毒理学杂志2008年6月第22卷第3期J7r缸icolJune2008v01．22No．3
中图分类号：R994．3文献标识码：A 文章编号：1002—3127(2008)03一0216一03
三聚氰胺的毒性研究
·实验研究·
林祥梅1，王建峰1”，贾广乐1，梅林1，王众1
(1．中国检验检疫科学院动植物检疫研究所，北京100029；2．南京农业大学动物医学院)
关键词：三聚氰胺；细胞毒性实验；急性毒性；亚急性毒性实验；肾衰竭
2007年3月中旬以来，美国发生4000多起猫、狗
等宠物中毒死亡事件¨。21。美国食品药品管理局从进
口的部分小麦蛋白粉和大米蛋白粉中检出三聚氰胺等
成分。三聚氰胺多用于生产塑料和肥料，还可制造药
物胶囊13。51。在动物饲料中添加三聚氰胺，可提高饲料
的氮含量，让人误以为该饲料的蛋白质比较丰富，但目
前还没有被认定有害人体健康，有关它和其他物质混
合后对动物产生何种影响的资料报道甚少。本试验通
过对三聚氰胺的细胞毒性、急性毒性和亚慢性毒性研
究，客观评价动物长时间接触该化合物的危害性，以及
为中毒动物的治疗提供理论基础。
1材料与方法
1．1材料 BHK细胞(由中国人民解放军事医学科
学院提供)；昆明小鼠，清洁级，体重18g一22g，雌雄各
半，(购自中国人民解放军军事医学科学院实验动物中
心)；成年健康猫(购自北京大学医学部实验动物中
心)。
1．2主要仪器与试剂 三聚氰胺(北京化学试剂公
司)，DMEM培养液，胎牛血清(美国GIBCO公司)，
MrI’I’溶液(美国Sig眦公司)，倒置相差显微镜(Dmil
型，美国leica公司)，酶标仪(Accent型，美国r11Iler啪
公司)，cO，培养箱(31ll型，美国nenno公司)，生化
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
仪(sabal8意大利)，石蜡切片机(kica美国)。
1．3 方法
1．3．1三聚氰胺对BHK细胞的毒性试验：将三聚氰
胺用培养液加热搅拌溶解，甘油助溶，配成5m∥IIll的
溶液然后在无菌条件下进行3倍稀释备用。将对数生
长期的BHK细胞消化、计数，用含体积分数为10％的
胎牛血清的DMEM培养液配成浓度为5×104个／IIll的
细胞悬液，按200“l／孔的密度接种于96孔培养板，37
℃、5％CO：温箱培养使细胞贴壁。24h后弃去旧培养
液，加入不同浓度的样品200出，每个稀释度作5个平
作者简介：林祥梅，副研究员，研究方向：动物检疫。
行孔，继续培养20h后加入M1Tr，每孔20“l，再培养4
h，弃去液体后加入100“lDMSO震荡10min，立即在酶
标仪570nm波长处测各孔A值。同时设对照组。重
复上述实验三次。
细胞活力存活率％=((样品A值一空白组A
值)，(阴性对照A值一空白组A值)×100％。
1．3．2三聚氰胺的急性毒性试验：称取需要的三聚氰
胺量，用研钵研磨后加蒸馏水到所要求的浓度。选择
健康小鼠，采用灌胃方式从低剂量给药，每组6只小鼠
(雌雄各半)，观察48h。小鼠死亡后剖解观察。
1．3．3三聚氰胺的亚慢性毒性试验：将试验猫随机分
为2组，每组3只，按照美方提供的饲料中三聚氰胺含
量为2．4g进行添加，采用30d连续喂养试验，并于饲
喂后第6、9、15、23、30d采血做生化指标检查。实验结
束后将实验猫处死，取肾脏固定于体积分数为5％的
甲醛中l。3h，常规石蜡制片。
1．4统计学方法IC∞是将细胞存活率对浓度对数作
图，按作图法用ED50andIC50FORGmdedResponse(Ver
1．2，日本H．0no开发)程序计算出IC∞。
2 结果
2．1 M1Tr法测定结果不同浓度的样品对BHK细胞
作用24h后，MTT法测定A，∞，计算细胞的存活率，结
果见表l。统计分析结果表明，三聚氰胺在高浓度时
(≥1．667m∥IIll)与细胞存活率显著相关(P<0．05)，
计算IC∞为lO．1lmg／rrIl。
2．2三聚氰胺急性毒性实验结果最高剂量组给药
后9h，小鼠开始出现不安，呼吸急促，随后在几十min
内死亡。其他剂量组小鼠仅见精神不振，反应迟钝，闭
眼伏卧，不食等症状，随后在24—48h出现个别死亡。
灌胃死亡的小鼠输尿管中均有大量晶体蓄积，部分小
鼠肾脏被膜有一层晶体。其他脏器未见有明显的变
化。三聚氰胺急性毒性实验小鼠死亡情况见表2，三
聚氰胺的全部不致死的最大剂量大于5000nlg／kg。
万方数据
毒理学杂志2008年6月第22卷第3期JToxicolJu№2008v01．22Ho．3
表l三聚氰胺细胞毒性测定结果(M啊法)
表2三聚氰胺急性毒性实验小鼠死亡情况
2．3生化指标的变化添加三聚氰胺后猫血清尿素
氮(BUN)和肌酐(cRE)的变化见图1—2。当饲料中添
加三聚氰胺后，血清BuN和cRE逐渐升高，到23d这
两项指标超过正常范围(正常范围：BuN：5．4—13．6
mnlol／L，CRE：62一190弘mol／L)。
2．4组织病理学变化猫在饲喂三聚氰胺30d后，
肾脏中可见淋巴细胞浸润，肾小管管腔中出现晶体(图
3)。
6 9 15 23
时间(dJ
与相同时间段对照组相比。’P<0．05。
图l猫血清BUN的变化
300
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§200
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星100
U
50
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9 15 23
时间【d)
与相I司时I可段对照组相比，’P
标准
excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载
，LD卯>5000m∥kg，
可以初步认定为微毒或基本无毒。三聚氰胺的亚慢性
毒性试验结果显示，实验组和对照组血常规检测正常，
实验组的血清BuN和CRE升高，且在第23天，这两项
指标超过正常范围，而BUN和cRE两项指标的升高在
临床上提示实验动物存在肾衰竭的可能。并且动物饲
喂三聚氰胺后。肾脏肾小管中出现了晶体。由此推断三
聚氰胺长期饲喂可能引起肾衰竭，其损伤机制还需要
进一步研究。
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中图分类号：R99 文献标识码：A 文章编号：1002—3127(2008)03—02墙一03
。
(收稿日期：2007—09—28)
-次性纸品在不同pH环境中对敏感性皮肤的影响
刘娜1，王学民1。卢宝荣2，陈曦2，MauricioOdi03，万向红4，陈聪4
(1．上海市皮肤病性病医院，上海200050；2．中国制浆造纸研究院；
3．美国宝洁公司婴儿护理产品研究开发中心；4．宝洁中国有限公司)
关键词：pH；经表皮失水率；皮肤；敏感性；一次性纸品
尿液有者很宽的pH范围，这是因为为了维持血
液的pH在正常7．3—7．4范围内，肾能产生pH低至
4．5的尿液和pH高达8．5以上的尿液。而皮肤的潮
湿，粪酶和脂酶对皮肤的损伤，以及尿液和粪便混合导
致的皮肤表面pHSspH值的增加成为尿布皮炎的发病
原因¨。2】。为了调查不同pH的一次性吸收纸品对敏感
性皮肤的影响，本实验选用pH2．0，6．5和lO．0的人工
合成尿液(SuSs)，在敏感性皮肤的健康受试者前臂屈
侧用纸尿裤和卫生巾进行4，20，24h三个阶段封闭型
皮肤斑贴，模拟一次性纸品的作用环境，评估pH2．0～
10．0的pH范围对敏感性人体皮肤的作用。
作者简介：刘娜，医学硕士，研究方向：环境皮肤病学及皮肤毒理学。
通讯作者：王学民，教授，研究方向：皮肤毒理学及环境皮肤病变。
·实验研究·
1对象与方法
1．1 受试对象 16名健康受试者，年龄24—50岁，平
均(40．00±7．84)岁。所有受试者均符合入选标准，并
按照试验要求完成整个试验过程，同时在试验前签署
知情同意书。根据乳酸刺痛试验和受试者问卷选择敏
感性皮肤受试者。
1．2试验材料帮宝适@(超薄干爽系列大号，美国
宝洁公司生产)纸尿裤的中间部分测量2cm×3cm的
区域，用打孔机剪下，同时将边缘用Te鼬de瑚删胶带
(美国3M健康护理产品公司)密封以避免里面物质外
漏。用同样的方法处理护舒宝@(瞬洁丝薄日用，美国
宝洁公司)卫生巾。这样将纸尿裤和卫生巾制成斑贴
物。蒸馏水和质量体积为0．25％的十二烷基硫酸钠
(SLs)用25姗Hilltop斑试器(美国Hill￡op公司)。人
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2
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万方数据
三聚氰胺的毒性研究
作者： 林祥梅， 王建峰， 贾广乐， 梅林， 王众
作者单位： 林祥梅,贾广乐,梅林,王众(中国检验检疫科学院动植物检疫研究所,北京,100029)， 王建峰
(中国检验检疫科学院动植物检疫研究所,北京,100029;南京农业大学动物医学院)
刊名： 毒理学杂志
英文刊名： JOURNAL OF TOXICOLOGY
年，卷(期)： 2008,22(3)
被引用次数： 107次
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