酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查血清抗甲肝病毒抗体(抗 一HAV—IgG)阴性，肝功能正常。 共人选符合试验方案人选 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 的1507名志愿者。其中5一15岁儿童组732人，16岁及以上的成人 组775人。成人组和儿童组每组各设1个对照组，接种对照疫苗。各组年龄、性别分布情况见表1 表1 各组接种对象基本情况 1．4接种方法采用随机、双盲、已上市同类疫苗平行对照的设计。委托非临床研究参加单位组织 编盲，应用SAS统计软件在计算机上随机化方法产生随机编码，按照不同年龄组将试验疫苗和对照疫 苗随机编成序列号(每人份疫苗有唯一的标识号)。将编码的疫苗统一使用锡珀外包装，在外包装上粘 贴相应编码。研究对象按照到达接种现场的顺序先给予序列号，再从相应年龄组获得随机号码，根据号 码接种研究疫苗或对照疫苗免疫前后标本编号均标记序列号以保证在盲态下检测。研究组与对照组均采 用0，6月免疫程序，接种疫苗部位为上臂三角肌肌内注射。 1．5观察方法 安全|生观察：所有观察对象均于每次接种后30分钟内观察即时反应，并于接种后6、24、48、72 小时进行局部反应(红肿、硬结、瘙痒、疼痛、化脓)及全身副反应(发热、乏力、头痛、恶心、皮疹 等)的观察和记录，采用自动报告方式收集每针次接种后30天内任何有意义的疾病／事件，其判定标准 按卫生部《生物制品接种手册》和《预防接种的反应和处理》要求进行，按中、强、弱反应进行判定。 免疫原性观察：于接种前、首免后一个月及全程免疫后一个月采集静脉血检测抗HAV—IgG。采集 的血清标本现场进行无菌分离后冻存于一20℃，全部随访采血完成后统一送中国药品生物制品检定所统 一检测。 1．6实验室检测抗体检测采用EIA竞争抑制法，检测试剂为北京万泰制药公司生产，按照试剂说 明书操作和判断结果。抗体滴度检测采用WHO提供的甲肝免疫球蛋白标准品(含100IU／m1)作为参比。 将WHO提供的甲肝免疫球蛋白标准品和待测样品进行系列稀释，标准品各稀释孔OD值用SASSystem 程序处理计算回归方程，根据标本测量的OD值计算抗体浓度。， 1．7统计 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 副反应和抗体阳转率比较采用x2检验，抗体几何平均滴度(GMT)，比较采用t检 验。 一577— 2结果 2．1安全性对初免和加强免疫受试者于6、24、48、72小时进行局部和全身不良反应观察。局部总 反应率研究疫苗儿童组为2．28％，成人组为2．67％，对照疫苗儿童组为2．86％，成人组为4．14％，试验 疫苗组与对照疫苗组比较差异无明显统计学意义(表2)。局部不良反应主要表现为接种部位一过性疼 痛和瘙痒反应，未见局部严重红肿、硬结和化脓等严重反应。 全身不良反应发生率儿童组、成人组分别为10．60％和8．80％；对照疫苗为1o．71％和12．41％。经统 计学处理，无显著性差异(x2成人组=3．2790，P=0．0702；x2儿童组=o．0028，P=0．9575)，结果见表3。 表3 试验各组受试者接种后全身不良反应发生率的比较 全身反应以轻度体温升高为主，发热的中强反应率成人组为0．52％，儿童组为0．97％，对照疫苗的 成人和儿童组分别为1．13％、1．78％。体温异常反应大多为一过性，无需住院或门诊治疗者，反应均在 24—48小时内恢复正常。其他全身反应主要有腹痛、腹泻伴随食欲不振、呕吐等消化道症状，均为轻度 不良反应，未发现ALT异常、皮疹等全身严重不良反应。 2．2抗体阳转率分别于初免后1个月、全程免疫后1个月采集受试者血清，用EIA竞争抑制法检 测抗HAV—IgG。研究疫苗组首针后一个月受试者血清阳转率儿童为88．2％，成人为93．8％、对照疫苗组 儿童为82．6，成人为91．3％，相同年龄研究疫苗组与对照疫苗组比较差异无明显统计学意义(x2儿童初免 =3．1048，P=0．0781；x2成人初免=o．2660，P=I．2371)，全程免疫后，儿童、成人研究疫苗组和对照疫苗组 抗体阳转率均达100％，结果见表4。 表4 试验各组受试者免后血清抗-HAV抗体阳转率的比较 X2儿童初免=3．1048，P=0．0781；X!成人韧免=0．2660，P=I．2371。 2．2抗体水平各组按照顺序各取56份抗体阳性标本进行定量测定，结果儿童研究疫苗组初免一个 月后抗一HAV抗体几何平均滴度(GMT)为333llU／ml，全程免疫后为16447IU／ml，对照疫苗组为700IU／ml 和1964IU／ml，差异有显著的统计学意义(tJL童初免=5．02，P<0．01；tJL童全程=5．65，P<0．01)；成人研究疫苗 组初免一个月后抗一HAVGMT为7209IU／ml，全程免疫后为8555IU／ml，对照疫苗组为3723IU／ml和 5881IU／ml，两组比较抗体水平差异元显著的统计学意义(t成人韧免=1．66，P>0．05；t成人全程=1．39，P>0．05)。 各组检测结果见表5。 表5 试验各组受试者免后血清抗一HAV抗体水平的比较 3讨论 国际上甲型肝炎灭活疫苗自90年代被批准使用，国内许多研究也已经证明甲型肝炎灭活疫苗具有 良好安全}生和免疫原性(3-7)，一般人群接种后可在短期内产生抗体并获得持久保护。 本次研究采用随机、盲法并以进口(史克)甲肝灭活疫苗对照的方法对国产新型精制甲型肝炎灭活 疫苗(Vero细胞)儿童剂量(800EU／0．5m1)和成人剂量(1600EU／m1)进行安全性和免疫原性研究，两 种剂量均观察到良好安全性和免疫原性。成人组全身、局部反应发生率分别为8．80％、2．67％，低于对 照组的12．41％、4．41％，但差异无显著的统计学意义；儿童组全身、局部反应发生率分别为10．60％、 2．28％，也与对照疫苗的10．71％、2．86％相近，差异亦无显著的统计学意义。局部不良反应主要表现为接 种部位一过性疼痛和瘙痒，未见红肿、硬结和化脓等严重反应。最常见的全身反应为发热，多为37．1～37．5 cC的轻度一过性体温升高，无需住院或门诊治疗，反应均在24—48小时内恢复正常。其他全身反应主要 有腹痛、腹泻伴随食欲不振、呕吐等消化道症状，均为轻度不良反应，未发现ALT异常、皮疹等严重 不良反应。结果表明，新型甲肝疫苗与进15I同类疫苗具有一致的良好安全性。对照组不良反应发生率与 国内外大规模临床研究文献报道一致14。1，但与有些文献报道不一致拂j，可能与研究实施过程中标本量 和内控标准有关。 一579— 成人和儿童采用0，6个月免疫程序接种新型精致甲型肝炎灭活疫苗首免一个月后试验疫苗的阳转 率分别为88．2％和93．8％，全程免疫一个月后抗体阳转率均达到100％，成人和儿童采用对照疫苗首免 后一个月阳转率为82．6％和91．1％，全程免疫后一个月阳转率为100％，与文献报道结果一致19一引。全程 免疫后儿童组和成人组的抗体滴度分别为16447mIU、8555mlU，均高于其他研究中的报告㈠¨，且研究 疫苗组抗体滴度高于对照疫苗组。首针免疫后一个月儿童抗体水平低于成人，其原因可能与成人存在回 忆反应有关，还有待进一步观察，但不会影响预防HAV感染的效果。新型甲肝灭活疫苗接种1针后抗 一HAVGMT远高于预防感染的有效水平，并且接种国产甲肝灭活疫苗的儿童和成人全程免疫后1个月 抗体滴度显著高于对照组。新型精制甲型肝炎灭活疫苗Vero细胞)采用0,6月免疫程序具有良好免疫应 答效果，x,IJL童和成人均有良好免疫原性。 【参考文献】 1．胡善联，庄辉，甲型肝炎见耿贯一主编流行病学[M]第2卷，第2版，人民卫生出版社，1998：21—36 2．戴志澄，祁国明 中国病毒性肝炎血清流行病学调查(上卷)【M]北京：科学技术文献出版社，1997：25 3．徐志一，汪萱怡，李荣成，等甲型肝炎减毒活疫苗免疫原性与保护效果的研究fJl中华医学杂志，2002，82(10)： 678—681 4．刘崇柏，任银海，张玉成。国产甲型肝炎灭活疫苗在儿童中应用的安全性免疫原性和免疫程序研究[J】中国计划免 疫，2002，8(1)：1-3 5．JonathanLTemte．ShouldallchildrenbeimmunisedagainsthepatitisA【J】．BMJ2006，332：715—718． 6．HBriem，ASafary．ImmunogenicityandSafetyinAdultsofHepatitisAVirusVaccineAdministeredasaSingleDoseWith aBooster6MonthsLater．JournalofMedicalVirology[J]．1994，44：443—445． 7．RENAiguo，FENGFumin，MAJunrong，eta1．ImmunogenicityandsafetyofanewinactivatedhepatitisAvaccineinyoung adults：acomparativestudy[J]．ChineseMedicalJournal，2002，115(10)：1483—1485． 8．徐鞍强．“贺福立适”甲型肝炎灭活疫苗在儿童中应用的免疫效果【J]．实用预防医学．2004，11(2)：288． 9．任爱国，马俊荣，冯福民。国产甲型肝炎灭活疫苗的安全性和免疫原性研究[J】中华实验和临床病毒学杂志，2001， 15(4)：357—359 10．黄贵彪，万宗举，李荣成。巴维信甲型肝炎灭活疫苗在儿童与成人中应用的安全性和免疫原性研究[J】中华流行病学 杂志，2004，04 11．李艳萍，李荣成，杨进业，等．成人和儿童接种国产甲型肝炎灭活疫苗的安全性与免疫原性的初步观察[J]．中国计划免 疫，2003，9(4)：224—226． 12．张秀春，韩莉莉，邢玉兰。甲型肝炎灭活疫苗及减毒活疫苗对不同人群免疫效果的研究。中国计划免疫，2002，05 13．夏国良，丛郁，王晓黎。贺福立适甲型肝炎灭活疫苗的使用情况和保护效果【J]中国计划免疫，2002，06【J]2002，05 —580_～