第 1 7卷第 3期 /
1999年 5月
Vo1.17 No.3
M ay 1999
气相色谱法测定口服液中神经酸的含量
周立勇 候镜德~ 樊 华
(浙江大学分析测试中心 杭州 31002 7) (中美华东制药有限公司研究所 杭州 310011)
1]、 . 、0
提 要 提供了一种准确测定 日服液中神经酸古量的方法。样品经新处理后.用 BFj-CH OH酯化, 邻苯二甲
酸二壬酯为内标测定 口服液中神经酸古量 所提供的方法线性范围为 0.3~3 R/L,平均回收率为 97.04 .
RSD为 0 90%,置空白试验,对神经酸古量测定无干扰。
O953 :竺 c 廿娄号 一 ”j
~
I 韵言 、、
神经酸(nervonie acid),又名鲨鱼酸 (selacholeic
acid),化学名为顺一15一二十四碳烯酸 。是 一种长链单
不饱和脂肪酸.围其最早从鲨鱼脑、牛脑中分离出来
而得名[1]。国外文献报 道神 经酸是 髓鞘成熟 的标
志Ⅲ,对活跃脑细胞有一定作用 。此外 ,神经酸对
治疗 自体免疫缺乏性疾病有一定疗教0]。对其12I服
谖 中神经酸含量的测定 ,作者未 见报道 。本文采用
BFrCH OH酯化衍生的方法,分离测定丁口服液中
神经酸的含量 ,方法准确 ,可霏 、重现性好 ,为产品的
质量控制和稳定性试验提供了依据。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
日本岛津 GC 9A气相色谱仪。C—R2A数据处
理机 。
对照品 :神经酸 ,由浙江大学应用化学研究所提
供,纯度为 96.3 (气相色谱峰面积归一化计算)。
内标物 :邻苯二 甲酸二壬酯,色谱纯 ,上海试剂 一厂
出品。甲醇、正己烷 、体积分数为 47 的三氟化硼乙
醚溶液、氯化蚋均为分析纯。水为去离子水 内标溶
液 的配制 :精确称取邻苯二甲酸二壬酯 0.6 g,用正
己烷溶解 ,配成 6 g/L的内标溶液
2.2 色谱条件
OV-101熔融石英 毛细管柱(0.2 mm i.d.×30
m)。氢火焰离子化检测器。流速:氮气(载气)60
mL/min,氢气 40mL/min.空气 400mL/min 柱温 :
以 6.c!rain从 190.c升至 250.c,保持 20m|n。汽
化室及检测器温度 }260.c,进样量:0.4 L。
2.3 衍生化反应
精确称取适量神经酸对照品于反应瓶 中,加 15
mL甲醇 、6 mL体积分数为 47 的 BF。乙醚溶液在
:誊 嚷 赞科学基金舶 01 号资助项目
本文收稿 日期:1997-ll-09,修回 日期 :1998-01-20
70~80.c水浴 中加热 回流 10 min。拎却后 ,倒入分
液漏斗 。加 10 mL饱和食盐水 ,用 l5 mL正 己烷 萃
取 3次 ,台并上清液用于分析 。若是 口服液样品 ,则
须先在 120.c油浴下蒸发水分至于 ,冷却后接上述
步骤加 CHaOH和 BFa乙醚溶液 ,进行甲酯化衍生。
3 结果和讨论
3.1 色谱分离情况
神经酸口服液的典型色谱图见图 l。由图 l可
见,神经酸和二十四碳烷酸这一对难分离物质能较
好分离,杂质对内标无干扰。神经酸和内标在上述条
件下的保留时间分别为 l7.98 min和 25.52 min。
/rain
围 1 神经酸口服液样品的典型色谐围
FiB一1 Typical chrom rⅢ of 0r tonic sampl~
1.神经酸 (ne~onie aeld).2.=十四碳烷酸 (tetracosan~c
acid).3邻苯二 甲酸 =壬 酯(di~ony[phtha]ate internⅡt
standard)。
3.2 线性范围和工作曲线的测定
(1)精确称取神经酸 0.6 g,按 2.3项的步骤进
行酯化,然后把正 己烷 萃取液移入 i00 mL容量瓶
中,用正 己烷定容,配成神经酸甲酯的标准溶液。
Y
附 从
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谱
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札
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u l;j 、I、 № ㈣
,
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3期 周立勇等:气相色谱法测定口服{霞中神经酸的含量 ·307·
(2)精确吸取上述标准溶液 0.5,1,2,3,4,5
mL分别置于 10 mL容量瓶中,各精确加入 邻苯二
甲酸二壬酯内标诫 2 mL,用正 己烷 稀释 至刻度,摇
匀,进样0.4皿 进行分析。
(3)以神经酸和邡苯二 甲酸二 壬酯 的峰面积比
为横坐标(x),质量 比为纵坐标(y)进行线性 回归 ,
回归方程为 Y一 0.774 6X+ 4.028× 10 相关系
数 0 999 4 o结果表 明在 0.3~3 g./L质量浓度范
围内有良好的线性关系 。
3.3 回收牢和精密度试驻
一 定量神经酸加入反应瓶中,在 120℃下把反应瓶
中的水分蒸干。冷却后按 2.3项步骤进行 ,把正 己烷
萃取涟移入 5O mL容量瓶中,加正己烷定窖 精确
移取上述溶液 5mL、内标液 2mL于 lomL容量瓶
中,加正己烷稀释至刻度。进拌 0.4 uL进行分折。
本实验共进行了 3个添加水平的试验,每一水
平 测 定 5次 ,平 均 回 收 率 为 97 O4 , 印 为
0.90 。精密度以在样品中添加同一水平对照品的
回收率结果的重现性表示,测定结果的标准偏差和
变异系数在允许范围之内(表 1)
移取 lo mL口服涟空白于反应瓶中,精确称取
裹 】 方法的晷收率和精密度
TaMe 1 Recovery and precA~lon 0f the nlet~od
3.4 样品测定
测试两个不同批次的样品,结果见表 2。
裹 2 样品测试结果
Table 2 ^H| Ij∞-results m mpl8
3.5.2 l群品预处理
口服掖样品中含有大量水,对神经酸的酯化不
利 为此,我们曾采用了溶剂萃取法分离水分,所用
溶剂有正己烷、氯仿、石油醚t但均存在分层田难和
两相界面乳化现象等问
题
快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题
。实验结果表明,采用以上
3种溶剂后 ,回收率依次为 94.5 ,94 8 ,92 3 。
为此 ,我们选用 了蒸干法去除水分 ,结果较为满意 。
参 考 文 献
3·5 讨论 1 K1enk z
. Phys】。l cIlem .1925,145:244
3·5·1 匈标 的选择 2 B且 n F,Sarda P,Lim删 t B et a1.Li口id日,1993.28
神经酸来源于天然生杨 ,且 口服液基底复杂 ,固 (7):627
而内标的选择非常重要。为此,我们做了空白试验, 3 SiDe]air A J,Crawford M A J N rochⅢ,1972,19
并先后选用 了硬脂酸 (c )、山嵛酸 (c 。)为 内 《7):】753
标,发现杂质峰对它们均有不同程度的干扰。本方法 4 Martinez Mt Ballabrlga A,Gil-Gibernau J J·J Ncu一
中内标物邻苯二甲酸二壬醋的出峰时间在神经酸之 ㈣ Re ,1988t20(4) 484
后,且无杂质峰的干扰,证明该内标是可行的。
Determination of Nervonic Acid in Oral Tonic by GC
Zhou Liyong,Hou Jingde and Fan Hua
(The Center Ariabsis and asⅡ 删 ,Zhefiang University,Hangzhou,3100Z7)
(Zhong M ei日 Dong Pharmaceutical C .Ltd.,Hangzhou,310011)
Abstract A method for determination of nervor~c acid in 0taI tonic has been developed by gas chromatogra—
phy.The samples were derivatized by BF3一CHIOH.Dinony1 phthalate was used as the internal standard.The
calibration curvi~was linear over a range from 0.3 g/L to 3 g./L with a correlation coefficient ot 0.999 4 The
average recovery 0f the method was 97.04 and the RSD was 0.90 .The method has been success|ully ap—
plied to quahty coatrol of nervonie acid in oral tonic.
Key words gas chromatography,nervonie acid,oral tonic
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