基因工程名词解释-[资料整理](SCUT_JASON整理,根据杨汝德主编的03年版《基因工程》) 基因工程：是指将目的基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的技术。 限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。 DNA连接酶：是一种能在ATP或NAD+存在下催化双链DNA片段紧靠在一起的3’羟基末端与5’磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶。 DNA聚合酶：能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，可在其催化下进行DNA体外合成反应 DNA修饰酶：这类酶能对DNA分子进行一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰 T4噬菌体多核苷酸激酶：是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶，它对底物分子长度没有限制。 碱性磷酸酶：这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。 复制子：细胞内独立的能够自我增殖的结构单位。 启动子：是指一段能被宿主RNA聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的DNA序列，是基因表达调控的重要元件。 终止子：是指一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列，分为本征终止子和依赖终止信号的终止子。 密码偏好性：不同基因组甚至不同基因中编码同一种氨基酸的密码子的使用频率不尽相同，具有一定的选择性。 克隆载体：是指能在细胞内进行自我复制的外源基因运载体，如细菌质粒、λ噬菌体、M13噬菌体及粘粒等。 质粒：是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。 穿梭质粒：是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带外源DNA在不同物种的细胞间往返穿梭的质粒载体。 M13噬菌体载体：环状单链DNA分子，其中M13mp系列对野生型M13加以改造，插入了多克隆位点和LacZ基因，可容纳外源DNA300-400bp，可用于制备DNA测序时用的单链模板和核酸探针。 粘粒载体：是一类人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。 噬菌粒：是指质粒载体与M13噬菌体的基因间隔区重组而成的噬菌体载体，同时具有二者的复制起点。 感受态细胞：是指具有能够接受外源DNA的生理状态的受体细胞，一般处于对数生长期后期，时间短暂，但经氯化钙等处理可使细胞进入这一状态。 转化：是指把带有目的基因的重组质粒DNA引入受体细胞的过程。 转染：是指将重组噬菌体DNA直接引入受体细胞的过程。 转导：是指将重组噬菌体DNA包装到噬菌体头部成为有感染力的噬菌体颗粒，再以此噬菌体为载体，将头部重组DNA导入受体细胞中。 化学转化法：对受体细胞经过氯化钙、氯化铷等化学试剂的处理，使细胞膜的通透性发生暂时性的改变从而使受体细胞进入感受态，再经过热击、冷冻等处理即可将外源DNA摄入。 电穿孔转化法：是指利用脉冲电场将DNA导入受体细胞的方法。 基因定点诱变：是在体外特异性地取代、插入或缺失DNA序列中任何一个特定碱基的技术,包括盒式取代诱变、寡核苷酸引物诱变及PCR定点诱变等 SD序列：Shine-Dalgarno序列，即核糖体结合位点，是指原核基因转录起始位点下游的一段DNA序列，它与核糖体16SrRNA特异配对而与宿主核糖体结合，对mRNA的翻译起决定性作用。 Southern印迹法的原理：将经限制酶酶切及琼脂糖凝胶电泳分离的DNA片段用碱变性处理后，转移到固相杂交膜上，再用同位素标记探针溶液与膜充分混合接触进行分子杂交。把未杂交的探针洗脱后经过放射自显影，根据乳胶片上有无黑色区带可判断DNA中是否含有目的片段。 放射性探针：是指一段带有放射性同位素标记的、与目的DNA或RNA片段的序列互补的单链核苷酸，将它与一个DNA片段进行杂交可
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该片段中是否含有目的序列。 定向克隆：是指对外源DNA及载体均用两种不同的限制酶消化，再将二者用DNA连接酶连接起来的方法，该法可以避免载体的自身环化。 DNA体外重组：是指将目的基因（外源DNA片段）用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA上形成重组DNA。 抗生素抗性基因插入失活法：载体的抗药性基因内具有限制酶的识别位点，用某种限制酶消化并再此位点插入外源DNA时，抗药性基因不再被表达，当这个重组载体转化宿主菌并在药物选择平板上培养时，根据对该药物由抗性转为敏感，便可筛选出重组转化子。 β-半乳糖苷酶基因插入失活法：质粒载体上LacZ基因编码的β-半乳糖苷酶N端与受体细菌编码的C端片段实现а互补而具有酶活性，可在IPTG诱导下分解生色底物X-gal并形成蓝色菌落，但当外源片段插入质粒的多克隆位点后，使β-半乳糖苷酶的N端失活从而破坏а互补，因此带有重组质粒的细菌将产生白色菌落，从而可依据菌落的颜色筛选出可能带有重组质粒的转化子菌落。 基因产物鉴定法：是指制备针对该基因的产物的抗血清或单克隆抗体，采用免疫化学的方法来筛选目的基因重组体，包括放射性抗体检测法和免疫沉淀检测法等。 电镜R-环检测法：在分子杂交中，核酸探针与部分变性的双链DNA分子中的互补单链形成杂合双链，同时另一条单链向外突出，二者形成泡状体，即R环结构，可用电镜直接观察，从而可以检测双链DNA中是否含有目的序列。http://fluorin.blogbus.com/logs/8348455.html
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